脱氢乙酸钠对水貂鲜配合饲料的防腐效果研究

李柯汝，赵伟臣，张甜甜，徐燕红，司志文，李文立*

（1.青岛农业大学动物科技学院，山东青岛 266109；2.山东菁华农牧发展有限公司，山东诸城 262201）

水貂生产中通常采用鲜配合饲料，但鲜配合饲料的水分、蛋白质和脂肪含量高，夏季高温条件下短时间内就容易腐败变质。饲料腐败不仅会产生异味，影响适口性，而且还会破坏饲料品质，降低营养价值，变质饲料产生的毒素还可在水貂体内蓄积，影响水貂健康和免疫系统，导致水貂采食量降低，生长发育受阻，继发多种疾病，造成经济损失[1]。因此，夏季水貂鲜配合饲料的防腐是水貂生产中急需解决的重要问题。脱氢乙酸钠作为一种广谱防腐剂，具有安全、高效、抗菌能力强等优点，对易引起腐败的酵母菌、霉菌、腐败菌等具有良好的抑制效果，广泛用于食品、化妆品、医药产品等防腐剂[2]。研究表明，脱氢乙酸钠的抑菌作用不受酸碱度影响，在酸性或碱性条件下均有效，有效抑菌浓度为0.05%～0.10%，对畜禽配合饲料也有较好的防腐效果，已在猪、肉鸡等配合饲料中广泛应用[3-5]。本试验在夏季水貂鲜配合饲料中添加不同水平的脱氢乙酸钠，通过测定不同时间点鲜饲料的pH、挥发性盐基氮和细菌菌落总数的变化，评价脱氢乙酸钠对水貂鲜配合饲料的防腐保鲜效果。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验材料 脱氢乙酸钠（DHA-S，C8H7NaO4）：纯度99.0%，购自广州市安心生物制品有限公司。丙酸钙的纯度≥99%，购自天津市光复精细化工研究所。

1.1.2 试验饲粮 试验饲粮主要以海杂鱼、鱼排、鸡肠、鸡蛋、鸡肝、鸡头、鸡油、食用油、膨化玉米、水等原料组成。基础饲粮组成及营养成分见表1。

1.1.3 仪器设备 电子天平（ESJ200-4A，沈阳龙腾电子有限公司）、振荡器（KS-1，常州亿通分析仪器制造有限公司）、恒温培养箱（HWS 系列，上海丙林对自己有限公司）、高压灭菌锅（65L-1580L，德国systec）、电子酸度计（PHSJ-4F，上海仪电科学仪器股份有限公司）、半自动凯氏定氮仪（NKB3200，上海祎鸿分析仪器有限公司）、无菌操作台、恒温水浴锅、多功能电炉、培养皿、灭菌玻璃珠、灭菌试管、灭菌移液管、三角瓶、试管架、酸式滴定管等。

1.2 试验设计 试验分为6 组，试验组分别在鲜配合饲料中添加脱氢乙酸钠0、250、500、750、1 000 mg/kg，丙酸钙组在鲜配合饲料中添加丙酸钙2 000 mg/kg 作对照。

表1 基础饲粮组成及营养成分（干物质基础）

1.3 测定指标及方法 从水貂养殖场采集鲜配合饲料，冷藏保存快速送至实验室，按照试验设计要求与脱氢乙酸钠混合均匀，每组6 个重复，每个重复鲜配合饲料质量为1 kg。每个处理的每个重复的鲜饲料平均分装放置在5 个培养皿中，放入37℃恒温培养箱中，分别在0、4、8、12、16 h 测定不同处理鲜配合饲料的pH、挥发性盐基氮（TVB-N）和细菌总数等指标。

1.3.1 pH 准确称取试样0.1 g 于离心管中，加入10 mL蒸馏水，混匀，3 000 r/min 离心10 min，取上清液用电子酸度计测定。

1.3.2 TVB-N TVB-N 按照《食品中挥发性盐基氮的测定》（GB 5009.228-2016）[6]中的半微量定氮法测定。

1.3.3 细菌总数 测定方法参考《饲料中细菌总数的测定》（GB/T 13093-2006）[7]。

1.4 统计分析 试验数据用Excel 2003 进行处理，用SPSS 17.0 进行统计分析，用One-Way ANOVA 和Duncan´s 进行单因素方差分析和组间多重比较。结果以平均值± 标准差表示，P＜0.05 表示差异显著，P＞0.05表示差异不显著。

2 结果

2.1 不同时间点饲料中pH 的变化 由表2 可见，水貂饲料pH 随着试验时间的延长而逐渐降低，尤其是无脱氢乙酸钠的0 mg/kg 脱氢乙酸钠组组下降趋势最为明显，丙酸钙组次之，然后是脱氢乙酸钠试验组。0、4、8、12 h 时各处理pH 差异不显著；0 mg/kg 脱氢乙酸钠组组和丙酸钙组16 h 的pH 低于250、500、750、1 000 mg/kg脱氢乙酸钠组（P＜0.05）。

