肌肉注射泰地罗新注射液对猪安全性研究

闫超群，张 申，谢 顺，曾松情，黄春梅，顾 欣，曹 莹，黄士新，黄显会

(1.华南农业大学兽医学院,广东广州510642；2.上海市动物疫病预防控制中心，上海长宁201103)

泰地罗新(Tildipirosin)是新型十六环大环内酯类抗生素，和其他大环内酯类抗生素一样，泰地罗新的抗菌机理主要是因为它能与细菌核糖体的50S亚基相结合。因而它能阻碍肽链的合成与延长，使细菌蛋白质的合成受阻，达到抗菌的效果[1-6]。泰地罗新主要用于由猪胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌、副猪嗜血杆菌等引起的猪呼吸道疾病(SRD)，以及由牛溶血性曼氏杆菌(Mannheimiahaemolytica), 多杀性巴氏杆菌, 睡眠嗜组织菌(Histophilussomni)等引起的牛呼吸道疾病(BRD)。欧盟药品管理局(EMA)和美国食品药品监督管理局(FDA)已批准泰地罗新注射液，商品名为Zuprevo。泰地罗新注射液单次给药即可提供全程治疗，在牛和猪的给药剂量均为4 mg/kg·bw，牛的给药方式为皮下注射，猪的给药方式为肌肉注射[1,7-8]。本试验对国产泰地罗新注射液在靶动物猪体内进行了安全性试验, 为其临床上安全用药提供试验依据。泰地罗新化学式见图1。

图1 泰地罗新化学结构式

1 材料与方法

1.1 药品和试剂 泰地罗新注射液，含量4%(100 mL∶4 g)，批号：20150401，由上海同仁药业有限公司提供。血清生化指标测定试剂,深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司。

1.2 仪器设备 全自动血液学分析仪：BS-300型，深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司。血液生化分析仪：BS-5 000型，深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司。光学显微镜：XSP-2C型，上海光学仪器五厂。显微照相设备：Axioskop2 plus型，德国ZEISS公司。

1.3 实验动物 健康二元杂交猪24头，2月龄左右，体重为15 kg左右。试验前按常规饲养，自由饮水和采食，饲料为全价日粮(不含抗菌药物)，观察两周。

1.4 分组与给药 选取临床表现健康的猪进行试验。 24头猪随机分为4组，各组6头，设为空白对照组(生理盐水)、泰地罗新注射液推荐剂量组(4 mg/kg·bw)、3倍推荐剂量组(12 mg/kg·bw)、5倍推荐剂量组(20 mg/kg·bw)，给药方式均为单次颈部肌肉注射给药。

1.5 检查指标

1.5.1 一般临床观察 在给药前及给药后观察猪的精神、采食、饮水、排泄等一般临床行为，并于给药前、给药后第7天和第14天对猪进行称重。

1.5.2 血液常规指标 用血液分析仪测定全血中白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、红细胞分布宽度变异系数(RDW)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞容积(MCV)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCH)、平均红细胞血红蛋白含量(MCHC)、血红蛋白(HGB)等8项血常规指标。

1.5.3 血清生化指标 用全自动生化分析仪测定血清中肌酐(CREA)、血糖(GLU)、钙(Ca)、磷(P)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、血液尿素氮(BUN)、 乳酸脱氢酶(LDH)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、碱性磷酸酶(ALP)、尿酸(UA)、肌酸激酶(CK)、总胆红素(TBIL)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、镁(Mg)等19项指标。

1.5.4 病理组织学检查 于给药后第14天时宰杀所有试验猪，解剖过程中观察一般肉眼可见变化，并采集多种组织器官(肝、肾、心脏、脾脏、脑组织)制作病理切片，观察病理切片组织学变化。

2 结果与分析

2.1 临床表现 在试验初期，泰地罗新注射液高剂量组(20 mg/kg·bw)的猪出现划水，抽搐，喘气，站立不稳等症状，但该反应恢复比较快，高剂量组的猪于1 h后死亡2头。其余各剂量组及空白对照组的猪，进食、饮水正常，行为正常，呼吸和排泄未见异常，临床表现正常。因此，建议该药临床使用剂量不宜过高。国外对该药的靶动物安全性评价也有类似的报道[7]。

2.2 体重 泰地罗新注射液各剂量组及空白对照组在给药前及给药后7 d和14 d进行称重。结果表明，给药前后泰地罗新注射液各剂量组与空白对照组猪的体重在不同时间点均无显著性差异。

2.3 血液常规指标检测结果 由表1可知，给药后14 d的采样点，给药组白细胞(WBC)数显著高于对照组(P<0.05)。这可能是泰地罗新注射液引起动物体的炎症损伤。其他指标相对于空白对照组都没有显著性变化。血常规结果见表1。

2.4 血液生理生化指示检测结果 由表2可知，生化指标γ-GT、ALT、TG、GLB、TP、TC、UA、P和Mg在给药后7 d，试验组显著高于空白对照组(P<0.05)，给药14 d后与空白组无显著性差异(P>0.05)。其中，γ-GT 、ALT、TP、TC、TG和GLB的增加。可能是泰地罗新注射液对机体肝脏损伤的表现。ALT是动物最敏感的肝功能指标之一。血清中TC、P和Mg水平给药后随着给药剂量的增加而降低，说明泰地罗新对 P、Mg 在血液中的含量有一定影响，这可能是由于肾或甲状腺功能受损引起的。给药后AST、ALB、CK和Glu等指标呈降低趋势，临床无参考意义[9-11]。上述这种差异随着给药后时间的延长，逐渐无显著性差异(P>0.05)。

2.5 病理组织学检查结果 试验结束后，对各试验组每组宰杀1头猪，经剖检检查，各组组织器官未见异常。采集猪大脑、心脏、肾脏、脾脏、肝脏等各部位组织，进行H.E.染色，并通过显微镜镜检观察

有无病理变化。病理组织切片见中插彩版图2～图9。由中插彩版图9可知，在20 mg/kg·bw组中，我们发现一些心肌细胞出现变性。其他试验组无明显的病变发生。这说明泰地罗新高剂量注射可引起仔猪心脏的损伤。

3 结论

对猪单次肌肉注射泰地罗新注射液, 并进行临床症状、血液生理生化指标对比分析, 与给药前相比，除高剂量组(临床推荐剂量的5倍)，所有动物给药后采食和行动正常, 呼吸和排泄也未见异常。在4～12 mg/kg·bw剂量范围内, 肌肉注射泰地罗新注射液, 对猪血液常规指标和生理生化指标无明显影响。泰地罗新注射液符合注射剂相关要求，可用于临床注射。但在临床使用时应注意严格控制给药剂量，保证人畜的健康安全。泰地罗新注射液在临床使用中按“肌肉注射, 每千克体重, 猪4 mg/kg·bw，单次给药”的用法和用量使用安全, 无明显不良反应。