血清壳酶蛋白对原发性肝癌的诊断价值

杨小林，章正浩，韩璐，李烨佳，陈红微

（绍兴文理学院附属医院，浙江 绍兴 312000）

原发性肝癌是全球最常见的恶性肿瘤之一，其病死率居恶性肿瘤的第二位[1]，严重威胁人类健康。目前肝脏活检是诊断原发性肝癌的金标准，血清学筛查主要采用血清甲胎蛋白（alpha-fetoprptein，AFP）[2]，大多肝癌在中晚期得到首次诊断，贻误手术时机。壳酶蛋白（CHI3H1）是壳多糖酶家属一员，能参与炎性反应、细胞增殖和分化，保护细胞凋亡、促进血管生成及细胞外基质的重构等病理过程[3]。本研究通过检测原发性肝癌、慢性乙型肝炎患者和正常人血清CHI3H1水平，探讨其对肝癌的诊断价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2014年1月-2019年12月在本院住院治疗的原发性肝癌患者108例，纳入标准：（1）符合《原发性肝癌的临床诊断与分期标准》[4]中原发性肝癌的诊断标准，且分期为I-II期可手术者，最终经病理确诊；（2）临床资料完整。排除标准：（1）合并凝血功能障碍、精神系统疾病；（2）合并其他恶性肿瘤疾病；（3）伴全身严重感染者或合并重要脏器器质性损伤。收集同期慢性乙型肝炎患者101例，纳入标准：（1）诊断标准符合慢性乙型肝炎防治指南（2010 年版）[5]；（2）年龄 18-65 岁；（3）乙型肝炎表面抗原持续阳性＞6个月；（4）血清HBV DNA≥105IU／mL；（5）血清丙氨酸转氨酶（ALT）≥2UIL。排除标准：（1）合并肝功能失代偿性表现；（2）合并其他慢性肝病，如血色病、自身免疫性肝炎等；（3）妊娠期或哺乳期妇女；（4）合并心脑血管、糖尿病或其他可能影响CHI3H1水平的慢性疾病者。收集同期体检健康者50例为正常对照组。三组一般资料比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。研究经本院伦理委员会审查通过，入组患者均知情同意。

表1 三组一般资料比较

1.2 方法 ELISA检测结果判读使用Thermo Multiskan FC酶标仪。ELISA法检测血清CHI3L1水平：所有标本均抽取清晨空腹静脉血空腹3mL，以3000r/min离心10分钟，血清分装并于-70℃储存备用。采用杭州普望生物技术有限公司生产的ELISA试剂盒，按照试剂盒说明书进行操作，每次检测均使用试剂厂家提供的标准品和质控品，标准品每次使用前当天复溶，质控品和待测样本同步在酶标板进行检测，质控在控为本次检测有效。以标准CHI3L1蛋白稀释后浓度为参考标准，绘制标准曲线，根据标准曲线计算样本CHI3L1浓度，以pg/mL表示。比较三组血清CHI3L1水平，并对比肝癌患者术前1天、术后7天血清CHI3L1水平。

1.3 统计学处理 采用SPSS23.0统计软件进行分析。正态分布的计量资料用（±s）表示，不同组间的比较用非参数秩和检验。绘制ROC曲线，并计算曲线下面积。

2 结果

2.1 CHI3L1水平 原发性肝癌组血清CHI3L1水平高于慢性乙型肝炎组及正常对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。慢性乙型肝炎组CHI3L1水平高于正常对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表2。原发性肝癌组术前1天CHI3L1为（241.8±64.2）pg/mL，术后 7 天降为（78.0±24.1）pg/mL，差异有统计学意义（P＜0.05）。

表2 三组 CHI3L1水平比较（±s，pg/mL）

表2 三组 CHI3L1水平比较（±s，pg/mL）

与正常对照组比较*P＜0.05，与慢性乙型肝炎组比较#P＜0.05

组别 n C H I 3 L 1原发性肝癌组 1 0 8 2 4 1.8±6 4.2*#慢性乙型肝炎组 1 0 1 1 5 2.5±4 8.9*正常对照组 5 9 4 6.8±1 2.5

2.2 诊断价值根据血清CHI3L1水平绘制ROC曲线，曲线下面积（Area under curve，AUC）等于 0.772（95%CI0.715-0.829）。以血清CHI3L1水平134.7pg/mL为临界值时，原发性肝癌诊断的灵敏度为84.3%、特异性为62.3%。

图1 血清CHI3L1水平诊断肝癌的ROC曲线

3 讨论

肝脏是人体重要的免疫器管，肝癌患者多伴免疫障碍[6]。CHI3L1是分子量为40 000的糖蛋白，在炎症、纤维化、肿瘤等疾病中表达增加。有报道显示，CHI3L1是肝脏特异基因的表达产物[7]，随肝纤维化程度的增加而增加，是5个标志物中诊断纤维化的最佳血清标志物[8]。另有研究表明，CHI3L1在肝癌的发生、发展、肿瘤耐药中起到促癌的作用[9-11]，可能成为肝癌诊断的潜在肿瘤标记物。为评价血清CHI3L1的临床诊断价值，本研究应用ELISA方法检测了肝癌、慢性乙型肝炎患者和正常体检者的血清CHI3L1水平，结果显示肝癌患者血清CHI3L1水平显著高于慢性肝炎及正常体检者（P＜0.05）。分析其诊断价值发现，当血清CHI3L1水平为134.7pg/mL时，该指标对肝癌具有一定的诊断价值，其灵敏度为84.3%、特异性为62.3%。观察肝癌患者手术前后该指标的变化发现，与手术前比较，术后7天患者血清CHI3L1水平下降（P＜0.05）。

综上，血清CHI3L1在原发性肝癌患者中水平较高，对肝癌的诊断具有一定的参考价值，是一个潜在的肝癌诊断标志物，其波动趋势可作为预后评估的参考。