血液中循环肿瘤抗体ABCC3在乳腺癌早期诊断中的意义

郝芳时，崔春国，计国义

(吉林大学中日联谊医院，吉林 长春130033)

有证据显示多重耐药(MDR)的发生可能和三磷酸腺苷结合转运蛋白(ABC)的过表达相关，目前已知有49个基因参与编码了ABC[1]。这些ABC转运蛋白可以分为7个亚组，其中ABCC1-3和ABCG2等蛋白的表达被证实可能和多种恶性肿瘤的治疗失败呈相关性[2]。值得注意的是，这些ABC转运蛋白的过表达会通过肿瘤相关抗原的呈递在患者血液中表现出相关抗体表达的依赖性。有研究已经证实食管癌和肺癌患者中血液中ABCC3循环抗体的表达升高[3]。为了进一步证实ABCC3循环抗体是否在乳腺癌等其他肿瘤患者血液中有表达差异，现将结果报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

2016年4月至2017年12月我院乳腺外科确诊121例乳腺癌患者，平均年龄54.1±9.2岁。其中导管癌101例，小叶癌20例。101例导管癌按照国际妇产科联盟(Federation of Gynecology and Obstetrics，FIGO)临床分期标准分为I-IV期四个亚组。所有患者留取血液标本，留取时间均在治疗开始之前。82例对照组健康女性患者来自于本地区社区医院，平均年龄52.3±8.2岁，病史中否认肿瘤病史。全部患者均为中国籍汉族，并在入组前签署了知情同意书。本研究已经获得单位伦理委员会的批准。

1.2 循环抗体的检测

酶联免疫吸附试验(ELASA)利用自制的两条线性肽链抗原完成[4]。实验前，96孔板中48孔利用0.1毫升/孔的ABCC3抗原包被，另外一半用0.1毫升/孔浓度的对照抗原包被。包被后的96孔板放入4摄氏度下静置12 h。清洗3次后，滴入已1∶150稀释的对象血清。室温下静置2 h，清洗3次。加入1∶30 000稀释的羊抗人抗体室温下中和1 h。加入显色剂并孵育25 min，加入50 μl终止溶剂。进行光密度(OS)测定，特异性结合指数(SBI)由如下公式计算得出：

SBI=(OD试验组-OD阴性对照)/(OD对照组-OD阴性对照)。

1.3 统计分析

全部数据以平均值±标准差显示。利用方差分析(ANOVA)检测不同组间ABCC3表达的差异性。

2 结果

2.1 乳腺癌患者血液中 ABCC3循环抗体的表达水平

ANOVA分析结果显示，与健康对照组相比较，ABCC3循环抗体的表达在乳腺癌患者组中显著降低(P=0.0003)。其中，ABCC3表达在乳腺导管癌患者人群中表达变化(P=0.0006)趋势超过乳腺小叶癌(P=0.086),见表1。

表1 循环ABCC3抗体在乳腺导管癌和小叶癌血液中的水平比较

*与对照组相比较，P<0.01

2.2 ABCC3循环抗体的表达水平和乳腺癌的临床分期的相关性

在不同临床分期亚组的比较过程中，发现ABCC3的高表达和各个不同临床分期有一定相关性。尤其是肿瘤Ⅱ期(P=0.0012)和Ⅲ期(P=0.0008)患者中，与对照组相比差异性明显,见表2。

3 讨论

乳腺癌是女性患者中最常见的恶性肿瘤，2011年我国共有248620例新发乳腺癌病例，早期有效、敏感的生物学标志物的发现对于乳腺癌的早发现、早治疗具有重要的现实意义[5]。循环肿瘤抗体检测在恶性肿瘤筛查中具有一定的临床意义，在肝癌、肺癌等领域取得了良好的应用效果，可以作为预测肿瘤发生、提前预警复发，具有广阔的研究前景。

表2 循环ABCC3抗体在不同分期乳腺癌(导管癌)患者血液中的水平

*与对照组相比较，P<0.01

ABCC3是MDR相关蛋白家族中的一员，被发现在多个恶性癌中有高表达。研究发现在乳腺癌中超过28.1% HER2阳性和7.3%HERZ2阴性的肿瘤标本中有ABCC3的高表达，说明ABCC3可能是预警乳腺癌的良好生物学标志物。本研究中，乳腺癌患者循环血液中ABCC3抗体表达明显降低，并和其临床分期呈一定相关性，说明ABCC3循环抗体检测可能是一个乳腺癌预测、诊断的良好生物学标志物。

理论上，ABCC3在癌组织中的高表达会导致患者血液中循环肿瘤抗体的高表达。本研究发现乳腺癌患者ABCC3循环抗体表达显著降低。其中可能的机制是肿瘤特异性的免疫耐受。鉴于本研究中样本数量有限，还需要后续更大样本的研究来进一步阐述ABCC3与乳腺癌的相关性及其机制。