HE染色两次分化法对送检病理样本切片完整率及染色满意度的影响

吴成奎

（安徽省天长市人民医院病理科，安徽 滁州 239300）

随着医疗技术水平不断提升，临床对疾病诊断要求随之提高，病理诊断常作为疾病诊断“金标准”，与其他诊断方法比较更具有准确性[1]。HE染色检查为病理学常见检查项目，病理组织细胞能否成功染色、得当分化为染色过程中关键部分，随着临床病理检查需求增加，传统HE染色法已无法满足。本研究选取我院不同科室送检病理样本164例，旨在探讨HE染色两次分化法的临床应用效果。报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院不同科室送检病理样本164例（2017年3月～2019年3月），依照染色方案不同分为研究组（n=82）、常规组（n=82），患者知情本研究并签署同意书。常规组男4 8 例，女3 4 例，年龄26～75岁，平均年龄（51.49±10.41）岁。研究组男47例，女35例，年龄25～76岁，平均年龄（50.30±11.03）岁；本研究经我院伦理委员会审核通过。且两组基线资料（性别、年龄）均衡可比（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 常规组：采用传统HE染色法，取细胞涂片固定于95%乙醇内浸泡15 min，于显微镜下，选定免疫染色区域并标记，染色采用二甲苯去蜡处理方法，切片清洗干净后，采用各浓度乙醇及蒸馏水树胶洗脂，采用苏木素染色液浸染3～5 min；采用0.5%稀盐酸水溶液进行清洁，清水冲洗并浸泡15 min，采用树胶或DPX盖片封片。

1.3.2 研究组：采用HE染色两次分化法，取厚约3～4 μm石蜡切片进行常规脱蜡、水洗；根据室内温度采取不同染色处理，室温＞30℃时采用苏木素染色液浸染6～8 min；室温＜30℃时采用裱片仪对苏木素染色液水浴加热至40℃，浸染4～6 min，后充分水洗；采用0.5%稀盐酸水溶液进行分化（提洗）3次，后充分水洗；采用碳酸锂饱和水溶液（蓝化）10 s左右，后充分水洗；采用0.5%稀盐酸水溶液分化（提洗）2次，后充分水洗；采用碳酸锂饱和水溶液（蓝化）10 s左右，后充分水洗；于水片镜下镜检，观察病理组织细胞核，出现蓝色背景色时，采用0.5%稀盐酸水溶液分化（提洗）、碳酸锂饱和水溶液（蓝化），直至未见蓝色背景色；采用1%醇溶性伊红浸染2 min左右；采用70%、80%、90%乙醇依次进行分化（提洗）3次，100%乙醇浸泡5 min；采用电吹风吹干，中性树胶封固。

1.4 观察指标

比较两组病理样本切片完整率、染色满意度。

1.5 统计学分析

采用S P S S 2 2.0 对数据进行分析，计数资料n（%）表示，x2检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

研究组病理样本切片完整7 6 例、不完整6 例，染色满意7 8 例、不满意4 例；常规组病理样本切片完整5 8 例、不完整2 4 例，染色满意64例、不满意18例。研究组病理样本切片完整率92.68%（76/82）、染色满意度95.12（78/82）高于常规组70.73%（58/82）、78.05%（64/82），差异有统计学意义

3 讨 论

病理诊断为临床常用诊断方式，诊断准确性受病理切片染色效果、医师技能水平等多种因素影响，因此提高病理样本切片质量，对提高临床诊断准确性具有重要意义。相关研究指出，碱性染料苏木素染色液中阳离子含量较高，易与细胞核结合，酸性染料醇溶性伊红染液中阴离子含量较高，易与细胞质结合。本研究通过延长苏木素染色时间，同时在室温＜30℃时进行水浴加热促染，病理组织切片经苏木素染色后，其分化影响染色成败，分化过程中采用酸性染料稀盐酸水溶液，可阻止苏木素中色素与铝化合物产生蓝色色素沉淀。此外水合氢离子及氢氧离子较其他染料离子弥散分化快，可促进切片组织中需染色部分恰当着色，同时对其他组织成分几乎不着色。本研究结果显示研究组病理样本切片完整率、染色满意度高于常规组（P＜0.05），提示HE染色两次分化法可提高送检病理样本切片完整率及染色满意度。

综上所述，HE染色两次分化法应用于送检病理样本中，可保证样本切片染色质量，提高样本切片完整率及染色满意度，有助于提高病理诊断准确率。