老年2型糖尿病微血管病变与内皮素、基质金属蛋白酶－9及其他危险因素的相关性分析

周 霖，刘红斌

2 型糖尿病（Type 2 diabetes，T2DM）是我国中老年人常见病，其发病率随着年龄的升高有上升趋势［1］。微血管病变是老年T2DM患者最常见的并发症之一，主要是因为T2DM患者微循环功能性改变、内皮组织损伤、基膜增厚、血黏度增高，导致微血管闭塞或血栓形成，进而诱发微血管病变，常常累及患者眼部、肾脏和周围组织，危及其生命健康。有报道指出，血管内皮细胞功能异常与微血管病变的发生存在密切关系，血管内皮细胞损伤时，会释放内皮素（endothelin，ET）入血，导致血浆ET水平升高，这表明血浆ET水平可能也与微血管病变的发生存在某种联系［2］。 基质金属蛋白酶－9（matrix metalloproteinase－9，MMP－9）是一种明胶酶，能够诱导炎症反应，参与了动脉粥样硬化的形成过程，并且可调节肿瘤血管的增殖，但目前尚不知其与T2DM微血管病变的相关性［3］。笔者通过分析ET、MMP－9水平与T2DM患者微血管病变的相关性，旨在探究T2DM患者ET、MMP－9水平变化的临床意义，现报告如下。

1 资料与方法

1.1临床资料选取2017年8月—2019年3月在笔者所在医院治疗的T2DM患者153例，按照微血管病变的有无将其分为微血管病变组（n=85）和无血管病变组（n=68）。微血管病变组中男39例，女46例；年龄 61～85 岁，平均（71．91±7．26）岁；空腹血糖7．10～16．18 mmol/L，平均（10．61±1．89） mmol/L；餐后2 h 血糖 9．92～18．15 mmol/L，平均（14．32±2．79） mmol/L；病变类型：视网膜病变28例、肾病23例、神经系统病变19例、合并两种以上病变15例。无血管病变组中男 37 例，女 31 例；年龄 60～86 岁，平均（72．39±7．12）岁；空腹血糖 7．37～15．24 mmol/L，平均（10．53±1．97） mmol/L； 餐后 2 h 血糖 9．71～18．69 mmol/L，平均（14．25±2．87） mmol/L。 两组在性别、年龄、T2DM病程及空腹血糖、餐后2 h血糖方面对比差异无统计学意义（P＞0．05）。

1.2纳入标准（1）符合《中国2型糖尿病防治指南（2017 年版）》关于 T2DM 的诊断标准［4］；（2）经医院伦理委员会审核通过，患者知情同意且签署同意书；（3）空腹血糖＞7 mmol/L；（4）餐后 2 h 血糖＞9 mmol/L；年龄≥60岁。

1.3排除标准（1）严重肝肾功能异常者；（2）T1DM 患者；（3）严重心脑血管疾病患者；（4）恶性肿瘤患者；（5）合并血液系统疾病患者；（6）近 1个月内服用影响血清 ET、MMP－9 水平的药物者；（7）近半年内有手术史者。

1.4方法ET、MMP－9含量测定：于患者入院后24 h内，采集其空腹静脉血6 ml，取4 ml静脉血应用高速离心机进行离心处理，转速为3500 r/min，应用国产联迈生物科技公司的MMP－9 ELISA试剂盒，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测其血清MMP－9 含量，临界值为 250 ng/ml［5］；在 2 ml静脉血中加入30 μl 10%乙二胺四乙酸二钠和40 μl抑酞酶，混匀，分离血浆，应用北京东亚免疫技术研究所提供的ET药盒，采用放射免疫法测定血浆ET水平，临界值为 100 ng/L［6］。

1.5观察指标（1）比较两组ET、MMP－9水平。（2）分析T2DM患者ET、MMP－9含量间的相关性。（3）收集患者一般资料，采用多元logistic回归分析影响T2DM患者出现微血管病变的危险因素。

1.6统计学处理数据采用SPSS 17软件处理，计数资料以%表示，组间差异比较采用χ2检验；血清ET含量等计量资料经正态检验后用（x±s）表示，组间差异比较用t检验；采用pearson检验分析T2DM患者 ET、MMP－9含量间的相关性；采用多元logistic回归分析影响T2DM患者出现微血管病变的危险因素。P＜0．05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1两组ET、MMP-9水平比较微血管病变组ET、MMP－9 水平均高于无血管病变组（P＜0．05）。 见表1。

