地桃花不同部位中银锻苷的含量比较

陈贵，夏稷子，史娟，邓言欢，王涛，张华，卢娅玲

(黔南州检验检测院，贵州 都匀 558000)

地桃花为锦葵科梵天花属植物地桃花UrenalobataL.的干燥根、地上部分或全草，具有清热解毒、活血消肿、祛风利湿的功效，主治感冒、痢疾、带下、月经不调、喉痹等[1-3]。地桃花主含黄酮、有机酸及多酚类成分，其黄酮类中的银锻苷具有显著的抗氧化和抗炎作用[4-5]。苏聪等[6]研究表明，广西和广东不同地区地桃花地上部分中银锻苷的含量差别较大，考虑为不同茎叶比造成，但未考察银锻苷在地桃花各部位中的分布差异。本研究建立了HPLC方法对贵州不同采集地、不同部位地桃花中的银锻苷含量进行比较，为更加合理制定地桃花质量标准提供依据。

1 仪器与材料

LC-2010A型高效液相色谱仪(日本岛津公司)；AG135型电子天平(瑞士梅特勒-托利多公司)；BSA224S型电子天平(赛多利斯科学仪器(北京)有限公司)；HH-6型数显恒温水浴锅(常州国华电器有限公司)。银锻苷对照品(批号：170305，含有量99.34%，北京世纪奥科生物技术有限公司)；乙腈为色谱纯；水为哇哈哈纯净水；其余试剂为分析纯。地桃花样品采于贵州丹寨、安顺、盘县等地，经贵州省食品药品检验所中药标本馆李杨馆长鉴定为锦葵科植物地桃花UrenalobataL.的干燥全草。具体样品信息见表1。

表1 地桃花样品信息

2 方法与结果

2.1 色谱条件[7]

岛津InertSustain®C18色谱柱(150 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相为乙腈-0.1%冰醋酸溶液(22∶78)；柱温30 ℃；检测波长315 nm；体积流量1.0 mL·min-1；进样量为10 μL。在此条件下，不同部位样品中银锻苷与相邻成分的分离度均大于1.5，其理论塔板数均大于6 000，HPLC色谱见图1。

注：A.对照品；B-E.地桃花不同部位样品(B.根；C.茎；D.叶；E.果实)；1.银锻苷

图1 地桃花不同部位样品HPLC色谱

2.2 对照品溶液的制备

取银锻苷对照品，加入80%甲醇制成每1 mL含银锻苷238.2 μg的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备

精密称取各部位地桃花粉末(过三号筛)约1 g，精密加入80%甲醇25 mL，称重后置水浴上加热回流提取1 h，放冷，加入80%甲醇补足减失的重量，用微孔滤膜滤过，取续滤液即得。

2.4 方法学考察[7]

取“2.2“项下对照品溶液制备不同稀释浓度对照品溶液，测定其峰面积后，以银锻苷质量浓度(X)对峰面积(Y)作线性回归，得回归方程为Y=31 242X+475(r=1.000 0)，线性范围为0.4764～238.2 μg·mL-1。精密度试验：将同一稀释浓度对照品溶液重复进样6次，银锻苷峰面积的RSD为0.14%，表明仪器具有良好的精密度。稳定性试验：分别测定供试品溶液制备后0、2、4、6、12和24 h银锻苷的含量，结果其含量的RSD为0.56%，表明供试品溶液在制备后24 h内稳定性良好。重复性试验：6份平行样品中银锻苷含量的RSD为0.28%，表明该方法的重复性良好。加样回收率试验银锻苷平均回收率为99.2%，RSD为2.34%，回收率符合要求。

2.5 样品测定

分别取不同采集地、不同部位的地桃花粉末约1 g，每个样品照“2.3”项下方法平行制备3份供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件外标法测定其银锻苷的含量，结果见表2。

表2 不同采集地不同部位地桃花中银锻苷的含量测定结果 (n=3)

3 讨论

含量测定结果显示，不同采集地地桃花相同部位的银锻苷含量存在一定差别，采用SPSS 18.0软件分析得出贵州荔波产地桃花茎和叶测定结果为离群值，这可能与不同生长环境有关。同一采集地不同部位之间也存在较大差异，其分布规律为果实>叶>茎>根，其中根部少含或几乎不含；茎中含量较少，大部分含量低于万分之一；叶和果实中含量较高。因此，银锻苷用于地桃花叶或果实的质量控制更具意义。若用于地上部分或全草的含量测定，则应注意含量限度确定的科学性和合理性，同时应注意取样的均匀性和代表性。