外周血T淋巴细胞亚群联合免疫球蛋白检测在手足口病诊断中的价值

赵晓军,尚小玉

(1.陕西省潼关县人民医院 检验科,陕西 潼关,714399;2.陕西省西安市高陵区妇幼保健院 检验科,陕西 西安,710200)

手足口病多由肠道病毒感染所致，目前已知有超过20种的肠道病毒可引发此病，其中柯萨奇病毒A16型和肠道病毒71型最为常见。该病以5岁以下的低龄儿童为主要发病对象，患儿发病时可在手、足、口处出现溃疡或疱疹，同时伴随厌食、低热等全身性表现，部分患儿可在发病过程中出现肺水肿、心肌炎、无菌性脑膜炎等并发症，严重时可导致患儿死亡[1-3]。目前临床尚未研制出根治手足口病的特效药，只能结合患者具体症状采取对症治疗措施，这就需要临床工作者尽早确诊此病，以促进疾病治疗工作的开展[4]。本研究探讨了外周血T淋巴细胞亚群联合免疫球蛋白检测在手足口病诊断中的临床应用价值，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年1月—2018年1月本院收治的200例手足口病患者纳入手足口病组，并将同期接受体检的200名儿童纳入健康对照组。手足口病组男104例，女96例;年龄5～59个月，平均(34.28±4.72)个月;轻型135例[男70例，女65例，年龄6～58个月，平均(34.32±4.75)个月]，重症65例[男34例，女31例，年龄5～59个月，平均(34.21±4.69)个月]。健康对照组中，男100名，女100名，年龄6～60个月，平均(34.24±4.72)个月。纳入标准:①入组患儿临床症状和体征表现与手足口病诊断标准[5]一致;②年龄不超过5岁;③患者家属了解本研究详情并知情同意。排除标准:① 心、脑、肝、肾等脏器功能异常者;② 合并其他类型免疫系统病变者;③ 哭闹不止，配合度差者。2组间基线数据对比，差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 外周亚细胞群检测:入组者入院当天抽取2 mL外周静脉抗凝血，使用流式细胞仪获取细胞，并用软件Simulset对获得的数据予以处理，测得CD3+、CD4+、CD8+T细胞占比。

1.2.2 免疫球蛋白检测:入组者于晨起空腹状态下抽取2 mL外周静脉血，使用全自动离心机以2 500转/min速度进行离心处理，时间5 min,取上层清液作为待测标本;使用德国西门子公司生产的全自动蛋白分析仪进行免疫球蛋白A、免疫球蛋白G和免疫球蛋白M水平的检测，所用检测方法为散射比浊法。

1.3 观察指标

① 不同检测方式的疾病检出率:比较外周血T淋巴细胞亚群、免疫球蛋白单独检测和联合应用对手足口病的检出率。② 2组外周血T淋巴细胞亚群水平:对比健康对照组儿童和手足口病组患者的CD3+、CD4+、CD8+水平。③ 2组免疫球蛋白水平:比较健康对照组儿童和手足口病组患者的免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M水平。④ 不同程度手足口病患者外周血T淋巴细胞亚群和免疫球蛋白水平:比较轻型患者和重度患者的CD3+、CD4+、CD8+、免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M水平。

1.4 统计学处理

2 结 果

2.1 不同检测方式的疾病检出率

外周血T淋巴细胞亚群联合免疫球蛋白检测对手足口病的检出率为93.00%(186/200),高于外周血T淋巴细胞亚群检测的检出率82.50%(165/200)、免疫球蛋白检测的检出率83.50%(167/200),差异均有统计学意义(P<0.05)。

2.2 2组外周血T淋巴细胞亚群水平对比

手足口病组患者的CD3+、CD4+、CD8+T细胞水平低于健康对照组儿童，差异均有统计学意义(P<0.05),见表1。

2.3 2组免疫球蛋白水平对比

2组免疫球蛋白M水平对比，差异无统计学意义(P>0.05),手足口病组患者的免疫球蛋白A、免疫球蛋白G水平低于对照组儿童，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表1 2组外周血T淋巴细胞亚群水平比较 %