表1 两组ET、MMP-9水平比较

2.2 T2DM患者ET、MMP-9水平间的相关性经pearson检验分析得，T2DM患者ET水平与MMP－9 水平呈正相关（r=0．469，P=0．000）。

2.3影响T2DM患者出现微血管病变的危险因素分析对所得数据进行赋值：年龄＞70岁为1，≤70岁为0；吸烟＞1支/d为1，≤1支/d为0；饮酒≥120ml/周为 1，＜120 ml/周为0；患高血压为 1，无高血压为0；患高脂血症为1，无高脂血症为0；患心脏病为1，无心脏病为0；患脑卒中为1，无脑卒中为0；T2DM病程≥10年为 1，＜10年为 0；ET≥100 ng/L为 1，＜100 ng/L 为 0；MMP－9≥250 ng/L 为 1，＜250 ng/L为0。采用多元logistic回归模型进行分析，得患高血压、心脏病、脑卒中、T2DM病程≥10年、血清ET水平≥100 ng/L、血浆 MMP－9≥250 ng/ml是影响T2DM患者出现微血管病变的危险因素 （P＜0．05）。 见表 2。

表2 影响T2DM患者出现微血管病变的危险因素分析

3 讨论

ET是调节心血管功能的重要因子，广泛存在于各种组织和细胞中，对维持心血管稳态具有重要意义［7］。T2DM微血管病变患者因机体各器官代谢紊乱，且血液中糖化血红蛋白、血小板等因子分泌异常，血液黏度增高，导致血液微循环障碍，血管内皮细胞损伤，从而使ET释放增加，并且ET可促进血管平滑肌细胞增殖，使管腔狭窄，加重微血管病变，形成恶性循环［8］。该研究中，微血管病变组血浆ET水平高于无血管病变组，说明T2DM微血管病变患者存在血浆ET水平偏高的现象。Ruest等［9］研究也指出，T2DM微血管病变患者普遍血浆ET水平高于无血管病变的患者，与该研究结果相同。

MMP－9是基质金属蛋白酶家族的一员，主要调节中性粒细胞和巨噬细胞的合成和分泌，参与了血管的再生及炎症反应等生理病理过程，其可破坏细胞组织、产生炎症反应而发挥促炎作用［10］。佟强等［11］研究指出，T2DM微血管病变患者的血糖水平升高能够使MMP－9的过度表达。T2DM微血管病变的病理基础是动脉粥样硬化，而动脉粥样硬化会造成血管组织损伤，诱发局部炎症反应，进而导致血清 MMP－9水平上升［12］。该研究中，微血管病变组MMP－9水平均高于无血管病变组，说明T2DM微血管病变患者血浆MMP－9水平高于无微血管病变患者。另外，笔者发现，T2DM患者ET水平与MMP－9水平呈正相关，说明患者ET水平会随着MMP－9水平的升高而升高，这主要是因为ET参与血管的再生和增殖，而MMP－9参与血管炎症反应的病理过程，两者均与血管损伤有关。

血管内皮细胞是血管的重要组成部分，内皮细胞损伤会造成ET释放入血，使血浆ET升高，导致血流动力学改变，进而诱发微血管病变；MMP－9与多种细胞因子均存在联系，能够诱发病理炎症反应而引发微血管病变［13，14］。 韦华等［15，16］研究指出，ET、MMP－9水平异常是导致T2DM患者出现微血管病变的重要因素。笔者进一步证实了，血浆ET水平≥100 ng/L、血浆 MMP－9≥250 ng/ml是影响 T2DM 患者出现微血管病变的危险因素（P＜0．05），这主要是因为当机体ET水平升高时，会起到强烈的缩血管作用，可诱导细胞内钙离子增高，影响血管内外胶体渗透压平衡，并且能促进血管内皮细胞的分裂和增殖，进而导致血管病变的发生［17］，而血浆 MMP－9水平升高时，会诱导局部炎症反应，使血管内血小板凝集而出现局部血栓，从而诱发微血管病变，这表明通过控制T2DM患者ET、MMP－9水平能降低微血管病变发生的危险性。

综上所述，T2DM患者ET、MMP－9水平与其出现微血管病变呈正相关，且血浆ET水平≥100 ng/L、血浆MMP－9≥250 ng/ml为影响其出现微血管病变的独立危险因素，因此，应定时检测患者ET、MMP－9水平，对于ET、MMP－9水平高于正常范围值的患者，应适当给予治疗干预，以降低微血管病变的发生率。