Cellavision DI60系统对外周血白细胞分类临床应用评价

(厦门大学附属第一医院，福建 厦门 361003)

外周血涂片细胞形态学分析一直以来都是血常规分析检测中不可或缺的部分。虽然全血细胞自动分析仪的检测方法与检测试剂在近年得到了不断的优化，日渐精准地进行正常细胞的分类与异常细胞的报警，但血细胞形态的显微镜下的鉴定始终是形态学诊断的金标准。由于检验标本量的日益增多，依靠传统方法的血涂片制作、染色、镜检耗时长、耗人力，随着计算机硬件和软件的飞速发展，Cellavision系统采用神经网络技术在引入自动影像处理系统的同时大大提高了人工智能识别能力[1,2]，本文就DI60机型在白细胞形态学分类在临床检验中的应用进行分析讨论。

1 材料与方法

1.1 标本

选取厦门大学附属第一医院临床血液标本250份，其中A组正常体检人员标本100份，B组急性细菌感染性疾病患者50份，C组急性病毒性感染性疾病患者50份，D组急、慢性白血病初诊患者标本50份，共4组标本，均采用EDTA-K2抗凝管2 mL样本量。

1.2 仪器与试剂

日本Sysmex公司生产的XN-9000全自动血细胞分析流水线、SP-10自动涂片染色仪；瑞典Cellavision AB 公司生产的DI60全自动数字化细胞形态识别分析系统；瑞氏吉姆萨染液产自珠海贝索生物技术有限公司。

1.3 方法

保证XN-9000质控在控的情况下测定250份血液标本并在SP-10上制片成功后，送入DI60分析系统进行血细胞分析，仪器设置为每份样本分析200个细胞，同时由2名具有丰富形态学经验(至少10年阅片经验的主管与副主任技师)对同样的血涂片进行双盲人工镜检分析，每人每片计数100个细胞，每片合计分类200个细胞。

1.4 结果分析方法

计数仪器与人工分类细胞个数，并计算仪器与人工镜检符合率，以预分类错误率体现。

2 结果

2.1 A、B、C、D四组血液标本仪器与人工镜检符合率分析结果(见表1～3)

表1 A组血液标本仪器与人工镜检符合率分析

表2 B、C组血液标本仪器与人工镜检符合率分析

表3 D组血液标本仪器与人工镜检符合率分析

2.2 仪器未分类细胞人工镜检结果(见图1)

对250例样本中仪器划为未分类的1 820个细胞经人工镜检分析，确认此类细胞分别为图1所示。

图1 仪器未分类细胞的人工镜检分析结果

3 讨论

Cellavision DI60全自动数字化细胞形态识别分析系统是该公司继DM96自动阅片仪以后投入中国市场另一款血细胞形态分析工具，DM96这一机型近几年来的应用也获得了一致的好评[3]。较其相比，DI60具有更丰富的细胞数据库，内置显微镜头与镜油得到升级，保证清晰图像的采集与更精准的细胞分析，独有引入了质控理念与细胞定位检测，保证扫描成像的细胞图像中的有核细胞漏检率尽可能降低，当然更大的改进在于实现了与Sysmex XN系列流水线以及SP系列涂片染片仪的轨道对接，实现了全血细胞仪器分析、推片、染片以及仪器阅片报告生成的全自动流水线，进一步节省了样本镜检报告的时间。按照卫生健康委员会临床检验中心对血常规复检率至少5%的最低要求，同时保证急性样本30min内的及时报告，DI60在急诊血常规的检测应用中的意义尤为突出。

本文中分析的250例标本按照不同的疾病类型人为地分为了4组，A组为正常体检人员血样，其特点是外周血中均为形态正常的五种外周血常见的细胞，从仪器分析和人员比对的结果来看，中性分叶核粒细胞、淋巴细胞、单核细胞的错误率均小于10%，中性杆状核和分叶核粒细胞的分类一直是全自动阅片机的弱项，由于二者的差别在于细胞核是否有细丝相连形成分叶的这一特征，使得很多细丝镜下暴露不明显的细胞被误归为杆状核粒细胞。有部分的嗜酸性粒细胞中颗粒颜色较浅是会误归为中性粒细胞，而一些涂抹细胞被归为嗜碱性粒细胞导致该类细胞的假性增高。选择将急性细菌感染和病毒感染患者归于B组和C组是由于，该二类患者中幼稚粒细胞(早、中、晚幼粒细胞)和异型淋巴细胞的数量更多，检出率会更高，以此评价DI60对此二类细胞的检出情况会更有说服力。毋庸置疑的是，仪器在这二类细胞的检出远不如A组细胞的符合率，幼稚粒细胞会误归为未分类细胞、含粗大中毒颗粒的细胞会误认为嗜碱性粒细胞，同时仪器对早、中、晚幼粒细胞的具体归类能力也较薄弱，某些含中毒颗粒和空泡变性的单核细胞也会被划为幼稚粒细胞，但是如果仅仅以为成熟粒细胞(IG)比例来报告还是对临床有相当意义的提示。异型淋巴细胞尤其是传染性单核细胞增多症患者样本中的异淋大多不会当做淋巴细胞对待，而多归于异型淋巴、浆细胞、未分类细胞，还有一部分可疑的异型淋巴会置于淋巴细胞这一类中偏上的部位，方便报告审核人员对此类细胞进行进一步的核实。D组中的急慢性白血病一直是血细胞镜检分析中的重点难点，幼稚细胞的检出报告对临床诊疗方案的制定起到了决定性作用。DI60在幼稚细胞的报告中有着怎样的表现呢？如果单从预检错误率的数值来看，结果是相当不乐观的，但是不能忽视的是，一般的检验人员对幼稚细胞的辨识能力都参差不齐，对仪器过高的要求是否苛刻？其实在外周血中检出10个幼稚细胞或是50个对临床都是相同的提示，怀疑血液系统疾病，建议骨穿确诊，所以只要能够检出，就是有意义的提示。可喜的是，所有急性白血病中仪器都能检出原始细胞，尽管另外很大一部分原始细胞被归于未分类或是淋巴细胞。慢性粒细胞中嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的在仪器中的辨识度也相当可观。

综上所述，DI60不仅在使用方便、报告快捷这两方面有着不可替代的优势，在常规就诊患者的血细胞分析的准确性也是可以接受的，特殊细胞(包括幼稚粒细胞、异型淋巴细胞、原始细胞)均得到一定比例的检出，准确性虽然不高但是仍具有阳性提示意义，需要检验人员的进一步核实。DI60确实能减轻血常规检测人员的工作强度并行使初筛提示的功能，相关检验人员也必须不但提高自身业务水平，对仪器不能分类和分类错误的细胞作出准确的判断。