Xklp2靶蛋白在结直肠癌中的表达及与其临床病理特征的关系

贾 乐 尚淑平

数据显示，结直肠癌属于消化道常见肿瘤之一，位居恶性肿瘤死亡率第4位[1]。我国近些年结直肠癌发病率及死亡率也呈现递增趋势，35岁以上人群中结直肠癌的发病率约为24～32/10万，死亡率约为4.0%，位居我国恶性肿瘤发病第三位和死亡第五位，对居民生命健康造成严重威胁[2]。近些年流行病学及分子生物学的发展，使结直肠癌的高危因素及相关基因逐渐明确[3]。TPX2是1种受细胞周期严格调控的相关蛋白，在细胞有丝分裂中发挥重要作用[4]，本文作者通过研究发现，TPX2在结直肠癌患者中呈现高表达状态，其表达水平与患者TNM分期、浸润深度及是否存在淋巴结转移存在明显关联，且TPX2表达与患者癌细胞增殖及血管新生过程是否有关，现详述如下。

1 材料与方法

1.1 资料

选择2015年1月至2017年1月于宝鸡市中医医院进行治疗的30例结直肠癌患者与铜川市矿务局中心医院进行治疗的37例结直肠癌患者为研究对象，采集其结直肠癌组织标本及癌旁组织标本，另选取70例正常结直肠黏膜作为对照组，67例结直肠癌患者中男性37例，女性30例，年龄44～68岁，平均年龄(53.06±2.65)岁，70例正常对象中男性35例，女性35例，年龄45～69岁，平均年龄(53.18±1.98)岁，两组一般资料如性别、年龄等对比差异不具有统计学意义。

纳入标准：①结直肠癌患者均经病理学诊断确诊；②病历资料齐全；③结直肠癌患者未接受放化疗、免疫治疗；④调研经医院伦理学会批准实施；⑤研究对象及其家属对本次调研过程、方法、原理等清楚明白并签署知情同意书。

排除标准：①合并精神障碍者；②合并其他恶性肿瘤者③既往放化疗史。

1.2 方法

取结直肠癌患者癌组织、癌旁组织，取健康对照组患者结直肠癌黏膜，使用液氮及多聚甲醛进行固定后使用石蜡包埋，连续切取4 μm切片，逐级脱蜡至水，使用双氧水冲洗，高温高压修复，加入一抗，放入湿盒内，置于4 ℃保存，加入生物素标记，室温放置20 min，脱水处理后封片，置于电子显微镜下观察；抽取结直肠癌患者空腹静脉血5 ml，分离血清后检测其血清CEA及VEGF水平。

1.3 观察指标及评测标准

1.3.1 不同组织TPX2表达阳性率检测 对结直肠癌组织、癌旁组织及正常结直肠黏膜TPX2的表达阳性率进行观测，标本检测阳性率根据其免疫组化结果及阳性细胞比例进行记录，免疫组化结果判定选择如下方式：根据其着色强度，无色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，褐色、黑色为3分；阳性细胞比例按如下标准：≤10%为1分，11%～50%为2分，51%～75%为3分，75%以上为4分，两项相乘<3分为阴性，≥3分为阳性[5]。

1.3.2 TPX2阳性率与临床病理关系 对结直肠癌患者临床病理特征进行分析，就其癌组织TPX2表达阳性率与其性别、年龄、TNM分期、是否存在淋巴结转移、分化程度、病灶大小、浸润深度之间的关系进行探究。

1.3.3 TPX2表达阳性率与其1年生存率关系 根据结直肠癌患者TPX2表达是否为阳性将其区分为阳性组与阴性组，对两组患者进行1年远期随访，对比其生存率。

1.3.4 TPX2表达阳性率与其癌细胞活力及血管新生关系 根据结直肠癌患者TPX2表达是否为阳性将其区分为两组，分析对比两组患者的血清CEA及VEGF水平。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 不同组织TPX2表达阳性率对比

经评估对比，癌组织TPX2表达阳性率85.07%(57/67)高于癌旁组织34.33%(23/67)，癌旁组织高于正常组织8.57%(6/70)(P均<0.05)。

2.2 TPX2阳性率与其临床病理的关系

经评估对比，发现TPX2表达阳性率与结直肠癌患者TNM分期、浸润深度及是否淋巴结转移存在密切联系(P<0.05)，与患者性别、年龄、分化程度、肿瘤直径不存在明显联系(P>0.05)，见表1。

