山羊同期发情和超数排卵方法概述

马佳文，陈 出，石德顺，黄 奔

（广西大学动物科学技术学院，亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室，广西南宁 530004）

随着科技的发展，山羊的养殖技术不断趋于成熟，但在山羊的繁殖技术方面还存在一些问题，山羊产羊羔数量少，一般1 年2 胎或者2 年3 胎，而且山羊活体引入资金较高，最终导致肉羊的养殖成本无法得到有效降低。在畜牧业特别是肉羊生产中，对母羊进行同期发情处理后，可使群体母羊在同一时间段内配种、妊娠、分娩，羔羊同一时间段内出生、出栏，从而实现集约化、工厂化按批次生产肉羊，使饲养管理成本大幅度降低，养羊经济效益显著提高[1]。此外，同期发情技术在羊的胚胎移植技术中是一项关键的配套技术，可使供体和受体母羊实现同期发情，实现供、受体母羊的生理状态一致[1]。选择不同的同期发情和超数排卵方法对本地山羊进行试验，可获得最佳的同期发情和超数排卵方案，在此基础上建立适用于本地区的同期发情和超数排卵体系，可以很好地用于本地山羊的繁殖及胚胎移植过程。

1 同期发情

同期发情是指使用外源激素人为地调控群体母畜的生殖生理周期进程，使其在特定的时间内集中发情的一项动物繁殖技术[2]。同期发情技术按其工作原理一般分为2 种：一种是利用前列腺素（PG）加速黄体溶解；另一种是采用孕激素类似物延长黄体时期，最终使母畜在相同时间发情。同期发情也是进行超数排卵的前期准备工作，在对山羊超数排卵之前使种群内的未怀孕母羊集中发情可以很大程度上节约人力、物力，从而降低山羊养殖过程中的成本投入。

同期发情的处理方法主要为PG 法和孕激素处理法。同期发情的给药方式分为口服法、注射法、阴道栓塞法、皮下埋植法[3-4]。目前同期发情处理常采用孕酮阴道栓（CIDR）法和2 次PG 注射法，操作程序如图1所示。

图1 同期发情方法

1.1 PG 法 PG 法的工作机理是PG 可以加速母畜黄体的溶解退化，结束黄体期、停止分泌孕酮；而后再使用相关促性腺激素引起母畜发情。但PG 对处于发情周期前5 d 内的新生黄体溶解作用很弱，因此PG 法对一些母羊没有作用，可以在10 d 后进行第2 次PG 处理[5]。由于PG 的作用机理是溶解黄体，如果将此法处理已怀孕母羊会使其黄体期中断、孕激素减少从而引发流产，所以此方法只能用于空怀母羊上。PG 法一般是在08:30—09:30 对健康生殖机能良好的母羊肌肉注射PG。

由表1 可见，1 次PG 法处理后的同期发情率较低，远不如2 次PG 法的效果好。虽然PG 法对山羊同期发情处理短期效果较好，成本低，操作起来简单，但PG 法效果并不稳定，2 次PG 法的同期发情率仍在60%～88%波动，推测可能是因药物厂家、批次不同，也可能与样本量、体况等有关；而1 次PG 法的发情效率波动很大，可能由于大多数母羊处于新生黄体期，从而导致同期发情效果不好。

1.2 孕激素处理法 CIDR 法一般分为CIDR+PG 法和CIRD+PMSG（孕马血清促性腺激素）法。由于不同激素的性质不同及激素组合不同，同期发情率、受胎率和产羔率等会产生差异。

1.2.1 CIDR+PG 法 CIDR 放入母畜阴道内后持续释放孕激素，经过一段时间孕激素刺激，母畜体内的黄体基本上都处于对PG 敏感阶段，撤栓时注射PG 加速黄体退化，从而达到同期发情的目的。CIRD+PG 法是选择生殖机理健康的母畜放置CIDR 后记为第0 天，在第12 天撤栓并肌肉注射PG。

