饲用复合酶制剂对肉鸡生长性能、血清生化指标及肠道形态和消化酶活性的影响

2019-10-17王江水苏长城郭秀云刑新荣胡卫华占秀安

中国畜牧杂志 2019年10期

刘伟，夏磊，王江水，苏长城，郭秀云，刑新荣，胡卫华，占秀安*

（1.浙江大学动物科学学院，浙江杭州 310058；2.舟山农产品质量安全管理中心，浙江舟山 316000；3.江苏悠恒生物技术有限公司，江苏海安 226600）

随着动物营养研究的深入和现代生物技术的发展，在配合饲料中使用生物制剂越来越受到人们重视，其中酶制剂备受关注。酶是一类具有生物催化活性的蛋白质，饲料中所含的多种营养成分，除水分、矿物质、维生素外，多为机体难以吸收的大分子形式，必须在消化道内经过酶的作用被水解为小分子营养物质，进而被动物吸收利用。配合饲料由不同原料组成，其化学物理结构均不同，而酶具有专一性，因此要获得最佳效果，必须使用多酶系统，复合酶制剂应运而生。复合酶制剂是由2 种或2种以上的酶复合而成，包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶等。复合酶能够通过降解饲料中的抗营养因子，如非淀粉多糖（Non-starch Polysaccharides，NSP）、胰蛋白酶抑制因子等，从而促进消化道内源酶的分泌并提高其活性[1]，改善胃肠道发育及后肠微生物区系，进而促进养分的消化吸收。国内外关于复合酶在单胃动物饲粮中的添加效果主要表现为提高动物的生长性能和饲料利用、提高养分的消化率和代谢能、促进肠道发育等方面[2-5]。本试验旨在研究玉米-豆粕型日粮中添加复合酶制剂（低温淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶、木聚糖酶、β-甘露聚糖酶、α-半乳糖苷酶和果胶酶）对岭南黄羽肉鸡生长性能、血清生化指标、肠道形态、消化酶活性以及矿物元素利用的影响，旨在为生产实践提供基础数据和科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料酶制剂由江苏悠恒生物技术有限公司提供，主要包括低温淀粉酶3 000 U/g，植酸酶10 000 U/g和固态发酵的天然复合酶（商品名为原创TY100），其中原创TY100 成分包括木聚糖酶8 000 U/g、β-葡聚糖酶6 000 U/g、果胶酶1 000 U/g、蛋白酶8 000 U/g、β-甘露聚糖酶150 U/g、纤维素酶180 U/g 和α-半乳糖苷酶200 U/g。

1.2 试验设计及试验日粮将420 只健康的1 日龄岭南黄肉鸡分为2 个处理组，每组3 个重复，每重复70 只（公母混合，数量随机）。对照组饲喂基础日粮，复合酶组在基础日粮中添加300 mg/kg 低温淀粉酶、500 mg/kg原创TY100 和100 mg/kg 植酸酶。试验分前期（1～21 d）和后期（22～50 d）共50 d。试验日粮参考《鸡饲养标准》（NY-T33-2004）配制，基础日粮组成及营养成分见表1。

表1 基础日粮配方及营养成分（风干基础）

1.3 饲养管理试验在浙江嘉兴星健禽业养殖有限公司进行。饲养开始前，对鸡舍栏位设备、地面和料盘料筒饮水器进行彻底清洗，用甲醛和高锰酸钾进行熏蒸消毒。鸡舍温度第1 周控制在35℃左右，随后按每周降2～3℃，逐渐降低至22℃ 左右，并进行常规肉鸡免疫程序。肉鸡采用木屑垫料地面平养方式进行饲养，全期24 h 光照，自由采食和饮水。每天记录鸡舍温湿度、死亡鸡只数及重量。

1.4 样品采集与指标测定

1.4.1 生长性能与饲料利用按重复对各处理组1 日龄雏鸡进行全群称重，作为试验初始重，并分别于第22、51 天08:00 按重复全群空腹称重，统计肉鸡生长前期和后期采食量，并计算各生长阶段的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和耗料增重比（F/G）。