2.2 不同时间点饲料中TVB-N 的变化 由表3 可以看出，随试验时间的延长，各组饲料TVB-N 含量均呈先降低后升高趋势；脱氢乙酸钠含量添加水平高的组TVB-N 含量上升趋势缓慢。4 h 时0 mg/kg 脱氢乙酸钠组组TVB-N 含量均高于其他处理组（P＜0.05），说明此时脱氢乙酸钠和丙酸钙的防腐效果均较好；此后的各时间点尽管各处理间差异显著，但TVB-N 值上升较快，尤其是0 mg/kg 脱氢乙酸钠组组和丙酸钙组。因此，脱氢乙酸钠和丙酸钙防腐效果最好的时间是4 h 以内，但不同水平脱氢乙酸钠之间差异不显著。

2.3 不同时间点饲料中细菌总数的变化 由表4 可知，随着试验时间延长，不同水平脱氢乙酸钠的细菌总数大多呈先增后减再增加的趋势，12 h 时最低。250 mg/kg脱氢乙酸钠组从0～12 h 细菌总数始终下降，但16 h 显著上升；而丙酸钙组0 h 的细菌总数均低于其他各时间点。试验4、8、12 h 各处理的细菌总数差异不显著；0、250 mg/kg 脱氢乙酸钠组和丙酸钙组16 h 的细菌总数高于其他各组（P＜0.05），脱氢乙酸钠水平越高，细菌总数越少。

表2 不同时间点水貂饲料中pH 的变化

表3 不同时间点水貂饲料中TVB-N 含量的变化 mg/100g

表4 不同时间点水貂饲料中细菌总数变化 106CFU/g

3 讨 论

3.1 不同时间点饲料中pH 的变化 夏季饲喂水貂的鲜配合饲料易腐败变质，味道变酸并伴有腐臭味。引起水貂鲜饲料pH 变化的原因，主要是其中的蛋白质、脂肪和碳水化合物在保存过程中经细菌、霉菌和酵母菌等腐败菌综合作用的结果。蛋白质经腐败菌分解产生胺类及氨基酸，脂肪氧化酸败后产生小分子酸和异味，碳水化合物发酵产生有机酸和气体，均可影响饲料pH，导致饲料变酸变臭[8]。本试验结果表明，pH 随着试验时间的延长而逐渐降低，尤其是0 mg/kg 脱氢乙酸钠组组下降趋势最为明显，饲料腐败速度快，其次是丙酸钙组。不同水平脱氢乙酸钠组pH 也呈下降趋势，但下降趋势缓慢，说明脱氢乙酸钠具有良好的防霉效果，与张伟敏等[9]研究结果一致。本试验还发现同一时间段内，脱氢乙酸钠添加水平越高，pH 越大，12、16 h 尤为明显，0、4、8 h 时变化不明显，可能由于在0～8 h 饲料腐败不明显。

3.2 不同时间点饲料中TVB-N 的变化 TVB-N 指动物性饲料及食品中蛋白质在腐败变质过程中因为各种酶和细菌的作用分解产生的氨、胺类等碱性含氮物质。TVB-N 含量越高，说明蛋白质和氨基酸分解越多，营养价值更低。TVB-N 的大小常用来反映肉类、鱼类的新鲜度，饲料工业中常用于评价新鲜动物性饲料的新鲜度[8]。参照食品安全国家标准《鲜、冻动物性水产品》（GB 2733-2015）[11]的要求，新鲜和冷冻鱼类的TVB-N 不超过30 mg/100g。本试验中，水貂鲜配合饲料中40%左右的为冷冻鲜鱼，再加上新鲜鸡产品总量超过80%，不加防腐剂时TVB-N 一般超过30 mg/100g，且随着贮存时间的延长逐渐升高，16 h 时达到45 mg/100g，添加不同水平脱氢乙酸钠和丙酸钙后，TVB-N 下降明显，尤其是贮存4 h 时显著降低，说明添加2 种防腐剂均可防止饲料蛋白质分解，保鲜效果较好。但不同水平脱氢乙酸钠组间差异不显著，250 mg/kg 脱氢乙酸钠具有较好效果且成本较低。

3.3 不同时间点饲料中细菌总数的变化 脱氢乙酸钠的防腐保鲜机理是抑制细菌细胞内多种酶的氧化作用，对腐败菌、霉菌和酵母菌均有一定抑制作用[12]。研究表明，脱氢乙酸钠含量越高，其抗菌、杀菌能力就越好[13]。段会轲等[14]研究表明，脱氢乙酸钠在低温肉制品中有较好的防腐保鲜效果，可使肉品中细菌菌落增长缓慢，达到防腐保鲜目的。本试验结果表明，随着试验时间的延长，细菌总数呈增长趋势，脱氢乙酸钠添加水平越高，细菌总数增长越缓慢。在试验12 h 前的不同时间点，添加不同水平的脱氢乙酸钠对细菌的抑制效果均较好，且优于丙酸钙。

4 结 论

脱氢乙酸钠在水貂日粮中具有防腐保鲜作用。综合pH、TVB-N 和细菌总数指标，夏季可使水貂鲜配合饲料保鲜时间延长4～ 8 h，适宜的添加水平为250 mg/kg。