强直性脊柱炎患者外周血Th17/Treg平衡状态对疾病状况的评估价值

2020-04-20王亚芳宋爱凤

国际检验医学杂志 2020年7期

王亚芳,王梅,宋爱凤

(内蒙古自治区人民医院风湿免疫科，内蒙古呼和浩特 010017)

强直性脊柱炎(AS)是一种主要累及骶髂关节、脊柱附着点的慢性炎症性疾病，以关节强直为病变特点，临床表现不一、判断其病情活动度的难度较大[1-2]。常规红细胞沉降率检测对AS病情评估的敏感性不足；巴斯AS病情活动指数在AS病情判断中的应用十分广泛，但其具体分值由患者主观评价而得，且很大一部分没有关节外表现的患者评分可存在明显偏倚，寻找准确、客观的AS病情评估指标是临床研究的重点。AS也属于自身免疫性疾病，较多研究证实在病情进展过程中伴随着患者免疫功能的严重损伤，其中T淋巴细胞亚群分布失衡是重要表现之一，故推测检测免疫细胞分布情况是判断AS病情现状的可靠手段之一[3-4]。Th17/Treg是近年备受关注的CD4+T淋巴细胞亚群，已有研究证实其与系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等自身免疫性疾病的病情转归密切相关[5-6]。文中检测AS患者的Th17/Treg平衡状态，探讨其对AS病情的评估价值，旨在为日后AS病情判断寻找便捷、可靠的新指标，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料选取2017年2月至2019年2月在本院确诊为AS的患者90例作为AS组，其中男性50例，女性40例，年龄19～67岁，平均(43.27±8.91)岁，体质量指数22～26 kg/m2，平均(23.87±2.95)kg/m2。纳入标准：(1)符合《强直性脊柱炎诊断及治疗指南》[7]中对AS的定义；(2)首次确诊疾病、未经相关治疗；(3)患者年龄小于80岁；(4)本人签署知情同意书。排除标准：(1)合并其他自身免疫性疾病；(2)合并严重心、肝、肾功能不全；(3)妊娠或者哺乳期女性；(4)入组前6个月内糖皮质激素治疗史；(5)认知功能异常、无法配合相关检查。另取同期在本院进行治疗的骶髂关节炎患者90例作为对照组，确诊疾病且排除AS，其中男性46例，女性44例，年龄20～74岁，平均(43.55±8.60)岁，体质量指数22～27 kg/m2，平均(23.78±2.51)kg/m2，各项体检结果均在正常范围内，本人了解研究过程且签署知情同意书。两组研究对象的性别、年龄、体质量指数分布比较差异无统计学意义(P>0.05)，经医院伦理委员会审核、批准此次研究。

1.2外周血Th17/Treg平衡状态检测及2次分组入组即刻留取两组患者的空腹外周静脉血标本约5 mL，采用艾森生物NovoCyte流式细胞仪测定其中Th17细胞、Treg细胞分布比例并计算Th17/Treg比值。根据Th17/Treg比值中位数将AS患者进一步分为高比值组、低比值组各45例。

1.3骶髂关节病变程度采用核磁共振检查AS患者的骶髂关节病变程度，具体可分为0～Ⅳ级，包括0级：无炎症性改变；Ⅰ级：存在局限性骨髓脂肪堆积及软骨下硬化，无融合的侵蚀≤2处；Ⅱ级：存在中度脂肪堆积以及软骨下硬化，无融合的侵蚀>2处；Ⅲ级：关节间隙出现假性扩大，存在广泛脂肪堆积及严重软骨下硬化，合并轻度、部分强直；Ⅳ级：存在肯定、严重强直者。0～Ⅰ级定义为轻度，Ⅱ～Ⅲ为中度，Ⅳ为重度，计算中重度AS比例。

1.4人类白细胞抗原B27(HLA-B27)、炎症因子水平检测留取AS患者的空腹外周静脉血标本5 mL，分离血清后采用酶联免疫吸附法检测其中HLA-B27及炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-2、IL-33的水平。酶联免疫试剂盒购自北京博奥森生物技术有限公司。

