SOX4基因在急性髓系白血病患者骨髓中检测的意义

王庆义

（安徽医科大学附属阜阳医院 血液科，安徽 阜阳 236000）

0 引言

白血病是一类造血干细胞的恶性克隆性疾病，白血病约占恶性肿瘤总发病率的5%，按起病的缓急可分为急、慢性白血病。随着环境污染的加剧，白血病发病率明显升高[1]。近年来研究发现基因的表达异常为影响急性髓系白血病（AML）发病的主要因素，如CBFB、PML-RARα/t(15；17)、CEBPA基因突变、BAALC基因等。近年来大规模研究应用于识别新的癌症相关基因成为临床的热点[2]，SOX4属于SOX转录因子家族,共享相同的DNA结合域。相关研究指出Sox家族成员在许多肿瘤发育过程的调节中是至关重要[3]。在膀胱癌中，SOX4高表达与增加病人的存活期显著相关，为此本文拟收集我院急性髓系白血病患者，分析骨髓中检测SOX4基因的意义。

1 资料与方法

1.1 资料

收集2017年7至2018年7月我院诊断为急性髓系白血病的患者，共计60例，根据急性髓系白血病WHO修订的MICM分型，其中M2患者40例；M3患者17例；M5患者3例。将我院未诊断为急性髓系白血病的患者定义为对照组，共计60例。研究组男33例，女27例，年龄39-69岁,平均年龄（48.32±18.23）岁。对照组男29例，女31例，年龄41-72岁,平均年龄（49.01±19.61）岁。两组性别和年龄比较无差异。患者无其它血液系统异常，无感染疾病。

1.2 研究方法

1.2.1 主要试剂及仪器

SOX4拟转录试剂盒及引物、PCR仪、红细胞细胞裂解液等。

1.2.2 SOX4基因

1.2.2.1 总 RNA提取

取骨髓血2-3 mL，加入红细胞裂解液，混匀后静置，充分裂解红细胞。加入TRIzol及氯仿，离心后加异丙醇，颠倒混匀，沉淀过夜。加入75%乙醇1 mL，离心5 min，弃上清，风干20 min后加入DEPC水20 μl溶解。

1.2.2.2 逆转录PCR

按cDNA合成试剂盒说明书将提取的总RNA进行c DNA的合成。

1.2.2.3 荧光定量 PCR

SOX4引物：上游序列：5-GTGAGCGAGATGATCTCGGG-3，下游序列：5-CAGGTTGGAGATGGACTC-3。

1.3 观察指标

对比研究组和对照组SOX4基因水平；不同生存期患者SOX4基因水平；SOX4基因水平与患者预后的关系。

1.4 统计学

采用SPSS 17.0软件，计数资料χ2检验，计量资料t检验，P＜0.05为差异有意义。

2 结果

2.1 研究组和对照组SOX4基因水平

研究组SOX4基因水平明显高于对照组，两组结果比较有差异（P＜0.05），见表1。

表1 研究组和对照组SOX4基因水平

2.2 不同生存期患者SOX4基因水平

1年死亡组SOX4基因水平明显高于1年存活组，两组结果比较有差异（P＜0.05），见表2。

表2 不同生存期患者SOX4基因水平

2.3 SOX4基因水平与患者预后的关系

SOX4基因水平与1年死亡组关系呈负相关（r=-0.723，P＜0.05）。

3 讨论

正常情况下，人体造血系统每天能产生数亿个细胞，其中各种细胞均来源于造血干细胞。造血干细胞能分化为祖细胞。若此过程中有任何基因受到影响，均会影响造血过程[4]。目前我国白血病的发病率为3-4/10万，白血病在男性患者位居第六位，在儿童中则居首位。根据形态、免疫表型和遗传学异常将急性髓系白血病分为不同的亚型。急性髓细胞白血病(AML)主要特点为分化障碍和造血干细胞的异常克隆。目前随着研究的深入，发现很多生物学分子参与白血病的发生、发展，并可作为白血病的靶向治疗位点[5]。

在肿瘤形成过程中，SOX4基因发挥着关键作用。如SOX4表达降低与黑色素瘤的转移和不良预后显著相关。SOX4是SOX性别决定区域的成员，SOX4基因表达异常在AML发病中起着重要作用[6]。一些研究指出SOX4可通过逆转录病毒诱导淋巴瘤的发生。本文发现研究组SOX4基因水平明显高于对照组，两组结果比较有差异（P＜0.05）；1年死亡组SOX4基因水平明显高于1年存活组，两组结果比较有差异（P＜0.05）。同样有研究者采用实时定量PCR方法检测96例初发AML患者及26例健康对照组骨髓白细胞SOX4基因的表达水平，96例初治AML患者均检测到SOX4的表达，其平均表达水平为（3.35±1.78），健康对照组SOX4表达水平为（1.91±1.47）。这说明SOX4基因参与AML的发病。研究指出SOX4属于高度保守的C组（SoxC）转录因子，SOX4增加的干细胞特性、细胞迁移性[7]。目前大量文献指出SOX4基因几乎在所有的人类肿瘤中表达升高，包括乳腺癌、肺癌、脑肿瘤。同时SOX4与恶性肿瘤的细胞增殖及扩散有关。本文还发现SOX4基因水平与1年死亡组关系呈负相关（r=-0.723，P＜0.05）。这说明SOX4基因表达增高，可以会减少患者的生存时间[8-10]。同样有学者发现AML患者以SOX4基因相对表达量中位数3.26为界限，将其分为低表达组(＜3.26)和高表达组（≥3.26），采用Kaplan-Meier分析法绘制生存曲线。结果显示，SOX4高表达组OS及EFS均较低（P=0.003、P=0.023）。这说明高SOX4高表达是急性髓系白血病患者的预后危险因素之一。

综上所述，本文认为SOX4基因在急性髓系白血病患者骨髓中表达较正常人高，SOX4基因高表达可能与预后差有关。这就为医学工作者提供一种思路，即通过研究SOX4基因可能为AML患者靶向治疗。