1.4.2 血清生化指标分别于第22、51 天从每个重复随机选取8 只（共48 只）肉公鸡，提前12 h 禁食但不禁水，采血于真空促凝管中，待血清析出时，3 000 r/min，离心10 min，吸取上清液分装于1.5 mL 离心管中，置于-80℃保存待测；所采集的血清用于钙（Ca）、磷（P）、铁（Fe）、铜（Cu）、锌（Zn）、尿酸（UA）含量的测定，测定过程严格按照南京建成生物工程研究所提供的试剂盒说明书进行操作。

1.4.3 十二指肠形态结构颈部放血致死后，迅速切开腹部，分离各肠段，于十二指肠中部取2 cm 左右肠段，用生理盐水冲洗食糜后，置于4%甲醛溶液固定，保存用于切片制作；取固定于甲醛溶液的十二指肠肠段，分别经过酒精脱水，石蜡包埋，连续横断切片（5 μm）和HE 染色处理后，采用Motic Images 图像分析系统，每个样品观察3 张不连续切片，各测10 个绒毛高度和隐窝深度，测量后计算出平均值。

1.4.4 十二指肠内容物消化酶活力取十二指肠内容物，装入冻存管内，置于液氮保存。将冻存的十二指肠内容物按重量体积比w:v=1:4 加入4℃生理盐水，充分混匀后3 000 r/min，4℃离心10 min，取上清液于-20℃保存，用于淀粉酶、胰蛋白酶和脂肪酶的测定，试剂配制和操作步骤均按照南京建成生物工程研究所提供的试剂盒说明书进行。

1.5 统计分析试验数据先用Excel 作初步处理，而后采用SPSS 20.0 软件中独立样本t 检验进行分析，P＜0.05 表示差异显著，数据以平均值±标准差表示。

2 结果

2.1 复合酶制剂对肉鸡生产性能的影响由表2 可见，与对照组相比，饲用复合酶制剂提高了21 d 末重和前期ADG（P＜0.05），降低了后期和全期的F/G（P＜0.05），但对各阶段ADFI 及后期和全期的ADG 均无显著影响。

2.2 复合酶制剂对肉鸡血清生化指标的影响由表3 可见，与对照组相比，在饲养前期，饲用复合酶制剂提高了血清P、Fe、Zn 含量（P＜0.05），血清Ca、Cu 含量有所提高，血清UA 含量有所下降，但均未产生显著差异。在饲养后期，饲用复合酶制剂提高了血清P 含量（P＜0.05），降低了血清UA 含量（P＜0.05），也一定程度提高了血清Ca、Fe、Cu、Zn 含量（P＞0.05）。

表2 复合酶制剂对肉鸡生长性能的影响 %

表3 复合酶制剂对肉鸡血清生化指标的影响

2.3 复合酶制剂对肉鸡十二指肠消化酶活力的影响由表4 可见，与对照组相比，添加复合酶制剂提高了前期十二指肠内容物中淀粉酶和胰蛋白酶活力及后期淀粉酶的活力（P＜0.05），但对前期脂肪酶活力、后期胰蛋白酶和脂肪酶活力均无显著影响。

表4 复合酶制剂对十二指肠内容物消化酶活性的影响

2.4 复合酶制剂对肉鸡十二指肠形态结构的影响由表5 可见，与对照组相比，饲用复合酶制剂提高了50 d 肉鸡十二指肠黏膜绒毛高度（P＜0.05），并降低了隐窝深度（P＜0.05），同时显著提高了绒毛高度和隐窝深度的比值（V/C）。

表5 复合酶制剂对肉鸡50 d 十二指肠黏膜形态结构的影响

3 讨论

3.1 复合酶制剂对肉鸡生长性能的影响关于复合酶制剂对肉鸡生长和饲料利用影响的结果不尽相同，总体来说，添加复合酶制剂对肉鸡的生长具有正面效用。吕秋凤等[6]报道，日粮中添加335 mg/kg 复合酶（木聚糖酶、甘露聚糖酶、纤维素酶）提高了肉鸡ADG，降低了F/G，提高了肉鸡对养分的利用率。Kaczmarek 等[7]报道，玉米-豆粕型饲粮中添加NSP 酶显著提高了肉鸡ADG 和饲料转化效率。本试验结果表明，玉米-豆粕型饲粮中添加复合酶制剂对肉鸡生长性能和饲料利用具有改善效果，尤其对饲养前期ADG 和饲养后期及全期的F/G 有显著效果。