由表2 可见，CIDR+PG 法的同期发情效果较好，副作用相对较小且同期发情率基本在80%以上，谭尚琴等[9]研究的同期发情率略低。张富全等[10]将PG 和CIDR 的顺序调换，同期发情率大大降低，因此合理选择激素的组合和顺序很重要。

1.2.2 CIDR+PMSG 法 CIDR+PMSG 法采用孕激素持续刺激抑制卵泡发育、成熟和排卵，一定时间后再用PMSG促进卵泡发育、成熟和排卵，使群体母畜生殖生理状态相同。此法与CIRD+PG 法相似，不同之处是在放置阴道栓后的第12 天撤出阴道栓并肌肉注射PMSG。

由表3 可见，CIDR+PMSG 法的同期发情效果较好，同期发情率在80%以上，即使在山羊的非繁殖季节也能获得较高的同期发情率。此外，此法与PG 联用时的同期发情率可提升至90%以上，保证了绝大多数的母羊处于同一阶段。虽然PMSG 的催情效果比较好，但是大剂量使用会引起黄体和卵泡共存，严重影响受体羊的移植妊娠率，严重的羊还会出现卵巢囊肿[13]。因此，要慎重选择PMSG 的使用剂量，减小对羊生殖系统的损伤。

此外，进口和国产阴道栓的效果差距不大，但进口阴道栓的同期发情率较国产阴道栓稳定一些，并且掉栓率低。如果在实际生产、实验中遇到初产母畜或其他阴道比较狭窄的母畜，可能出现放不进阴道栓的情况，此时可以自行制作海绵阴道栓。自制海绵阴道栓所需的材料简单且价格便宜，孕酮类似物可以选择左炔诺孕酮（LNG），每个海绵栓加入的药量可以根据实际情况增减，建议添加范围在30～50 mg。

表1 PG 法的同期发情效果

表2 CIDR+PG 法的同期发情效果

表3 CIDR+PMSG 法的同期发情效果

2 超数排卵

超数排卵处理是通过注射外源性激素排出更多可用卵泡，可降低发育卵泡的闭锁率，增加早期卵泡发育到高级阶段的数量。在当前条件下，超数排卵仍是胚胎移植获取大量优质胚胎的主要途径[17]，大部分应用于牛、羊的生产和实验并且效果较好。超数排卵过程中用到的外源性激素按作用类型大体上分为3 类：①影响卵泡发育的激素，主要有促卵泡素（FSH）、PMSG；②对排卵具有刺激作用的激素，主要有促黄体素（LH）、人绒毛膜促性腺激素（hCG）；③起辅助调控作用的激素，主要有前列腺素（PGF2α）、孕酮（P4）、促黄体释放激素（LRH-A3）。超数排卵是对外源性激素进行不同组合和浓度调整，使母畜发育更多的卵泡并排出。超数排卵的方法如图2 所示。不同超数排卵方法的效果见表4。

2.1 FSH 递减法 由于FSH 在体内的半衰期较短，所以需要多次注射并递减剂量。目前，FSH 递减法是效果比较好的超数排卵方法。FSH 递减法是在自然发情和同期发情处理的第10～12 天早晚按照浓度梯度依次递减的方式进行肌肉注射，如210 IU 分为60、30、15 IU 梯度。每针间隔8～10 h，在第6 针FSH 注射的同时肌肉注射PG，之后的24 h 肌肉注射LRH-A3[26]，隔天种公羊配种2 次即可。由表4 可见，FSH 递减法效果比较稳定，胚胎可用率在80%以上。高文超等[20]研究发现，与进口FSH 相比，国产FSH 超排稳定性和胚胎可用率较低，但胚胎移植的成羔率较高。一般进口FSH 使用的剂量比国产使用总剂量少，进口FSH 在180～280 IU，国产FSH 在200～300 IU[27]。

图2 超数排卵方法

综上所述，在制定FSH 递减法时应根据激素产品选择使用浓度。除此之外，需要根据不同地方山羊对外源性激素敏感度的不同来进行药品和总剂量的选择。虽然FSH 减量法在实际中应用较多，效果稳定、无明显不良反应，但由于注射操作繁琐且需要多次注射可能会导致山羊产生应激反应，存在一定风险。

