发酵中药制剂对育肥猪肉品质、血清生化指标及免疫功能的影响

方磊涵,刘诗柱,王 留

(商丘职业技术学院，河南商丘476100)

中药具有不易产生耐药性，低或无残留和毒性的饲料添加剂，在畜禽生产中得到了广泛的应用[1]。尤其是随着规模化、集约化养殖业的发展，为了减少疾病而大量使用抗生素导致畜产品中药物残留严重，进而影响着人们对健康畜产品的需求以及畜产品的出口贸易，在这种养殖和畜产品需求的矛盾中亟待寻求各类药物的替代品以解决动物源食品安全问题[2]。众所周知，中药具有简、便、廉、验等特点，是我国具有国际优势的潜在资源，并为中化民族提供了健康保障。

发酵是中药材的传统炮制方法之一，大量研究表明，经过微生物发酵后的中药，有效成分含量升高，利于机体吸收利用，有增效减毒作用，可扩大治疗范围和药物品种[3-4]。另外，发酵后的中药，因疗效增强，可明显降低用量，节约养殖成本。发酵中药作为一种新型功能性饲料添加剂，可提高动物生产性能和免疫功能及改善肉品品质，具有替代抗生素的潜力[5]。Ahmed等[6]用中药石榴皮、银杏叶、甘草组方发酵后饲喂育肥猪，可有效地提高其生产性能和免疫力，改善肉品质。崔艳红等[7]研究表明，益生菌复合发酵饲料使仔猪营养素合成代谢能力增强，利于生长。本试验选择具有清热解毒、燥湿，健脾理气，杀虫、消积导滞等功能的中药组方，用乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌综合发酵，以不同比例添加在育肥猪的饲料中，探讨其对育肥猪肉品质、血液生化指标及免疫功能的影响，为中药发酵制剂在生长育肥猪养殖中合理应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 未发酵中药制剂和发酵中药制剂 试验用未发酵和发酵中药制剂组方相同：黄芪4份、白术4份、秦皮3份、苍术2份、黄连3份、何首乌2份、陈皮2份、焦三仙各3份、松针4份、贯众1份。中药均购自亳州中药材专业市场。

未发酵中药制剂：将以上药物除去杂质，烘干，按比例充分混合均匀后粉碎，过80目筛于干燥处密封保存备用。

发酵中药制剂：将以上12味中药，按照孙晓燕等[8]方法制作。中药烘干，粉碎过60目筛，混合均匀，用活化计数后的复合益生菌(乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌，按1∶1∶1的比例混合)接种(总接种量为12%)于粉碎的中药中，放入发酵罐中发酵72 h(温度为30 ℃～37 ℃，湿度为70%～80%)。将上述发酵产物烘干(湿度控制在60 ℃～80 ℃)后即得发酵中药制剂，备用。

1.2 试验动物与分组处理 选择60头日龄、体重相近的三元杂交(杜×长×大)生长育肥猪(商丘凤飞种猪场提供)，随机分为5组，4个重复，每个重复3头。对照组(基础日粮)，试验Ⅰ组(基础日粮+2%未发酵中药制剂)，试验Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组(基础日粮+1%、1.5%或2%发酵中药制剂)，预试期3 d，正试期37 d。

1.3 基础日粮 基础日粮为玉米-豆粕型日粮，按照 NRC(2012)育肥猪营养需要标准配制，基础日粮组成及营养水平见表 1。

表1 日粮配方及营养水平

* : 预混料配方见表2；营养成分含量为计算值

表2 预混料配方(每千克日粮提供)

1.4 饲养管理 试验期间各组饲养管理条件一致，自由采食和饮水，所有猪只采用单笼饲养，每天饲喂 3次，饲喂时间分别为7:00、14:00 和20:00，饲喂量以料槽内略有剩余为标准。每天进行圈舍清洁和消毒，并保持舍内通风和干燥，保持圈舍清洁卫生。

1.5 测定指标及方法

1.5.1 肉品质检测 方法参见文献[9]。活猪屠宰后，分割胴体，取左侧胸椎至第六腰椎的背腰最长肌作为样本，置于 4 ℃冰箱中待测。分别测定样本的 pH 值( pH值45 min、pH值24 h )、肉色(亮度L*、红度a*和黄度b*)、滴水损失、剪切力、失水率、背膘厚度和眼肌面积。

1.5.2 血液生化指标测定 试验结束后，对所有试验猪禁食12 h，耳缘静脉采血5 mL，静置2 h析出血清后, 3 000 r/min离心15 min，制备血清样品。用半自动生化分析仪测定总蛋白( TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、尿素氮(BUN)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、血糖(GLU)、甘油三脂(TG)、总胆固醇(GHO)的含量(商丘市第四人民医院检测)。

