Y染色体长臂异染色质区延长对辅助生殖妊娠结局和新生儿健康情况的影响

范丽娟，薛冰，程燕，朱爱珍*

(1.西北妇女儿童医院辅助生殖中心，西安 710003；2.运城市中心医院生殖医学科，运城 044000)

Y染色体是人类最小的染色体，其在男性性别分化和精子发生中起重要作用[1-2]。Y染色体长臂大部分由异染色质组成，容易发生长度变异[3]。Y染色体长臂末端的异染色质区延长(Yqh+)是临床较常见的男性染色体结构变异，长期以来被认为是一种正常的多态现象，没有任何的功能和表型[4-5]。然而，也有研究报道Yqh+在不育男性中的发生率约为6.8%，显著高于生育力正常男性(发生率3.74%)[6]；Yqh+不育男性接受体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)助孕治疗后受精率、着床率和临床妊娠率较染色体正常不育男性更低[7-8]。目前尚无Yqh+患者子代健康情况的报道。因此，我们进行了一项单中心回顾性研究，探讨男性染色体Yqh+对IVF/ICSI-ET妊娠结局和新生儿健康情况的影响。

资料与方法

一、研究对象

收集2014年1月至2017年12月就诊于西北妇女儿童医院辅助生殖中心，接受IVF/ICSI-ET助孕治疗的患者为研究对象。按照严格的纳入标准和排除标准，共纳入1 705对夫妻。

纳入标准：(1)所有周期均为第1次治疗周期，女方促排卵方案为GnRH-a降调节方案或拮抗剂方案；(2)夫妻双方均进行染色体核型检测，排除夫妻双方合并其它性染色体或常染色体异常病例；(3)所有患者在进行助孕治疗前均经过体格检查、内分泌相关检查、遗传学检查，男方至少进行两次精液分析。排除标准：(1)合并存在严重的生殖系统疾病及异常者，如男方存在重度精索静脉曲张、隐睾症，女方存在严重的子宫内膜异位症等；(2)男方重度少精子症(精子计数<5×106活动精子/ml)和无精子症患者均行Y染色体微缺失检查，具有Y染色体微缺失的男性；(3)供精治疗周期以及采用微刺激促排卵、黄体期促排卵和高孕激素状态下促排卵的周期。

根据人类染色体方法学进行染色体核型检测，将最终入组病例分为Yqh+组(男方检测到Yqh+，67例)和对照组(男方未检测到Yqh+，1 638例)；又根据受精方式不同，分别比较IVF助孕周期和ICSI助孕周期中Yqh+组和对照组患者的一般情况、妊娠结局及新生儿出生情况。

二、研究方法

1.IVF/ICSI-ET：促排卵方案为GnRH-a降调节方案和拮抗剂方案。当2/3以上优势卵泡直径发育至17 mm时用重组HCG(默克雪兰诺，意大利)或人源HCG(珠海丽珠医药)扳机。34～36 h后，在阴道B超引导下经阴道穿刺负压抽吸取卵术，记录获卵数。女方取卵当日，男方取精，根据不同精液参数标准，选择IVF或ICSI人工授精。根据女方年龄、身体条件、获卵数、性激素水平、子宫内膜厚度和胚胎级别等因素决定在取卵后第3天(或第5天)进行胚胎(或囊胚)移植。黄体支持方案为取卵日开始每日肌肉注射黄体酮(浙江仙琚)60 mg，同时每日口服地屈孕酮(雅培，美国)20 mg。胚胎移植后第14天(或囊胚移植后第12天)测血HCG。胚胎移植后第28天(或囊胚移植后第26天)行盆腔超声检测，B超下见孕囊即为临床妊娠。孕11周停止黄体支持。

2.授精方式选择：按照世界卫生组织(WHO)《人类精液实验室检查及处理》第5版标准，根据患者的精液分析结果选择不同的助孕方法：当前向运动精子(即a+b级)计数>5×106个/ml时纳入IVF治疗周期；当前向运动精子计数<5×106个/ml时纳入ICSI治疗周期。

