子宫内膜异位症患者凝血指标、炎性因子和氧化应激指标表达水平的价值

龙宁 刘跃辉 徐凡 罗岳西 林川 蒋海霞

子宫内膜异位症是一种复杂综合征，是育龄女性中非常普遍的疾病，其特征在于雌激素依赖性慢性炎性过程，其主要影响包括卵巢在内的盆腔组织，当脱落的子宫内膜组织逆行进入下腹腔时引起[1]。子宫内膜异位症是女性慢性盆腔疼痛的最常见原因，并与不孕症有关。有证据表明，腹膜异位子宫内膜病灶可能诱发局部炎性反应，巨噬细胞的募集，细胞因子的释放和活性氧的产生，导致促氧化剂腹膜微环境[2,3]。这些改变可以系统地反映并且还影响卵泡微环境。子宫内膜异位症的晚期可能导致妇科恶性肿瘤，如卵巢癌，以及其他并发症[4，5]。最近的研究表明，炎性可能与氧化应激一起在子宫内膜异位症的发生发展中发挥作用[6,7]。本研究对子宫内膜异位症患者的凝血指标、炎性因子和氧化应激指标进行检测，探讨其表达的临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2016年至2019年3月在我院就诊的120例子宫内膜异位症患者作为异位症组，患者均经病理检查确诊，其中Ⅰ期35例，Ⅱ期47例，Ⅲ期22例，Ⅳ16例。选取盆腔炎且子宫内膜正常患者120例作为对照组。2组平均年龄、体重指数、经量、月经周期、经期、痛经、孕次、产次比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 2组患者一般资料比较 n=120,例(%)

1.2 纳入与排除标准

1.2.1 纳入标准：①子宫内膜异位症患者均符合“子宫内膜异位症的诊治指南”[8]的相关诊断标准；②就诊前1个月内未进行激素或免疫抑制剂治疗；③患者神志清楚，无精神疾患；④月经规律；⑤患者和(或)家属知情同意，并签署知情同意书。

1.2.2 排除标准：①子宫、卵巢先天发育异常者；②患者怀孕或处于绝经期；③有其他重要脏器器质性病变：如肿瘤，严重的心脏疾患，肝肾功能障碍，贫血、凝血功能障碍等血液疾病者；④患者有精神疾患，不能配合诊疗者；⑤患者和(或)家属不同意进行试验者。

1.3 观察指标 抽取患者清晨空腹肘静脉血5 ml，置于抗凝管内，采用离心机进行离心，3 000 r/min，离心10 min，取上清液置于-70℃冰箱内保存。

1.3.1 凝血指标：采用CS全自动凝血分析仪CS-2100i(希森美康集团)检测患者凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)和D-二聚体(D-D)水平。

1.3.2 炎性因子：采用酶联免疫吸附法检测2组受检者白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、糖类抗原125(CA125)水平。试剂盒购自上海酶联生物技术有限公司，严格按照说明书进行操作。

1.3.3 氧化应激：采用酶联免疫吸附法检测2组受检者脂质过氧化特异性产物8-异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、人活性氧自由基(ROS)、对氧磷酶-1(PON-1)水平。试剂盒购自上海酶联生物技术有限公司，严格按照说明书进行操作。

2 结果

2.1 2组凝血指标比较 异位症组PT低于对照组，ATPP、FIB和D-D高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)，2组TT水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

2.2 2组炎性因子水平比较 异位症组IL-6、IL-8、MCP-1、TNF-α和CA125水平均高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表3。

2.3 2组氧化应激水平比较 异位症组8-iso-PGF2α、ROS水平高于对照组，GSH-Px、PON-1水平低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表4。

表2 2组凝血指标比较

组别IL-6(pg/ml)IL-8(pg/ml)MCP-1(pg/ml)TNF-α(pg/ml)CA125(U/ml)对照组 16.92±4.9619.72±5.2622.52±4.1512.45±5.2323.97±13.31异位症组30.34±5.4328.84±3.7237.27±6.2525.73±3.3873.41±20.34t值19.99015.50721.53723.36222.280P值0.0000.0000.0000.0000.000

组别8-iso-PGF2α(ng/ml)GSH-Px(U/L)ROS(pg/ml)PON-1(pg/ml)对照组 166.73±14.84311.97±12.79328.80±29.05212.13±8.10异位症组211.89±17.53258.59±16.60484.61±31.29150.54±8.28t值21.53927.90439.97658.247P值0.0000.0000.0000.000

2.4 不同分期子宫内膜异位症凝血指标比较 子宫内膜异位症Ⅲ、Ⅳ期组FIB水平高于Ⅰ、Ⅱ期组，差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅲ、Ⅳ期组PT、ATPP、TT水平低于Ⅰ、Ⅱ期组,D-D水平高于Ⅰ、Ⅱ期组，但差异无统计学意义(P>0.05)。见表5。

组别PT(s)ATPP(s)TT(s)FIB(g/L)D-D(mg/L)Ⅰ、Ⅱ期组(n=82)13.37±4.0036.01±6.2315.65±5.083.09±1.001.03±0.42Ⅲ、Ⅳ期组(n=38)12.97±3.5335.16±6.0915.13±5.803.54±1.121.13±0.54t值0.5280.7000.4982.2071.105P值0.5980.4850.6190.0290.271

2.5 不同分期子宫内膜异位症炎性因子水平比较 Ⅲ、Ⅳ期组IL-6、IL-8、MCP-1、TNF-α和CA125水平均高于Ⅰ、Ⅱ期组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表6。

