围孕期叶酸水平、亚甲基四氢叶酸还原酶基因突变与不良出生结局的关系

张运霖

(乐安县人民医院妇产科,江西 抚州 344300)

不良出生结局包括胎儿先天畸形、自然流产、死胎、人工流产等，临床发生率高，占所有妊娠者的5%～20%[1]。近年来，出生缺陷率持续上升，影响人口素质。叶酸即维生素B9，属于水溶性维生素，从菠菜叶中提出、纯化，经还原酶作用产生活性四氢叶酸，参与磷脂脱氧核糖核酸、蛋白质的代谢，具有预防神经管畸形和贫血的作用。亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)是参与叶酸转运的重要酶，酶基因突变会引起活性叶酸水平、代谢及利用能力的改变，与不良出生结局密切相关[2]。本文旨在对围孕期服用叶酸与不良出生结局的关系进行探讨。

1 资料与方法

1.1 纳入及排除标准

纳入标准：1)经B超、妇科检查确定无生殖系统解剖畸形；2)有唇腭裂、自然流产、脑瘫、神经管缺陷、先天性心脏病、脑积水等不良出生结局病史；3)自愿参加本研究，签署知情同意书。排除标准：1)甲状腺功能异常、糖尿病等内分泌系统疾病；2)家族遗传史；3)全身性疾病、恶性肿瘤；4)Rh、ABO血型无溶血。

1.2 一般资料

选取乐安县人民医院妇产科2015年6月至2017年6月收治的160例有不良出生结局史的育龄妇女。按随机数字表法将其分为观察组和对照组，每组80例。对照组，年龄20～39岁，平均(28.3±3.1)岁；BMI 19～25 kg·m-2，平均(22.1±1.5)kg·m-2。观察组，年龄21～39岁，平均(27.9±2.9)岁；BMI 18～26 kg·m-2，平均(21.9±1.4)kg·m-2。2组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。

1.3 叶酸服用方法

对照组在围孕期服用普通叶酸(爱乐维，拜耳医药保健有限公司启东分公司，规格:每片含叶酸0.8 mg)，1 片·次-1，1 次·d-1。观察组在围孕期服用活性叶酸(甲基叶酸片，天津飞鹰玉川药业有限公司，规格：0.4 mg·片-1)，1 片·次-1，2 次·d-1。2组均从备孕前开始服用，直到妊娠12周。

1.4 观察指标

观察2组不良出生结局发生率、再次妊娠率。

采用荧光定量多态性聚合酶链反应(PCR法)分析MTHFR基因位点多态性。设置条件：95 ℃预变性3 min，92 ℃变性15 s，60 ℃退化1 min，75 ℃延伸45 s，反复30个循环，75 ℃延伸10 min。采用美国2700型测序级扩增仪测定MTHFR基因C677扩增产物相应基因片段。采集外周静脉血进行叶酸水平测定。

1.5 统计学方法

采用SPSS 16.00统计软件处理所得数据。计量资料的组间比较采用t检验；计数资料的组间比较采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2组不良出生结局发生率、再次妊娠率比较

观察组不良出生结局发生率低于对照组，再次妊娠率明显高于对照组(P<0.05)，见表1。

表1 2组不良出生结局发生率、再次妊娠率比较

2.2 2组MTHFR C677基因类型的叶酸水平、不良出生结局比较

MTHFR C677 T/T基因类型的叶酸水平明显低于C/C、T/C基因类型，不良出生结局发生率更高(P<0.05)，见表2。

表2 MTHFR C677基因类型的叶酸水平、不良出生结局比较

*P<0.05与C/C、T/C基因类型比较。

3 讨论

叶酸属于人体必需氨基酸、重要的甲基供体，对细胞繁殖、生长有促进作用，是胎儿生长发育必需的营养素[3]。在体内为四氢叶酸，参与嘧啶核苷酸、嘌呤核酸的合成及转化，在制造脱氧核糖核酸、核糖核酸方面具有重要作用。同时参与蛋白质代谢，与维生素B12促进红细胞、微生物增殖、成熟，预防治疗贫血。妊娠前期缺乏叶酸可能会引起胎儿神经管发育缺陷、唇腭裂、先天性心脏等，所以WHO建议备孕女性每天补充叶酸。我国饮食文化存在地域差异，孕妇体内叶酸水平普遍低于非妊娠正常女性，且随着孕周的增加，叶酸缺乏越严重[4]。

本文结果显示，围孕期服用活性叶酸的观察组不良出生结局发生率明显低于服用普通叶酸的对照组(P<0.05)，且再妊娠率明显高于对照组(P<0.05)，提示活性叶酸对提高妊娠率、降低不良出生结局有积极作用。普通叶酸经小肠吸收进入体内，经过复杂的代谢才能形成具有活性的5-甲基四氢叶酸[5]。部分女性的相应酶活性低，对普通叶酸的利用度低，导致对神经血管缺陷预防作用降低[6]。活性叶酸无须经过体内酶的催化作用，直接补充5-甲 基四氢叶酸，稳定性、生物利用度均比普通叶酸高，不易被破坏，机体吸收率高，对神经血管缺陷的预防效果较好。MTHFR基因是叶酸代谢过程中的一种关键酶，包括20多种多态性突变位点，其中C677T多态性突变最具临床意义[7]。本文结果显示，在C677 T/T、C/C、T/C 3个基因型中，T/T型较其他2型妇女体内叶酸水平低(P<0.05)，且不良出生结局发生率较高(P<0.05)。

总之，对育龄妇女加强叶酸代谢基因多态性检测，围孕期服用活性叶酸能直接补充5-甲基四氢叶酸，降低不良出生结局发生率。