3.染色体核型检测：抽取外周血淋巴细胞培养后行标准G显带分析染色体核型。计数20个细胞中期分裂相，分析5个核型，异常者加倍计数、分析。按照《人类细胞遗传学国际命名制(ISCN，2009)》进行核型描述及诊断，以Y染色体长臂异染色质区长度增加定义为Yqh+。

4.随访：随访期限为婴儿出生后1年。

三、观察指标及计算方法

主要观察指标包括妊娠率、活产率和新生儿出生健康情况；次要观察指标包括正常受精率、卵裂率、胚胎种植率、HCG阳性率、异位妊娠率、流产率、持续妊娠率和新生儿Apgar评分、新生儿性别比例等[9]。

其中HCG阳性率=HCG阳性周期数/移植周期数×100%；IVF正常受精率=第1天(D1)出现2PN卵子数/IVF加精卵子总数×100%；ICSI正常受精率=D1出现2PN卵子数/注射MⅡ卵子总数×100%；卵裂率=卵裂胚胎数/受精卵子数×100%；胚胎种植率=种植胚胎数/移植胚胎数×100%；临床妊娠率=临床妊娠周期数/移植周期数×100%；持续妊娠率=妊娠持续到20周以后周期数/临床妊娠周期数×100%；活产率=活产周期数/新鲜移植周期数×100%；流产率=流产周期数/临床妊娠周期数×100%；异位妊娠率=异位妊娠周期数/临床妊娠周期数×100%；出生缺陷率=出生缺陷婴儿数/活产婴儿数×100%。

四、统计学分析

统计分析采用SPSS 13.0软件进行。计量资料比较采用t检验，计数资料比较采用卡方检验，P<0.05为差异有统计学意义。

结 果

一、纳入患者的整体情况

在本研究纳入的1 705对夫妻中，男方Yqh+共67例(Yqh+组)，对照组1 638例。Yqh+组中有36例患者(53.73%)依据个人精液分析结果选择IVF治疗周期，31例(46.27%)选择ICSI治疗周期；对照组中877例患者(53.54%)选择IVF周期，761例(46.46%)选择ICSI周期。

二、IVF治疗周期中Yqh+组和对照组的妊娠结局及新生儿出生情况比较

1.一般资料比较：IVF治疗周期中Yqh+组和对照组间的男方年龄、女方年龄、体重指数(BMI)、基础FSH和LH水平比较无显著性差异(P>0.05)。IVF治疗周期中两组间扳机日血清E2水平和获卵数比较无显著性差异(P>0.05)。Yqh+组和对照组的正常受精率[(59.43±16.84)% vs.(56.74±19.33)%]、卵裂率[(81.49±14.69)% vs.(81.73±2.63)%]比较亦无显著性差异(P>0.05)(表1)。

表1 IVF治疗周期中Yqh+组与对照组一般情况比较[(-±s)，n(%)]

2.新鲜周期妊娠结局比较：IVF治疗周期中分别有17例Yqh+组患者和502例对照组患者行新鲜周期移植。两组患者新鲜周期移植前子宫内膜厚度和血清孕酮(P)水平比较无显著性差异(P>0.05)。Yqh+组的HCG阳性率(52.94% vs. 63.94%)、胚胎种植率(43.48% vs. 47.90%)、临床妊娠率(52.94% vs. 60.96%)、持续妊娠率(88.89% vs. 94.12%)均略低于对照组，但无显著性差异(P>0.05)；Yqh+组流产率有高于对照组的趋势(11.11% vs. 5.23%)，但无显著性差异(P>0.05)；Yqh+组的异位妊娠率显著高于对照组(11.11% vs. 1.63%)(P=0.04)。Yqh+组活产率略低于对照组(41.18% vs. 54.18%)，但无显著性差异(P>0.05)(表2)。

表2 IVF治疗Yqh+组与对照组新鲜周期妊娠结局比较[(-±s)，%]

注：与对照组比较，*P<0.05

3.新生儿出生情况比较：IVF治疗周期中Yqh+组共出生7例新生儿，对照组出生338例新生儿。两组患者新生儿Apgar评分和出生缺陷率比较无显著性差异(P>0.05)；Yqh+组的男婴出生率略高于对照组(85.71% vs. 51.78%)，但无显著性差异(P>0.05)(表3)。

