平板倾注法与3M纸片法对水质检验的结果分析

沈燕 张继燕

【摘  要】目的：探讨平板倾注法与3M纸片法对水质检验的结果。方法：样品取自辖区市政的末梢水100份，自备井水20份，二次加压120份，首先制备混合试剂菌液，之后分别用平板倾注法与3M纸片法对水质进行检测，对比平板倾注法与3M纸片法的检测结果及两种方法在末梢水、二次加压水及自备井水中的菌落数对比结果。结果：两种检测方法的检测结果对比无统计学意义，P>0.05。两种方法在末梢水、二次加压水及自备井水中的菌落数对比无统计学意义，P>0.05。结论：3M纸片法也可用于水质检验，其检测结果准确、便捷、快速，具有实用价值。

【关键词】平板倾注法;3M纸片法;水质检验;菌落数

【中图分类号】R15      【文献标识码】A      【文章编号】1672-3783（2020）03-0070-01

生活饮用水菌落总数是指水体在营养琼脂上的有氧条件下，在37°C下对水体进行培养，48h后可得到水体中所含有的菌落总数，其可对水体污染的严重程度进行评价，以往国际上多采用平板倾注法进行监测，但其存在配置营养基、操作复杂及消毒清洗工作量大、细菌容易出现假阴性结果等缺点，使得其不利于卫生监督工作的开展^[1]，因此寻找一种更为灵敏、准确的水质检测方法非常重要。3M纸片法是一种新型的检测方法，其由美国3M公司研制，可将细菌生长中所需的营养成分在纸上进行固定，使用较为方便，且会在营养成分中加入着色剂，将菌落染成红色，便于判别，较为实用^[2]。本文分析了平板倾注法与3M纸片法对水质检验的结果，以为水质检验选择合适的方法。

1 材料与方法

1.1材料

菌株为大肠杆菌，3M纸片为3M公司生产，一次性无菌培养皿购自青岛金典生化器材有限公司，营养琼脂购自青岛高科园博生物有限公司。样品取自辖区市政的末梢水100份，自备井水20份，二次加压120份。

1.2检测方法

首先制备混合试剂菌液，首先将大肠杆菌半固体保存菌苔接种在5ml葡萄营养肉汤或营养肉汤中，在37°C下培养18～24h，之后取1ml培养液，将其置于无菌试管中，并在微型的振荡器中进行振荡，时长为1～3min，之后进行充分混匀，再将菌液浓度调整为3×10⁵cfu/ml，再用倍比稀释法将其稀释至5～10cfu/ml，之后在平皿及3M纸片中进行接种，并继续培养24h，培养温度为36±1°C。其中3M纸片法为用无菌操作法吸取充分混匀后的液体1ml于纸片中央，再将上层膜直接落下，落下时需避免气泡，之后将压板凹面向下，将其置于上层膜中央，再轻按下，从而可使样液覆盖在圆形的培养基上，再将压板静置，时间超过1min，之后置入培养箱中培养，48h后对结果进行观察;平皿计数法，采用无菌操作法取充分混匀后的液体1ml，将其注入至无菌平皿中，之后倾注已融化且冷却温度为45°的营养琼脂培养基15ml，使其水样进行充分混匀，另一个平皿中仅加入同样体积的营养琼脂，将其作为空白对照，两组均进行培养，48h后对结果进行观察。

1.3观察指标

（1）对比平板倾注法与3M纸片法的检测结果;（2）对比两种方法在末梢水、二次加压水及自备井水中的菌落数对比结果。

1.4统计学方法

采用SPSS23.0软件，计数资料（n/%）行卡方检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1对比平板倾注法与3M纸片法的检测结果

两种检测方法的检测结果对比无统计学意义，P>0.05，见表1。

2.2对比两种方法在末梢水、二次加压水及自备井水中的菌落数对比结果

两种方法在末梢水、二次加压水及自备井水中的菌落数对比无统计学意义，P>0.05，见表2。

3 讨论

菌落总体数量是对水质是否有污染及人体饮用后是否会对生命健康造成危害的一种卫生评价指标，是生活用水的标准检测项目之一。近年来，平板倾注法较为规范、正确，但检测中检测人员工作量较大，且操作及要求較为繁琐，使得卫生监督工作往往不能按照标准方法进行。3M纸片法可用于水质检验，但其操作简便，可节省检验前期复杂准备工作，可提高检验检验人员的工作效率^[3]。

本文结果表明，两种检测方法的检测结果对比无统计学意义，两种方法在末梢水、二次加压水及自备井水中的菌落数对比无统计学意义，表明两种方法的检测结果一致，但与平板倾注法相比，3M纸片法具有应用方便、迅速的优点，平板倾注法接种水样后需将营养琼脂倾倒进去，同时需对冷凝温度进行控制，使得其操作不够简便，而3M纸片法则已将培养基在纸片上进行固定，只需要水样、压片操作，可节省配制培养基、灭菌等操作，通常其只需要1min即刻完成，因此其尤其适用于各种应急检测。其次其便于结果统计，因为水质中的菌落在3M纸片上会呈现出红色小点状斑，其可与水中的各种杂志及不溶解颗粒进行区别，从而便于分辨、鉴别，而平板倾注法的菌落颜色与营养琼脂培养基颜色接近，导致其辨识度不高，不利于观察、计数;再次，其可减少被污染的可能性，因平板倾注法在检测时随着熔融次数的增多，其营养琼脂培养基中的性能、成分会逐渐衰退，且该过程中容易出现污染，而3M纸片法检测时，其在冷藏良好情况下有效期可达3年，检测时间短，可大大降低污染率^[4]。

综上所述，3M纸片法也可用于水质检验，其检测结果准确，操作方法快捷、方便、简单，可在任何环境下进行，适宜的水质检验工作中进行推广。

参考文献

[1] 谈剑宏，杨惠，杨文晶.水质检验中监测的质量控制方法[J].水资源开发与管理，2017，15（3）：29 -32.

[2] 刘丽平.对水质检测结果的质量控制与保证研究[J].环境科学与管理，2018，43（1）：181-184.

[3] 周庆荣，毛丽仙，郑升龙，等.江山市2014年-2017年农村饮水工程水质检测结果分析[J].中国卫生检验杂志，2018，28（13）：1644-1646.

[4] 薛剑春.3M纸片法在水质检验工作中的应用效果评价[J].现代养生，2019，35（6）：61-62.