表1 TPX2阳性率与结直肠癌临床病理的关系(例，%)

2.3 TPX2表达阳性与患者1年生存率的关系

经检查，结直肠癌中TPX2表达阳性患者为57例，阴性者为10例，随访1年示，阳性患者1年生存率为63.16%(36/57)，阴性患者1年生存率为80.00%(8/10)，两组对比差异具有统计学意义(P<0.05)。

2.4 TPX2表达阳性与其癌细胞活力及血管新生关系

经评估对比，TPX2阳性结直肠癌患者血清CEA及VEGF水平明显高于阴性组患者，对比差异具有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 TPX2表达阳性率与其癌细胞活力及血管新生关系

3 讨论

结直肠癌是全球三大恶性肿瘤之一，也是我国常见恶性肿瘤，数据显示，30年来我国结直肠癌发病率以每年3%～4%的比率不断攀升，虽然我国2012年结直肠癌标化发病率为14.2/10万，位居世界第75位，暂处非高发水平，但我国结直肠癌的发病和死亡总例数却位居世界第一位，据国家癌症中心全国肿瘤登记数据报告，我国结直肠癌病死率位居恶性肿瘤第4位，已经成为威胁居民生命健康的重要因素[6-7]。早期的检测及干预可提高结直肠癌患者的生活质量，延长其生存期的重要手段，以往结直肠癌病情判断多依赖病理学检查，此方式检验周期长、患者较为痛苦，临床推广难度也较大。近些年，随着对肿瘤细胞和分子水平研究的深入，各类肿瘤标志物在恶性肿瘤病情分析及预后判断中发挥出越来越重要的作用[8]。

TPX2是脊柱动物中一类新的纺锤体成分家族，该物质为组成纺锤体的微管蛋白，广泛分布于S期和G2期，在细胞的有丝分裂中发挥着重要作用，此类物质的表达水平受到细胞周期的严格调控，随着细胞周期的变化而不断变动，其异常表达往往与细胞核的异常增殖有密切联系。学者熊超[9]通过将42例结直肠癌组织与癌旁组织进行切片染色对比的方式发现，结肠癌组织TPX2蛋白阳性表达率明显高于癌旁组织，该学者分析认为，TPX2能够与Aurora A激酶相互作用从而促进该蛋白在纺锤体中定位，从而起到启动有丝分裂及纺锤体聚集的作用，因而其高表达，提示细胞正处于积极分裂状态，与癌组织的增殖扩散密切相关。学者刘洁等[10]也通过将72例结直肠癌、68例不典型增生组织及42例正常结直肠黏膜进行对比分析的方式发现，TPX2在3组标本中的表达水平呈现明显差异，表达阳性率分别为66.7%、47.0%及7.1%，同时该研究还指出，TPX2表达与结直肠癌患者的临床分期、浸润深度密切相关，表明TPX2可能与结直肠癌的发生、发展有联系。

本文比对分析发现，癌组织TPX2表达阳性率高于癌旁组织，癌旁组织高于正常组织，同时本研究还发现，TPX2表达阳性率与结直肠癌患者TNM分期、浸润深度及是否存在淋巴结转移存在密切联系。本文作者分析认为，TPX2的过量表达能够促进微管的形成，对细胞有丝分裂起促进作用，同时TPX2还能够从细胞核逃逸以调解非有丝分裂细胞的微管细胞骨架，因而该物质能够影响细胞周期，现阶段已有多项研究证明，TPX2在肝癌、胃癌、胰腺癌、肺癌等都存在多表达状态，分析其原因为TPX2能够使细胞中心体异常扩增，使细胞迟滞于G2/M期，抑制细胞的凋亡，促进细胞增殖，从而促进肿瘤病灶的生长。本文研究同时发现，TPX2表达阳性患者其血清CEA及VEGF水平明显高于表达阴性患者，CEA是临床上常用的肿瘤标志物，能够反映肿瘤的负荷程度及癌细胞的活力，而VEGF是介导血管新生的重要物质，其高表达提示血管正处于积极生长状态，与癌组织扩散增殖有密切联系，也印证了TPX2与肿瘤生长相关这一观点。

总而言之，TPX2在结直肠癌患者中呈现高表达状态，其表达水平与患者TNM分期、浸润深度及是否存在淋巴结转移存在明显关联，且TPX2表达与患者癌细胞增殖及血管新生过程有一定联系，可以将该物质作为新的肿瘤标志物，对结直肠癌患者病情进行判断。