表3 IVF治疗周期Yqh+组与对照组新生儿出生情况比较[(-±s)，%]

三、ICSI治疗周期中两组妊娠结局和新生儿出生情况比较

1.一般资料比较：ICSI治疗周期中Yqh+组和对照组间的男方年龄、女方年龄、BMI、基础FSH和LH水平比较均无显著性差异(P>0.05)。ICSI治疗周期中两组患者扳机日血清E2水平、获卵数、正常受精率和卵裂率比较均无显著性差异(P>0.05)(表4)。

2.新鲜周期妊娠结局比较：ICSI治疗周期中分别有19例Yqh+组患者和460例对照组患者行新鲜周期移植。两组患者新鲜周期移植前内膜厚度和血清P水平比较无显著性差异(P>0.05)；与对照组比较，Yqh+组的HCG阳性率、胚胎种植率、临床妊娠率、持续妊娠率、流产率、异位妊娠率、活产率均无显著性差异(P>0.05)(表5)。

表4 ICSI治疗周期Yqh+组与对照组一般情况比较[(-±s)，n(%)]

表5 ICSI治疗周期Yqh+组与对照组妊娠结局比较[(-±s)，%]

3.新生儿出生情况比较：ICSI治疗周期中Yqh+组共出生15例新生儿，对照组出生329例新生儿。两组患者新生儿Apgar评分和出生缺陷率比较无显著性差异(P>0.05)；Yqh+组男婴出生率略高于对照组(66.67% vs. 52.58%)，但尚无显著性差异(P>0.05)(表6)。

表6 ICSI治疗周期Yqh+组与对照组新生儿出生情况比较[(-±s)，%]

讨 论

Yqh+的临床意义一直存在争议。1987年Hsu等[10]首先报道了Yqh+是一种正常的染色体多态性，因为异染色质区不能编码蛋白[11-12]。但近年来越来越多研究发现男性染色体Yqh+可能与生育力下降有关[13-15]。2015年Li等[15]发现Yqh+男性无精子症和少精子症发病率高于非Yqh+男性。Xiao等[8]发现Yqh+者行IVF-ET助孕治疗其受精率、着床率、临床妊娠率显著低于非Yqh+者。活产率和新生儿健康情况也是IVF助孕治疗最关键的质控指标，但目前尚无Yqh+对IVF/ICSI-ET活产率和新生儿健康情况影响的研究。

本研究回顾性分析Yqh+组和对照组IVF/ICSI-ET助孕治疗新鲜周期的妊娠结局和新生儿健康情况。在前述观察指标中，Yqh+组和对照组的HCG阳性率、临床妊娠率、活产率和新生儿出生健康情况等观察指标比较均无显著性差异(P>0.05)；仅在IVF治疗周期中，Yqh+组异位妊娠率显著高于对照组(P<0.05)，但这可能与纳入样本例数较少有关，尚需后续研究进一步研究探讨。

值得注意的是，在IVF治疗周期中，Yqh+组HCG阳性率、种植率、临床妊娠率、持续妊娠率和活产率均略低于对照组。而在ICSI治疗周期中，这种现象并未出现。这与Xiao等[8]的研究结果相似。Xiao等[8]曾报道在IVF治疗周期中，Yqh+者种植率和临床妊娠率均显著低于非Yqh+者，而在ICSI治疗周期中，Yqh+者种植率和临床妊娠率与非Yqh+者比较无显著性差异。因此Xiao等[8]认为Yqh+可能对男性生育能力有一定的影响；对于IVF治疗结局不良的Yqh+不育者，采用ICSI方式人工授精可能会改善其助孕治疗结局。

本研究结果显示，在IVF治疗周期和ICSI治疗周期中，Yqh+组与对照组的新生儿出生健康情况比较无显著性差异。本研究首次报道了Yqh+者的子代健康情况，结果显示Yqh+可能对子代健康状况无明显影响。

综上所述，Yqh+可能对IVF/ICSI-ET妊娠结局和新生儿健康情况无明显影响。Yqh+是否增加IVF新鲜移植周期中异位妊娠的风险，尚需要更大样本量和更具特异性的研究加以探讨和验证。