组别IL-6(pg/ml)IL-8(pg/ml)MCP-1(pg/ml)TNF-α(pg/ml)CA125(U/ml)Ⅰ、Ⅱ期组(n=82)17.25±2.5623.62±3.0332.49±2.6321.56±2.6461.23±6.17Ⅲ、Ⅳ期组(n=38)32.37±2.5529.58±3.1539.34±2.8529.74±2.9380.26±13.41t值30.1349.89919.34915.24510.114P值0.0000.0000.0000.0000.000

2.6 不同分期氧化应激水平比较 Ⅲ、Ⅳ期组8-iso-PGF2α、ROS水平高于Ⅰ、Ⅱ期组，GSH-Px、PON-1水平低Ⅰ、Ⅱ期组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表7。

组别8-iso-PGF2α(ng/ml)GSH-Px(U/L)ROS(pg/ml)PON-1(pg/ml)Ⅰ、Ⅱ期组(n=82)197.89±12.42253.59±12.26419.54±27.34163.21±9.28Ⅲ、Ⅳ期组(n=38)219.49±10.68248.50±11.34501.25±26.58125.67±7.13t值9.2482.16515.36222.081P值0.0000.0320.0000.000

3 讨论

子宫内膜异位症是一种常见的妇科疾病，影响着全世界数百万女性，其症状包括痛经，慢性盆腔疼痛和不孕症[9]。理论上，由于月经逆行现象，子宫内膜异位症的诊断通常会延迟8～10年，因为青少年女孩和年轻女性的症状经常被误诊[10]。一项荟萃分析发现，子宫内膜异位症在健康相关生活质量评分(QoL)的所有领域都有负面影响，，其还对睡眠质量和感知压力产生负面影响[11]。随着早期月经初潮相关的年轻女孩子宫内膜异位症的发病率增加，诊断生物标志物的开发对于诊断和治疗子宫内膜异位症患者是必不可少的。本研究对子宫内膜异位症患者的凝血指标、炎性因子和氧化应激指标进行检测，探讨其表达的临床意义。

3.1 凝血指标 子宫内膜异位症患者被改变凝血因子、激活血小板处于高凝状态[12]。Wu等[13]研究发现，与对照组比较，子宫内膜异位症患者的APTT和TT明显缩短，纤维蛋白原水平升高，它们还具有显着更高的循环脱粒血小板百分比，并且在手术切除子宫内膜异位病变后1个月显著降低百分比，这些发现提供了子宫内膜异位症女性高凝状态的证据，反映凝血和炎性之间的密切关系，同时他们还建议这些凝血参数如APTT和纤维蛋白原等可用于诊断或预后。本研究发现，异位症组PT低于对照组，ATPP、FIB和D-D高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)，2组TT水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。子宫内膜异位症Ⅲ、Ⅳ期组FIB水平高于Ⅰ、Ⅱ期组，差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅲ、Ⅳ期组PT、ATPP、TT水平低于Ⅰ、Ⅱ期组,D-D水平高于Ⅰ、Ⅱ期组，但差异无统计学意义(P>0.05)。说明，子宫内膜异位症患者处于高凝状态，但除外FIB外，其余指标在不同分期间无明显差别，这可能与局部凝血系统发挥作用有关[14]。

3.2 炎性因子 炎性在子宫内膜异位症的发病机制中起作用。尽管在许多病例对照研究中的研究人员发现子宫内膜异位症患者的炎性标志物升高，但结果并不一致，并且没有先前的前瞻性研究存在[2,3]。Mu等[15]对350例子宫内膜异位症患者和694例健康对照患者进行比较，发现子宫内膜异位症的发病与可溶性肿瘤坏死因子α受体2水平的显着非线性关联，在浓度>3 400 pg/ml时子宫内膜异位症的风险升高。Fan等[16]研究发现，IL-37、IL-17A、IL-10和IL-2可能在子宫内膜异位症的免疫应答中起重要作用。本研究发现，异位症组IL-6、IL-8、MCP-1、TNF-α和CA125水平均高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。Ⅲ、Ⅳ期组IL-6、IL-8、MCP-1、TNF-α和CA125水平均高于Ⅰ、Ⅱ期组，差异均有统计学意义(P<0.05)。说明炎性可能与子宫内膜异位症的发生发展密切相关。

3.3 氧化应激 ROS的过量释放通过调节蛋白质活性和基因表达诱导细胞损伤并改变细胞功能，导致有害作用。氧化应激目前被认为是子宫内膜异位症相关炎性的主要参与者，通过月经回流和巨噬细胞移植到腹膜腔中的红细胞，凋亡子宫内膜组织和细胞碎片都被认为是氧化应激的潜在诱导剂，在此期间过量产生活性氧物质(继发于血红素和铁等促氧化剂的腹膜内流)可通过核因子-κB活化诱导细胞损伤和增加的促炎基因表达[17，18]。研究发现，在子宫内膜异位症的严重阶段，SOD和谷胱甘肽过氧化物酶的中位活性最低，而在血液和腹膜液样品中子宫内膜异位症的严重阶段，脂质过氧化物的中值活性最高，随着子宫内膜异位症的严重程度增长，氧化应激水平在统计学上显著增加[19]。本研究发现，异位症组8-iso-PGF2α、ROS水平高于对照组，GSH-Px、PON-1水平低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。Ⅲ、Ⅳ期组8-iso-PGF2α、ROS水平高于Ⅰ、Ⅱ期组，GSH-Px、PON-1水平低Ⅰ、Ⅱ期组，差异均有统计学意义(P<0.05)。说明氧化应激反应参与了疾病的发生发展。

本研究发现子宫内膜异位症患者血液呈高凝状态，机体出现炎性表达和氧化应激反应，且随着临床分期增加而相应变化，说明炎性因子和氧化应激可能参与到子宫内膜异位症的发生发展过程中。