与健康对照组比较,*P<0.05。

表2 2组免疫球蛋白水平比较结果 g/L

与健康对照组比较,*P<0.05。

2.4 不同程度手足口病患者外周血T淋巴细胞亚群和免疫球蛋白水平对比

轻型手足口病患者CD3+、CD4+、CD8+、免疫球蛋白A、免疫球蛋白G水平均高于重症手足口病患者，差异有统计学意义(P<0.05),但二者免疫球蛋白M水平差异无统计学意义(P>0.05),见表3。

表3 不同程度手足口病患者外周血T淋巴细胞亚群和免疫球蛋白水平对比

与轻型手足口病比较,*P<0.05。

3 讨 论

手足口病是常见的感染性疾病，潜伏期2～10 d,大多患者为3～5 d。普通患者起病急，可在舌、硬腭和颊黏膜等处出现溃疡或疱疹，也可累及牙龈、扁桃体和咽喉，手足可有皮疹出现，数目在数个到数十个不等，消退后无色素沉着，不留瘢痕，多数患者可在1周内痊愈，预后较好。部分患者特别是年龄不足3岁者病情发展快，可在短时间内出现脑膜炎、肺水肿和循环障碍等异常，严重时可致死，存活者可有后遗症。目前，手足口病的发病机制和致病原因尚未完全明确，临床需开展更为广泛而深入的研究[6-8]。研究[9]结果显示，手足口病患者存在严重的免疫功能紊乱情况。

T淋巴细胞是淋巴细胞中起着重要作用的组成部分，对靶细胞杀伤力强，是机体防御过程不可缺少的参与者[10-11]。CD3分子仅存在于T细胞表面，包括6条肽链，可连接T细胞抗原受体，在T细胞信号传导中发挥着重要作用，以维持T细胞受体结构稳定性。CD4+T细胞可刺激β细胞对抗体的合成和分泌，对其他类型T细胞的分化同样有着明显促进作用;CD8+T细胞的作用主要体现在对β细胞抗体产生和其他类型T细胞分化的抑制上[12-14]。CD4+T细胞和CD8+T细胞对细胞免疫功能的发挥起着协调与制约作用，以维持T细胞网络的稳定性[15]。病毒或细菌感染，可使免疫功能失调，改变淋巴细胞亚群功能，削弱机体免疫功能，导致各种疾病的发生。本研究结果显示，健康对照组CD3+、CD4+、CD8+T细胞水平显著高于手足口病组，轻型手足口病患者CD3+、CD4+、CD8+水平高于重症患者(P<0.05),证实了上述观点。

免疫球蛋白是体液免疫中的效应因子，与抗体活性一致，化学结构类似，免疫球蛋白A、免疫球蛋白G和免疫球蛋白M是其中较为重要的几种。机体发育过程中，免疫球蛋白M活性最强，合成分泌最早，形成体液免疫的首道防线，可经浆细胞进行免疫球蛋白A、免疫球蛋白G的分泌，后者含量高，半衰期长，可结合免疫球蛋白受体发挥调理吞噬等作用，前者含量相对较低，但可在病毒感染者体内发挥吞噬作用，对毒素有着明显清除作用[16-18]。本研究结果显示，健康对照组水平免疫球蛋白A、免疫球蛋白G显著高于手足口病组，轻型手足口病患者免疫球蛋白A、免疫球蛋白G水平高于重症患者(P<0.05),证实了上述观点。健康者和手足口病患者免疫球蛋白M水平无显著差异，分析原因可能是病毒感染过程中，免疫球蛋白M首先出现，持续时间有限，只在疾病早期诊断中发挥作用。

综上所述，外周血T淋巴细胞亚群联合免疫球蛋白检测在手足口病诊断中有重要价值，还可对疾病严重程度进行判定，值得推广应用。