本试验中所用复合酶制剂的主要成分包括低温淀粉酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶、果胶酶、蛋白酶、β-甘露聚糖酶、纤维素酶、α-半乳糖苷酶和植酸酶。采用玉米-豆粕型饲粮，复合酶制剂可将饲料中的NSP 分解为动物可吸收利用的还原糖，并可破坏植物细胞壁，使之包围的淀粉、蛋白质、矿物质等养分得以释放并为动物利用，同时降解饲料中的抗营养因子，增强淀粉和蛋白质等营养物质的消化吸收，提高养分利用率，最终提高肉鸡的生长性能和饲料利用。

3.2 复合酶制剂对肉鸡血清生化指标的影响植酸是饲料中广泛存在的一种抗营养因子，除了自身不能被分解利用外，植酸还可以通过螯合作用降低动物对Zn、Mn、Fe、Ca 等矿物元素和蛋白质的利用率。添加植酸酶可以降低植酸与矿物元素的螯合作用，使矿物元素得以释放，从而提高矿物元素的消化吸收。本试验中复合酶制剂显著提高了前期血清Fe、Zn 和后期P、Cu 含量，血清Ca 和P 含量也有所提高，这可能与植酸酶的添加有关。有研究表明，在低磷饲粮中添加植酸酶可显著提高动物血清中微量元素含量，且血浆中无机磷含量随日粮植酸酶的添加而增加[8-9]。

UA 是家禽蛋白质代谢的主要终产物，血清中UA水平可以反映蛋白质的代谢水平。本试验结果表明，添加复合酶制剂显著降低了后期血清UA 含量，可能是由于蛋白酶增强了小肠对蛋白质的消化吸收，从而提高了蛋白质的利用率，增加了蛋白质沉积。Hajati 等[10]报道，日粮中添加500 mg/kg 复合酶（阿拉伯木聚糖酶、β-葡聚糖酶、纤维素酶、蛋白酶、半纤维素酶、α-淀粉酶、α-半乳糖苷酶）显著降低了肉鸡血清中UA 水平。

3.3 复合酶制剂对肉鸡十二指肠消化酶活力的影响有报道指出，在肉鸡基础日粮中添加α-淀粉酶饲喂至7日龄后，改饲基础日粮，发现14 日龄小肠内容物中淀粉酶活性显著下降[11]，提示外源淀粉酶对内源酶活性影响有后续效应。进一步研究表明，饲粮中添加淀粉酶提高了肉鸡前肠内容物淀粉酶、总蛋白酶和胰蛋白酶活性，但未影响脂肪酶活性[11]。本试验中，添加复合酶显著提高了十二指肠内容物中淀粉酶和前期胰蛋白酶活性，而对脂肪酶活性无影响。其原因可能是添加外源淀粉酶减轻了淀粉大分子空间占位对蛋白质消化的阻隔作用，从而增加了蛋白质水解酶的分泌。而脂肪消化是在水脂界面上进行的，需要胆盐和辅脂酶的参与，可能受淀粉空间位阻作用较小，所以添加外源淀粉酶不影响脂肪酶活性。

3.4 复合酶制剂对肉鸡十二指肠形态结构的影响小肠是营养物质消化吸收的主要场所，小肠的绒毛高度和隐窝深度是衡量其消化吸收功能的主要指标，而小肠的正常结构和功能是营养物质被充分吸收的基本保证。小肠绒毛是小肠吸收营养物质的主要部位；肠道的隐窝是肠道绒毛基部上皮下陷至固有层内形成的管状结构，组成细胞多为未分化细胞，可不断分化补充脱落或受损的肠道绒毛细胞，因此隐窝深度的变化能够反映出肠上皮细胞的增殖率和成熟情况，通常隐窝深度降低表明肠道分泌功能提高，吸收能力增强[5]。

王冬群等[12]报道，与正常能量值的小麦饲粮相比，低能量日粮十二指肠绒毛高度降低，添加NSP 复合酶（木聚糖酶、葡聚糖酶）后，十二指肠绒毛高度有增加趋势；低能量小麦饲粮空肠隐窝深度显著提高，添加NSP 复合酶后空肠隐窝深度显著降低。本试验结果表明，与对照组相比，复合酶组绒毛高度显著提高，隐窝深度显著降低，V/C 值显著升高，其原因可能是复合酶的添加增强了养分的消化吸收，从而促进肠道生长发育，改善肠道形态结构。