2 结果

2.1外周血Th17/Treg平衡状态 AS组患者外周血Th17分布比例及Th17/Treg比值高于对照组，Treg分布比例低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 外周血Th17/Treg平衡状态比较

2.2骶髂关节病变程度不同Th17/Treg比值的AS患者MRI骶髂关节病变程度差异有统计学意义(P<0.05)。高比值组患者的中重度比例高于低比值组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.3各组HLA-B27、炎症因子水平比较高比值组AS患者血清HLA-B27水平为(57.94±8.42)U/mL、低比值组AS患者血清HLA-B27水平为(30.28±4.11)U/mL。高比值组血清HLA-B27水平高于低比值组，差异有统计学意义(P<0.05)。高比值组AS患者血清中TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-33的水平高于低比值组AS患者，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表2 不同Th17/Treg比值AS患者的骶髂关节病变程度比较[n(%)]

表3 不同Th17/Treg比值AS患者的炎症因子水平比较

3 讨论

AS的发病机制尚未完全明确，但免疫系统功能变化在该病发生发展中的调节作用受到广泛重视。CD4+T淋巴细胞主要参与适应性免疫应答，其亚群主要包括Th17细胞及Treg细胞，生理状态下两者处于动态平衡状态，是维持机体多个组织脏器功能正常运转的重要基础。Th17细胞主要参与局部微环境炎性反应，在系统性红斑狼疮中发现其表达异常并促进疾病病情演进[8]。Treg细胞是一种具有调控作用CD4+T淋巴细胞亚群，在机体特异性免疫抑制中发挥重要调节作用，多种自身免疫性疾病的动物模型中发现Treg细胞表达量下降，提示其表达紊乱与自身免疫性疾病的发生发展具有一定关系[9-11]。较非系统免疫性疾病但与AS具有相似病症的骶髂关节炎患者来说，文中结果显示AS患者外周血中Th17细胞比例较高、Treg细胞比例较低，Th17/Treg比值也大幅下降，明确了AS患者的Th17/Treg失衡现状。Th17/Treg比值可更为直观、显著地反映Th17/Treg平衡紊乱情况，关于AS患者具体Th17/Treg比值与病情严重程度的内在联系，研究者具体从骶髂关节病变程度、HLA-B27、炎症因子三方面展开。

AS主要累及的骨关节是骶髂关节及脊柱附着点，MRI可准确观察到患者的病变严重程度[12-13]。文中不同Th17/Treg比值的AS患者MRI病情分级存在明显差异，且高Th17/Treg比值者AS病情中重度比例较高，从影像学层面明确Th17/Treg比值与AS病情呈正相关。HLA-B27是人体白细胞抗原，属于Ⅰ型MHC基因，其表达阳性率在健康人群及脊柱病患者中存在遗传差别，且诸多研究证实,HLA-B27的表达与AS具有高度相关性，超过90%的AS患者存在HLA-B27阳性，而这一数据在健康人群中仅为5%～10%[14-15]。文中AS患者中Th17/Treg比值较高者血清HLA-B27水平也较高，直观说明AS患者的Th17/Treg比值与HLA-B27水平呈正相关，推测Th17/Treg失衡是促进AS患者病情进展的直接因素之一、其具体比值可客观反映AS病情严重程度。

AS是一种慢性炎症性疾病，检测血液中炎症指标水平是评估该病活动性的常规手段[16-17]。Th17/Treg比值较高的AS患者TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-33的水平较高。TNF-α是典型的促炎因子，其过表达可导致全身毒性反应并加剧骨破坏，IL-1β、IL-2、IL-33与对应受体结合可激活肥大细胞并进一步导致其产生更多炎症因子，扩大局部及全身炎性反应并加剧骨破坏[18-20]。上述结果说明Th17/Treg比值与AS患者的炎性反应程度呈正相关，从炎性反应角度间接明确其对AS病情评估的作用。