脐带血ANG对足月新生儿缺氧缺血性脑病的诊断价值

王增芹，刘 倩

缺氧缺血性脑病（HIE）是导致新生儿死亡的重要因素之一。足月儿HIE的发生率为1‰～4‰，约20%～50%患儿早期死亡，25%～60%存活的患儿有神经系统后遗症[1]。因此，及早诊断并有效治疗，对改善患儿预后至关重要。但是目前HIE主要依靠临床表现、神经系统评估进行诊断和分度，缺乏疾病早期诊断指标。血管生成素（ANG）是一种诱导血管生成的细胞因子，在大脑和脊髓神经元中广泛表达，其表达水平与窒息具有一定关系[2]。本研究分析了足月新生儿脐带血ANG与HIE的关系，探讨其是否可作为HIE早期诊断指标之一。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选择2017年2月～2018年3月在医院出生的68例足月新生儿为研究对象，其中32例围产期窒息并确诊为HIE的患儿为观察组，36例健康儿为对照组。两组基本资料比较无统计学差异（P＞0.05，表1），具有可比性。本研究获得医院伦理委员会的批准并签署知情同意书。

表1 两组一般资料比较

1.2 观察指标 两组新生儿均于出生后进行1、5、10 min的Apgar评分和神经系统检查；同时立即采集脐带血4 ml，室温下1000 r/min离心10 min分离血清 （溶血标本需排除），-70℃储存，进行血常规、脐带血气和ANG检测。ANG检测采用定量比色度夹心ELISA的人血管生成素免疫测定法（R&D Systems,Abingdon,Oxon,UK）。

1.3 统计学方法 应用SPSS 20.0统计软件分析，计量资料以均数±标准差表示，采用t检验或单因素方差分析进行比较；计数资料以百分率和例数表示，采用χ2检验或Wilcoxon秩和检验进行比较；采用Pearson直线相关分析ANG与pH关系，Spearman秩相关分析ANG与HIE分度关系；采用ROC曲线分析检测指标的灵敏度和特异性。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组观察指标比较 与对照组相比，观察组的1、5和10 min的Apgar评分和pH值明显降低，白细胞计数和ANG水平显著升高，血小板计数均明显降低（P＜0.05）。见表2。

表2 两组观察指标比较

2.2 不同程度HIE患儿脐带血ANG水平比较观察组患儿确诊HIE后，根据Sarnat标准[3]分为轻、中、重度，其中轻度13例、中度11例、重度8例。脐带血ANG水平检测结果显示，重度HIE患儿ANG水平为（1213.0±179.7）pg/ml，中度为（812.7±137.4）pg/ml，轻度为（423.3±115.2）pg/ml，不同程度 HIE 患儿脐带血ANG水平比较均有显著差异（P＜0.05）。

2.3 脐带血ANG与脐带血pH和HIE分度之间的相关性分析Spearman秩相关分析提示，脐带血ANG水平与HIE严重程度成呈相关（r=0.937，P＜0.01）；Pearson直线相关分析提示，脐带血ANG水平与pH值呈明显负相关（r=0.816，P＜0.01，图1）。

图1 脐带血ANG与脐带血pH之间的相关性分析

2.4 脐带血ANG对HIE的诊断价值分析 脐带血ANG诊断HIE的ROC曲线下面积为0.918（95%置信区间为0.856～0.980），当脐带血ANG水平超过507.35 pg/ml时，对HIE的诊断具有75.0%的灵敏度和94.4%的特异性，见图2。

图2 脐带血ANG对HIE的诊断价值分析

3 讨论

部分新生儿HIE可能是亚临床表现或者受镇静影响无法准确评估，即使进行密切的临床监测，早期诊断也很困难。此外，影像学评估对于早期发现HIE不够敏感。因此，探讨能够早期检测脑损伤变化的特异性标志物，对于早期诊断HIE脑损伤、尽早治疗、改善患儿预后、降低死亡率至关重要。

有研究表明，ANG可以促进内皮细胞增殖、加速血管生成和重构，也可以抵抗内皮细胞的凋亡，也可以与其他血管因子联合作用，保持血管的稳定性和完整性，并调节血管功能，从而改善缺血缺氧区域的血液循环[4]。因此，ANG诱导血管生成过程对于神经系统的恢复是至关重要的。研究发现，新生儿脑组织发生缺血缺氧等改变后，脑损伤组织中可见新生的血管，这些血管能够改善脑损伤区域的血流灌注，从而促进脑损伤后神经系统功能的恢复。近年研究发现，ANG作为血管生成诱导剂，可以作为成人脑卒中的诊断和预后评估标志物[2]，但在儿童疾病中缺乏相关研究。

本研究发现，脐带血ANG水平在足月新生HIE患儿中明显高于正常足月新生儿，并且HIE程度越重，ANG表达水平越高。而且本研究是在新生儿娩出即刻采集脐带血进行检测，因此，脐带血ANG作为HIE早期诊断的分子标志物具有理论依据，且脐带血ANG可作为评估HIE病情程度的客观指标。

有研究证实，脐带血pH＜7.0与围产期缺血缺氧损伤相关[5]，但是，对于脐带血酸中毒与ANG之间的关系尚未知。本研究发现，脐带血ANG水平与脐带血pH呈负相关关系。这可能是因为各种因素引起婴儿缺氧，无氧酵解增加，乳酸水平升高，脐带血处于酸中毒状态，这进一步刺激神经保护介质ANG水平升高，改善脑组织血液循环。

本研究进一步分析发现，脐带血ANG诊断HIE的ROC曲线下面积为0.918，最佳临界诊断点为507.35 pg/ml，具有75.0%的灵敏度和94.4%的特异性，说明脐带血ANG对HIE的早期诊断具有较高的灵敏度和特异性，因此是评估足月儿脑损伤的有效生物标志物之一。

综上所述，脐带血ANG在足月HIE新生儿中显著增加，可作为HIE诊断和评估病情严重程度的标志物。