冠心病患者血清血管生成素样蛋白4水平检测分析*

黎鹏飞 刘宗涛 刘 涛 魏 莱 雷晓燕

冠心病(Coronary Heart Disease，CHD)是冠状动脉粥样硬化狭窄导致心肌缺血缺氧的心血管疾病。近年来，CHD发病率逐步增长,这种现象在发展中国家显得尤为明显[1]。CHD死亡率高，严重影响广大人民的身体健康。既往研究发现脂质代谢紊乱、氧化应激以及炎症反应是CHD发病的中心环节[2]。血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)分子结构与血管生成素类似,人体绝大多数组织和器官均表达ANGPTL4，但主要由脂肪组织表达，因而又可称为脂肪因子[3]。现有研究表明ANGPTL4除具有ANGPTL家族调控能量代谢和血管生成作用外，还具有调节肥胖、脂质代谢以及炎症反应等特异性生物作用[3,4]。本文通过检测CHD患者血清ANGPTL4的表达水平,初步探讨其与脂代谢、炎症以及氧化应激有关指标的相关性以及其对CHD患者的诊断价值。

1 对象与方法

1.1 研究对象及分组

收集武汉市红十字会医院2018-05—2019-06收治的117例CHD患者(CHD组)，男59例，女58例，年龄 (75.80±13.35)岁，诊断均符合CHD分级诊疗指南[5]。另选取本院同期体检中心健康者作为健康对照(对照组，n=117)，男57例，女60例，年龄 (76.71±16.42)岁。排除：(1)近三个月使用激素者；(2)合并恶性肿瘤及严重感染等疾病者；(3)合并糖尿病者；(4)不愿意参加本研究者。所有患者及健康个体签署知情同意书。CHD组与对照组年龄、性别无统计学差异(P>0.05)，具有可比性。

1.2 检测指标和方法

CHD患者于入院第二天清晨抽取空腹静脉血5ml，3 000转/min离心10min分离血清待检。采用德国西门子ADVIA 2400型全自动生化分析仪及电化学法检测空腹血糖(FPG)，免疫比浊法检测低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、 总胆固醇(TC) 、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)水平。南京建成生物有限公司试剂盒硫代巴比妥酸比色法检测血清丙二醛(MDA)含量，黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性，上海康朗生物科技有限公司试剂盒酶联免疫吸附法检测血清ANGPTL4。所有检测均严格按照仪器和试剂说明书操作。对照组平行检测相同指标。

1.3 统计学处理

2 结 果

2.1 两组各指标水平比较

CHD组患者体重指数、腰围、臀围、FPG、LDL-c、TC、TG、hs-CRP、MDA均高于对照组，HDL-C和ANGPTL4水平低于对照组(P<0.01或P<0.05)；两组SOD 水平差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 两组受试者一般情况比较

注:与对照组相比，1)P<0.05，2)P<0.01

2.2 相关分析性以及多元性线性回归

Spearman's 等级相关分析显示，血清ANGPTL4与腰围(r=-0.125，P=0.011)、体重指数(r=-0.217，P=0.039) 、TC(r=-0.321，P=0.041)、LDL-C(r=-0.377，P=0.047)、MDA (r=-0.326，P=0.042) 、hs-CRP (r=-0.269，P=0.000)均明显相关。ANGPTL4与TG、SOD、HDL-C、臀围以及年龄无相关性(P>0.05)。将腰围、BMI、 TC、LDL-C、MDA、 hs-CRP进行多元线性逐步回归分析显示,MDA、TC、hs-CRP与ANGPTL4独立相关，回归方程YANGPTL4=36.67- 1.47XMDA-1.27XTC-0.27Xhs-CRP，回归模型决定系数R2=0.339(F=13.33，P=0.041)。

2.3 ANGPTL4对CHD的诊断性能评价

ROC曲线分析表明ANGPTL4诊断CHD的曲线下面积为0.745,95%CI(0.715, 0.875), 最佳截点24.35 ng/ml, 敏感性为79.7%，特异性为81.0%。见图1。

图1 血清ANGPTL4对CHD诊断的ROC曲线

3 讨 论

国内外学者针对CHD发病机制进行较为广泛的研究，既往学者研究认为胰岛素抵抗以及炎症反应是CHD主要发病机制[2，3]。近年来对CHD发病机制逐渐形成新的认识，认为脂肪细胞因子的失调表达是推动CHD的发生发展重要力量。脂肪组织不仅可通过蓄积脂肪达到贮存能量目的，而且可分泌各种生物活性成分通过多途径多阶段参与疾病的发生发展[6-8]。ANGPTL4蛋白的多种生物学效应均已经得到证实，它广泛参与肿瘤、内分泌等多系统多类型疾病发生发展[9-11]。ANGPTL4主要由人体白色脂肪组织合成和分泌,其合成和分泌受到炎症反应和氧化应激的调控[8]。本文CHD组患者血清ANGPTL4明显低于对照组，提示ANGPTL4是CHD的保护因素。为了进一步研究哪些因素可以调控ANGPTL4水平，本文通过运用Spearman's 等级相关评估了血清ANGPTL4与形态学、脂代谢、炎症以及氧化应激指标之间相关性，结果发现血清ANGPTL4与腰围、臀围及体重指数等指标相关性不一,提示血清ANGPTL4表达可能受到脂肪堆积量以及脂肪堆积部位的影响。此外，血清ANGPTL4还与脂代谢指标(TC、LDL-C)及炎症指标(hs-CRP)和氧化应激指标(MDA)呈负相关，这与文献报道ANGPTL4参与肥胖、调节脂质代谢氧化应激及炎症相符合[4，5]。多元逐步线性回归分析后发现MDA、TC、hs-CRP是ANGPTL4的独立影响因素，进一步证实ANGPTL4可能通过调节脂质代谢、氧化应激和炎症反应参与CHD的发生发展。其可能途径包括：(1)ANGPTL4通过抑制脂质吸收，以防止巨噬细胞泡沫化；(2)ANGPTL4抑制氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)吸收，减少巨噬细胞中胆固醇外流；(3)减少血管内皮细胞炎症反应[12]。

CHD危害大，死亡率高，其及早发现和诊断在CHD的防治工作中显得尤为关键。目前CHD诊断主要依赖冠脉造影,但冠脉造影存在操作复杂、技术要求高、检查耗时、价格昂贵等缺点，上述缺点限制冠脉造影对CHD的健康筛查价值[2]。临床工作者迫切寻求一种简捷、廉价、无创、诊断性能好的方法用于CHD的健康筛查。血清生物标志物因其具有上述优势被广泛运用于CHD健康筛查[13，14]。本文发现ANGPTL4诊断CHD 的ROC曲线下面积为0.745,95%CI (0.715,0.875), 最佳截点24.35ng/ml, 敏感性为79.7%和特异性为81.0%，提示ANGPTL4对CHD诊断效能较好。然而，本研究同时存在诸多不足，譬如本研究对象样本量有限, 研究未对CHD亚型进行分析，再者未考虑饮食等因素对ANGPTL4测定的影响。

综上所述，CHD患者血清ANGPTL4浓度降低,它与脂代谢、氧化应激及炎症密切相关，同时ANGPTL4对CHD的临床诊断也具有一定的应用价值，深入开展对ANGPTL4的相关研究有可能为CHD的发病机制提供更多依据。

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