1.5.3 血清免疫球蛋白指标测定 运用免疫比浊法测定血清中免疫球蛋白(IgG 、IgA、IgM)的含量。

1.6 数据统计分析 采用 SPSS19.0软件对试验数据进行统计学分析，各组间的差异显著性检验采用单因素方差(One-Way ANOVA)分析，LSD法多重比较，P<0.05为差异显著，结果以平均数±标准误差(X±SD)表示。

2 结果与分析

2.1 发酵中药制剂对育肥猪肉品质的影响 由表3可知，与对照组相比，试验各组的猪背长肌肉中的pH值45 min和pH值24 h值均有不同程度的下降，但差异不显著(P>0.05)；试验Ⅲ、Ⅳ组肉色的红度值显著高于对照组(P<0.05)；试验Ⅲ组的剪切力明显低于对照组、试验Ⅰ、Ⅱ组(P<0.05)与试验Ⅳ组差异不显著(P>0.05)；试验各组的眼肌面积值与对照组相比均有显著的增加(P<0.05)，试验Ⅲ组最高，与试验Ⅳ组相当，4个试验组之间差异不显著(P>0.05)；发酵中药制剂对育肥猪肉的L*和b*、滴水损失、背膘厚度无显著影响(P>0.05)。

2.2 发酵中药制剂对育肥猪血清生化指标的影响 由表4可知，试验各组猪血清中的总蛋白和碱性磷酸酶含量显著高于对照组(P<0.05)，试验Ⅲ组最高，但与试验Ⅳ组之间差异不显著(P>0.05)；试验Ⅲ组和试验Ⅳ组总胆固醇含量显著低于对照组、试验Ⅰ、Ⅱ组(P<0.05)；其余各项血液生化指标各组间差异均不显著(P>0.05)。

表3 发酵中药制剂对育肥猪肉品质的影响

表中数据右上角标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，下表同

表4 发酵中药制剂对育肥猪血清生化指标的影响

2.3 发酵中药制剂对育肥猪血清免疫球蛋白的影响 由表5可知，试验各组血清中lgA的含量与对照组相比均有显著的提高(P<0.05)，试验Ⅲ组最高，与试验Ⅳ组差异不显著(P>0.05)，但均显著高于试验I组和试验II组(P<0.05)；试验Ⅲ组lgG的含量显著高于对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组(P<0.05)，与试验IV组无显著差异(P>0.05)；发酵中药制剂对猪血清中lgM的含量没有明显影响。

表5 发酵中药制剂对育肥猪血清免疫球蛋白的影响

3 讨论

3.1 发酵中药制剂对育肥猪肉品质的影响 肉色、嫩度(剪切力)、pH值、滴水损失、系水力、口感风味等是评价猪肉感官品质的主要指标[10]。 pH值作为评定猪肉品质的关键指标，也是反映动物宰后肌糖原酵解速度和强度的指标，直接影响肌肉的嫩度、滴水损失和色度。一般情况下，正常猪肉的pH值为6.0～6.5，如果屠宰后肌肉 pH 值下降过快会导致猪肉色泽苍白或深暗，pH值>7.0时鲜味消失而影响猪肉品质[11]。滴水损失是反映猪肉系水力的重要指标之一，其指标高低可影响到肉品质地、风味及组织状态，它的值越小表明系水力越高，肉品质越好[12]。肉的颜色也是肉质和肉品卫生检验的一项重要指标，虽然肉色与食用品质(嫩、味、汁)没有直接关系，但具有重要的商业意义。嫩度是人们对肌肉口感满意程度的一个重要指标，直接影响着肉的食用价值和商品价值，它反映了肉中肌原纤维、结缔组织及肌肉脂肪的含量、分布和化学结构状态，肌束中的肌纤维越多越细，肉越嫩，并且肌间脂肪与嫩度成正比[13]。李婉涛等[14]研究表明，杜仲和桑叶提取物能减慢猪屠宰后肌肉pH值的下降速度，降低滴水损失和背膘厚。李涛[15]、徐秀景等[16]利用乳酸杆菌发酵饲料饲喂育肥猪后，猪肉亮度(L*值)和红度(a*)均高于对照组，改善了猪肉颜色，降低了剪切力，增加了肉的嫩度。本试验取得了类似结果，随着发酵中药制剂添加水平的增加，剪切力明显降低，肉色有所改善，眼肌面积增加，表明育肥猪日粮添加发酵中药制剂能改善猪肉的颜色和嫩度，提高肉品质。

