采用显微鉴别方法对柴胡药材质量的分析研究

河南省新乡市中医院（453000）韩丽新

柴胡在中医学上属于一类常用的中药，其性味凉且苦，可发挥解热、抗菌、镇静、抗病毒(流感病毒)、抗肝损伤等功效[1]。据《中国药典》记载，柴胡一般类型为狭叶柴胡或伞形科植物柴胡的干燥根[2]。目前，在化学成分分析、医学、栽培技术等领域对柴胡的研究相对比较集中[3]，但鲜有报道通过显微鉴别方法对不同产地柴胡的药材质量进行研究，本文通过收集来自不同产地的柴胡样品，以期通过显微鉴别方法来评价柴胡药材质量，为临床上提供判定依据。

1 材料与试剂

1.1 材料 试验设备器材：切片机(生产商：石家庄现代仪器仪表公司)，DGF-4A型立式电热鼓风干燥箱(生产商：天津市泰斯特仪器公司)，电热恒温水浴锅(生产商：北京科伟永兴仪器公司)，万用电炉(生产商：石家庄现代仪器仪表公司)，解剖刀，毛笔，镊子，染色缸，酒精灯，玻片架。

1.2 试验试剂 石蜡，二甲苯、无水乙醇、甲醛、冰乙酸，蕃红染液、树胶、固绿染液。

1.3 试验药材 于2017年1月～2018年1月收集了24个柴胡样品。见附表1。

2 方法

（1）取材：洗净收集的药材，并去除杂质，以温水将其软化（约1h），最后切成段备用（约0.5～1cm）。（2）制蜡片：①软化：先将小瓶编号，再将备好的药材放入小瓶中，并记录下来，之后倒入软化剂封上（软化24h）。②固定：再将固定液FAA倒入装有材料的小瓶中（固定24h）。③脱水：先后以50%、70%和90%的酒精对其脱水2h、2h和1.5h，最后再以无水乙醇脱水1.5h。④透明：先后以25%和75%二甲苯(酒精稀释)将药材透明1h和0.5h，之后，再以无水二甲苯透明20min。⑤渗蜡：分别在37、45和55℃下进行渗蜡处理5h，2h和3h，保持在62℃时，2h换蜡1次。⑥包埋：使蜡盒中的蜡维持固态，将渗蜡处理完成的药材放入蜡盒，静置，直至蜡自然凝固。⑦切片和拷片：用切片机对样品切横切片（厚度9um），并将其在60℃拷2h。⑧染色：拷片过后的药材先后在二甲苯(20min)，无水乙醇(15min)，95%乙醇(10min)，85%乙醇(8min)，70%乙醇(5min)中浸泡，最后将其置入翻红染液中（浸泡一夜），之后再在酸性酒精（15min），85%乙醇（10min），95%乙醇（8min），固绿染液（2s），无水酒精(20min)和二甲苯（25min）中依次浸泡。⑨封片：染色完成后以树胶对其封片。（3）在光学显微镜下对其显微特征进行观察记录，并简易绘制出其结构图。

附表1 柴胡样品

3 结果

显微鉴别特征：产地为河北的柴胡大部分油管分布密集，排列较整齐，其中以石家庄市灵寿县南营乡的油管分布最密集；而产地为甘肃的部分市县的柴胡油管分布相对较多，如甘肃陇西县菜子镇、甘肃策底米家梁和甘肃漳县；产地为河南的柴胡的油管大部分分布比较疏散。山西产地的柴胡仅有部分市县的油管分布多。

此外，柴胡产地在甘肃和河北的柴胡皂苷含量较高，而河南和山西所产的柴胡皂苷含量比较少。因此，我们认为甘肃和河北生产的柴胡质量较好，具体见附表2。

4 讨论

在中药鉴定中，显微鉴定是一种常用手段，其能通过对药材细胞形状、组织构造、和成分特征进行观察，从而实现对药材真伪和品质的鉴定[4][5]。该方法的特点是操作简便、准确且快捷，并且可以配合其它鉴定分析方法，有效的将中药鉴定质量提高[6]。

本实验通过对不同产地的柴胡药材进行分析，实现了从显微、性状，再到成分的多重指标控制，较传统单一成分控制，有了新的突破，其在对中药材质量的控制方面有着较强的合理性。本实验在现有的样品中得出柴胡质量与其纤维和油管数相关，但考虑到本研究样品有限，研究内容仅仅考虑了柴胡的显微和化学成分，因此需要结合药理做进一步研究。