细胞DNA定量分析联合宫颈细胞涂片在宫颈癌筛查中的应用价值

徐 琭 崇庆国 单锦妹

我国每年新增大约13万的宫颈癌患者，且有约5万例患者死于宫颈癌[1]。对宫颈上皮内瘤变进行早期诊断以及治疗是防治宫颈浸润癌的重要环节。近年来，宫颈细胞学检测技术得到迅速的发展，特别是在制片以及取材方法上获得了较大的进步，如用液基涂片取代常规的直接细胞涂片，用宫颈刷来取代常规的宫颈刮板[2-3]。本研究对细胞DNA定量分析联合宫颈细胞涂片在宫颈癌筛查中的应用价值进行了分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2015年10月至2018年10月我院进行宫颈癌筛查且有活检结果的3294例患者，患者无任何自觉症状或者出现接触性出血、白带异常、阴道流血症状。患者年龄19 ～ 65岁，平均 (39.72 ± 6.41) 岁；所有患者在就诊时均未处于妊娠状态，并且均未行子宫切除手术。

1.2 方法

每位患者均同时制2张宫颈细胞涂片，其中一张采取 Feulgen 染色法，并进行细胞 DNA定量，具体方法如下：采用贝克曼z2全自动细胞像分析仪对宫颈细胞涂片进行扫描，选取大约 8000个细胞核。每个细胞核可以产生超过100个参数的特征值。全自动细胞分析仪通过分析这些细胞核的特征值，可以自动的实施分类处理。标准：①可疑：增生细胞数量占所有检测到细胞总数量的5%～10%，或发现DNA指数≥2.5 的倍体异常细胞1～2个，应当建议患者半年后开展复查。②阴性：所有检测到细胞中主要为正常的二倍体细胞，DNA 指数小于2.5，未发现任何倍体异常的细胞，增生细胞数量占所有检测到细胞总数量的5%以下，建议患者定期进行宫颈癌筛查。③阳性：增生细胞数量占所有检测到细胞总数量的10%以上，或发现超过3个的DNA指数≥2.5的倍体异常细胞，建议患者开展进一步的临床活检或阴道镜检查。另外一张采取巴氏染色进行常规的细胞学 TBS检测，TBS 的分类标准如下：意义不明的不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)；正常范围，未发现上皮内病变或者恶性病变(NILM)；低度鳞状上皮内病变(LSIL)；非典型腺细胞(AGC)；高度鳞状上皮内病变(HSIL)；非典型腺细胞和鳞状细胞癌(SCC)等。

对细胞学检查阳性或者临床可疑的女性均开展阴道镜检查，且对宫颈的可疑部位采取病理活检，病理报告分为浸润癌、宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ/原位癌。

特异性=真阴性/(真阴性+假阳性)，敏感性=真阳性/(真阳性+假阴性)，阴性预测值=真阴性/(真阴性+假阴性)，阳性预测值=真阳性/(真阳性+假阳性)。

1.3 统计学分析

2 结果

2.1 2种检查方法与病理学结果的对照

以病理学结果作为诊断的金标准，3294例中共有慢性宫颈炎3177例，宫颈癌7例，67例CINⅠ，22例CINⅡ，21例CINⅢ。细胞学 TBS检测对 15例宫颈癌、CINⅡ、CINⅢ患者诊断为 ASCUS，可能会由于建议复查而推迟病理学检查，导致病情贻误。细胞 DNA 定量分析对40例宫颈癌、CINⅡ、CINⅢ患者均检测为阳性，3例CINⅠ患者判定结果为可疑。细胞学 TBS联合细胞DNA 定量分析，除了2例 CINⅠ患者判定为可疑外，其余的癌前病变患者均可以被检出，见表1。

表1 2种检查方法与病理学结果的对照/例

2.2 细胞DNA定量分析与细胞学TBS诊断的准确性比较

细胞学 TBS诊断的特异性为65.85%，敏感性为82.56%；细胞DNA定量分析的特异性为68.75%，敏感性为88.23%；联合检测的敏感性和阴性预测值均为100.00%，见表2。

表2 细胞 DNA 定量分析与细胞学 TBS诊断效能的比较/%

3 讨论

定期筛查是预防宫颈癌的有效方法。宫颈癌早期的症状普遍不典型，当患者由于身体出现不适而到医院检查时常常病情已发展至中晚期，而近年来宫颈癌的发病率迅速升高，严重威胁着女性的健康[4]。宫颈癌患者的疾病发展过程中可逆转且有较长时间的癌前病变期，需要 5 ～ 15 年的时间，为早发现和早治疗宫颈癌患者创造了有利的时机[5-6]。降低以及预防宫颈癌发生的关键在于对宫颈上皮内瘤样病变患者的早期诊断。宫颈细胞学检测、巴氏涂片、阴道镜检查以及人乳头瘤病毒-DNA检测是早期筛查宫颈癌的常用手段。

细胞学检测是筛查及诊断宫颈病变的第一步，在诊断宫颈癌的过程中发挥着较为重要的作用。但是细胞学检测主要根据细胞的形态学进行诊断，技术人员必须具备极为丰富的操作经验，否则可能会造成敏感性降低、假阳性及假阴性发生率升高[7]。经细胞DNA定量分析技术通过检测机体中的DNA水平，从而可以了解和掌握患者肿瘤细胞相关的遗传基因发生变异的过程。在较高级别的HSIL和宫颈鳞状细胞癌患者中，均可以发现DNA倍体异常的细胞[8-9]。细胞癌变的本质在于细胞快速出现无限的转移以及增殖，检测细胞核的DNA含量，能有效诊断恶性肿瘤。如果机体内出现异倍体细胞，则表明染色体的数量以及结构发生率异常的改变，并且也可以作为细胞发生癌变的早期临床特征，异倍体细胞的数量越多，表明肿瘤细胞的恶性度越高，分化程度越低[10]。本研究发现，细胞学 TBS诊断的特异性为92.83%，敏感性为 53.19%；细胞 DNA 定量分析的特异性为98.69%，敏感性为100.00%；联合检测的敏感性和阴性预测值均为100.00%。表明细胞DNA定量分析技术的敏感性明显高于细胞学TBS诊断，若能把两种检测方法联合使用，则可以将敏感性提高至100.00%。因此，将细胞DNA定量分析方法应用于宫颈癌的筛查之中，能有效提高敏感性，避免漏诊。细胞 DNA定量分析方法对临床医师掌握技术的要求程度较低，操作较为简单，通过短时间的培训后，临床医师就能开展操作，因此与常规的细胞学 TBS诊断相比较，更适合用于临床宫颈癌的筛查。

综上所述，在常规的宫颈细胞涂片细胞学检查中联合采取细胞 DNA 定量分析技术在宫颈癌筛查中具有较高的应用价值。