3.2 发酵中药制剂对育肥猪血清生化指标的影响 通过血液生化指标测定可以间接了解动物机体功能状态、营养代谢水平和生产性能。

血清中的总蛋白、白蛋白和球蛋白可反映动物对蛋白质的消化吸收程度，维持机体胶体渗透压，蛋白质的含量升高，其机体免疫力也会相应提高，机体营养水平得到增强，可以提高机体抵御外界不良环境影响的能力[16]。侯海锋等[17]利用发酵的中药渣添加在猪的日粮中，血清中的总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)的含量显著提高。通过试验发现，在猪饲料中添加发酵的中药在一定程度上能够提高猪血清中总蛋白和白蛋白的含量。邹志恒等[18]研究表明，复方中药发酵制剂能促进断奶仔猪体内蛋白合成，血清中的总蛋白、白蛋白和球蛋白的含量明显高于对照组。本试验中试验组的血清总蛋白有显著的提高，原因可能是中药发酵饲料促进了猪机体蛋白质的合成。血清中的尿素氮值能准确反映动物体内蛋白质代谢与氨基酸的平衡状况，血清尿素氮值较低表明氨基酸平衡良好，蛋白质合成率高。孟祥宇[19]在猪饲料中添加复合益生菌制剂，结果表明，复合益生菌的添加对猪血浆中尿素氮的含量没有影响。赵香菊等[20]研究表明，留兰香茎叶粉可使猪血液中尿素氮有下降的趋势。本试验中，发酵中药制剂的添加对猪血浆中尿素氮的含量没有明显的影响。血清中AST和ALT的活性变化是反映肝功能是否正常的重要指标；ALP的含量变化不仅能表现出成骨细胞活性，也能反映出骨骼的生长发育是否旺盛。严念东等[21]证明了益生菌发酵饲料能显著提高仔猪血液中碱性磷酸酶的活性。孟祥宇[19]研究表明，在猪的日粮中添加复合微生物制剂，血液中的碱性磷酸酶的含量会显著上升。本试验结果与上述研究结果相一致。血液甘油三脂和胆固醇含量可以反映体内脂类代谢的情况和日粮能量水平的高低；血糖水平主要反映机体碳水化合物代谢是否正常。盖丽婷等[22]将夜交藤用于仔猪的饲料中，各组血清中甘油三酯、总胆固醇含量没有显著性变化。彭宏刚[23]试验结果表明，APS可使育肥猪血清中的甘油三脂、总胆固醇含量降低。本试验发酵中药制剂1%和1.5%剂量组猪血清中总胆固醇的含量下降较为显著；试验各组的甘油三脂和血糖没有明显的变化。

本试验结果显示，育肥猪饲料中添加发酵中药制剂后，血液中白蛋白和球蛋白、尿素氮、谷草转氨酶和谷丙转氨酶、葡萄糖及甘油三脂等生化指标没有明显的变化，表明发酵中药制剂对猪的心脏和肝脏没有影响。其中试验各组血液中总蛋白含量、碱性磷酸酶活性显著提高，降低胆固醇含量，以发酵中药制剂中(1%)、高(1.5%)剂量组效果最好。说明饲喂发酵中药制剂后，对蛋白质的代谢和氮沉积有一定的增强作用，对猪的骨骼发育也起到一定的帮助作用，有利于猪的生长，提高猪抵御外界不良环境影响的能力。

3.3 发酵中药制剂对育肥猪血清免疫球蛋白的影响 猪血清中免疫球蛋白是体液免疫的主要活性成分，可以反应其免疫能力的高低，免疫球蛋白含量水平可判断猪抵抗外界病原体侵袭能力的高低[24]。IgG 是血清中含量最多，是抗感染的主力；IgA在维持黏膜上皮表面完整性和功能方面有重要作用，发挥着抗菌、抗病毒的作用；IgM是一种高效能抗体，在机体的免疫防护中占有重要地位[25]。对免疫球蛋白水平的检测通常是衡量机体免疫状况的常用指标。武洪志等[26]在仔猪的日粮中添加以苍术、黄柏和白术组成发酵复方中药，可显著提高仔猪血清中IgA、IgG 和IgM的含量，增强仔猪免疫力。龚泽修等[27]在生长猪基础日粮上添加了0.15%益生菌和0.04%玉屏风散多糖，进行了两个阶段的试验(第一阶段：1～30 d，第二阶段：31～60 d)，结果表明，在两个阶段中IgG和IgA的含量显著高于对照组(P<0.05)，益生菌和玉屏风散多糖均能够提高猪的免疫能力。本试验结果与上述试验相一致，在育肥猪饲料中添加中药复方发酵制剂，各组血清中lgA和lgG的含量与对照组相比均有显著的提高，其中以试验Ⅲ组最高。说明添加发酵中药制剂对猪免疫能力有一定提高，效果好于中药复方制剂。

4 结论

在育肥猪日粮中添加不同剂量的中药复方发酵制剂可改善肉品质，增强蛋白质的代谢和氮沉积作用，提高猪的免疫能力，效果好于中药复方制剂，尤其是1.5%和2%剂量添加效果最好，且日粮中添加以1.5%发酵中药制剂为最佳。