C242T基因多态性与老年急性心肌梗死患者的相关性

田水 巫廷春 田龙海 叶芸

(1贵州省人民医院心内科，贵州 贵阳 550002；2贵州省中医药大学附二院心内科)

急性心肌梗死(AMI)是在冠状动脉急性、持续性缺血缺氧的基础上发生，多表现为胸骨后疼痛，可并发心律失常、休克等，常危及生命〔1〕。AMI是多基因疾病，其发生发展与多种易感基因有关。相关研究表明，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶活性降低会导致血管的氧化功能、氧化应激功能及降低活性氧功能的丧失，这与NADPH中细胞色素p22phox亚基C242T基因多态性有关〔2〕。同时，C242T多态性也是血红蛋白的潜在结合位点之一，对体内低密度脂蛋白表达水平有影响〔3〕。本文旨在探讨C242T基因多态性与老年AMI患者的关系。

1 资料及方法

1.1一般资料 选取贵州省人民医院2016年7月至2018年3月收治的126例老年AMI患者为病例组，同期选取132例健康体检者为对照组。纳入标准：符合《2016年中国成人血脂异常防治指南》〔4〕、《急性心肌梗死诊断和治疗指南》〔5〕诊断标准；意识清晰，无精神病史；无严重瓣膜病、心房颤动等；无严重凝血功能障碍。排除标准：严重肝肾疾病者；脑梗死者；周围动脉栓塞者；恶性肿瘤者；依从性差者。本研究已获得医院伦理委员会批准，患者及其家属均知情并签署相关同意书。

1.2提取外周血白细胞DNA方法 所有患者晨起空腹采肘静脉血5 ml，并低温储存于乙二胺四乙酸抗凝管中，备用。采用酚-氯仿有机油提法提取患者外周血白细胞DNA，并低温保存于TE缓冲液中，备用。

1.3指标检测 采用细胞NADPH氧化酶活性光度法定量检测酶活性；采用全自动生化分析仪检测血糖、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、总胆固醇水平；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定两组血浆氧化高密度脂蛋白(ox-HDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)及丙二醛水平；采用ELISA试剂盒测定血浆氧化低密度脂蛋白 (ox-LDL)水平；采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测基因型和等位基因。操作步骤均严格按照说明书进行。

1.4统计学方法 采用SPSS22.0软件进行t检验、χ2检验、Fisher确切概率法及Hardy-Weinberg平衡检验。

2 结 果

2.1两组基线资料比较 两组平均年龄、性别、吸烟史、饮酒史、糖尿病史、高血压史、平均收缩压、总胆固醇水平差异无统计学意义(P>0.05)；病例组心率、三酰甘油、白细胞计数、平均舒张压、空腹血糖、肌钙蛋白、LDL-C、ox-HDL、ox-LDL、丙二醛水平和NADPH氧化酶活性明显高于对照组，而HDL-C水平明显低于对照组(P<0.05，P<0.01)。见表1。

表1 两组基线资料比较

2.2C242T各位点基因型分布情况 经Hardy-Weinberg平衡检验，发现各基因型分布频率均为遗传平衡(P>0.05)，具有群体代表性。病例组CT+TT基因型携带者〔21例(16.67%)〕高于对照组〔8例(6.06%)〕，差异有统计学意义〔χ2=7.27,P<0.05,OR(95%CI):1.57(0.87～1.69)〕。

2.3两组基因型和等位基因频率比较 病例组TT、CT基因型频率和T等位基因频率明显高于对照组，而CC基因型频率和C等位基因频率低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 两组基因型和等位基因频率比较

2.4相关性分析 年龄、性别、吸烟史、饮酒史、糖尿病史、高血压史、三酰甘油、LDL-C、HDL-C及总胆固醇均不是混杂因素(χ2=2.62、0.08、0.04、1.05、2.20、2.93、1.82、3.13、1.62、1.95，P=0.11、0.77、0.84、0.31、0.14、0.09、0.18、0.08、0.20、0.16)，而丙二醛、ox-HDL、ox-LDL、NADPH氧化酶活性与C242T基因型相关(χ2=8.36、6.45、7.33、10.26，P<0.01、P=0.03、0.02、0.00)。

3 讨 论

AMI是在冠状动脉病变的基础上发生的一种缺血性心肌坏死〔6〕。病因复杂，可能与高血压、糖尿病、生活压力、体力劳动等有关〔7〕。国外研究表明〔8〕，C242T基因多态性可减少埃及人AMI的发生，并发现 CT基因型者ox-LDL血浆浓度显著低于 CC基因型者。相关研究表明，基因序列变异能改变其表达，并导致产生的蛋白质功能异常，从而影响疾病进展〔9〕。为此，推测C242T基因多态性可能与AMI的发生发展存在一定关系。

研究表明，LDL氧化能增强动脉粥样硬化效应，而HDL氧化则会降低抗动脉粥样硬化效应〔10〕。另外，其他研究〔3，11〕发现NADPH氧化酶p22phox亚单位CT+TT基因型携带者的ox-LDL水平显著高于CC基因型，本研究结果与之相符。另有研究表明，NADPH氧化酶活性与AMI的进展存在一定相关性〔12〕。NADPH氧化酶是血管系统中活性氧的主要来源，活性氧是动脉粥样硬化发病的重要危险因素，NADPH氧化酶活性越高，活性氧含量越高，越容易形成动脉粥样硬化斑块，同时NADPH氧化酶活性受C242T基因型的影响。丙二醛是血浆脂质过氧化产物，有研究表明C242T基因多态性与丙二醛水平相关〔13〕。本研究结果与之相似，表明C242T基因多态性与老年AMI的发生有关。另外，C242T多态性可能是冠状动脉病变的危险因素，携带T等位基因很可能会增加冠状动脉疾病的发生〔14〕。本研究结果表明，携带等位基因T患者发生AMI的风险较高。

综上所述，NADPH氧化酶细胞色素p22phox亚基C242T基因多态性会影响NADPH氧化酶的活性，与老年AMI患者存在相关性。