2.2 FSH 一次注射法 FSH 一次注射法是将FSH 溶于聚乙烯吡咯烷酮（PVP）中，通过缓释物质的缓慢释放延长FSH 在体内的半衰期，达到与多次注射法相同的效果。Yamamoto 等[28]研究发现，用FSH 一次注射法对牛处理的结果优于多次注射组。目前，FSH 一次注射法多用于牛的超排中，山羊中则多使用FSH 递减法。由表4 可见，FSH 一次注射法的胚胎可用率存在波动。此外，陈兵等[21]用此法处理4 只山羊超排效率为100%、可用胚胎回收率为68.08%，可用胚胎数与对照组（FSH 递减法）存在显著性差异，但胚胎回收率没有显著性差异。FSH 一次注射法相对于递减法更加简单方便，更适合在实际生产中使用。Tríbulo 等[29]使用以透明质酸为基础的缓释制剂（SRF）为稀释剂对肉牛进行超排，结果显示单次肌内注射和传统的每日2 次注射差异不显著，这一研究为FSH 一次注射法的推广提供了更多可能。

表4 不同超数排卵方法的效果

2.3 PMSG 与APMSG 由于PMSG 的半衰期比较长，能在血液中存在较长时间，会使卵巢上出现第2 次卵泡发育波，产生高浓度的雌激素，导致卵巢上未排卵的卵泡数增加、黄体早期退化等问题[23]。为了减少PMSG的影响，人们使用APMSG（PMSG 抗体）除去血液中过量的PMSG。Bindon 等[30]研究发现，给绵羊和牛注射PMSG 32 h 后注射APMSG 可以减少未排卵的大卵泡数量。由表4 可见，使用APMSG 后胚胎可用率、平均可用胚胎数均优于单独使用PMSG。虽然此法比PMSG 法更具有优势，可以减轻卵巢的不良反应，但由于是血液注射，一般养殖场工作人员需要进行相关培训；此外，注射APMSG 过早或过晚都会影响超排效果。

2.4 FSH 和PMSG 组合法 FSH 和PMSG 组合法是利用FSH 和PMSG 共同作用刺激卵泡发育，PMSG 具有FSH 和LH 的双重活性，2 种激素连用可以克服各自的缺点[31]，进而简化超数排卵的操作步骤。具体操作步骤：山羊上次发情开始后13～16 d 每天早上肌肉注射P4，连续注射8～12 d 或放置CIDR，在停止注射P4 或撤栓的前1 d 开始连续4 d 早晚肌肉注射FSH（剂量递减法），在FSH 第1 针注射的同时肌肉注射PMSG。

由表4 可见，FSH 和PMSG 组合法的胚胎可用率在70%～75%；国产和进口FSH 和PMSG 的效果没有显著性差异。在超数排卵处理后适时给予APMSG，中和外周循环中的PMSG，可减小因PMSG 半衰期较长带来的不良影响。是否可通过减少PMSG 的注射量减轻因PMSG 半衰期较长带来的影响，有待进一步研究。

3 小 结

近些年来，迅速发展的定时输精技术是一项重要的繁殖管理技术，能够提高母畜的利用率、缩短母畜的非生产天数。同期发情和超数排卵将是定时输精技术的重要辅助技术，同期发情技术为定时输精技术做好前期准备，超数排卵则为定时输精技术的高妊娠率提供保障。目前，我国在山羊同期发情和超数排卵方面已取得不少研究成果，相关技术也得到提升。CIDR+PG 法和FSH递减法可以获得较好并且稳定的同期发情和超数排卵效果；PG 法和FSH 一次注射法的处理时间最短并且人力投入较少；CIDR+PG 法和FSH 一次注射法的使用效果稳定，较CIDR+PG 法和FSH 递减法的人力投入更少。

以同期发情、超数排卵和定时输精技术组合形成一整套有关山羊繁殖的操作流程，可以进一步推动规模化养殖场的集约化、批次化生产，显著提高畜牧业的经济效益。