抗核抗体和抗核抗体谱联合检测在自身免疫性疾病诊断中的临床应用

李春江 周玉英 刘艳平 谢 瑶 王 蕊 刘晓彤

（1 沈阳迪安医学检验所有限公司，辽宁 沈阳 110141；2 山西迪安医学检验中心，山西 吕梁 033306）

AID检测中最重要的就是自身抗体的检测[1]。随着生物学的快速发展，AID的特异性抗体不断地被发现与利用AID检测中，大大提高了AID的确诊率[2]。IIF检测ANA及其荧光模型在AID诊断与鉴别中，是最重要的筛选检测，是公认的金标准检验[3]。近年来也有许多机构将IBT用于检测AID中，故本次研究探讨了IIF-ANA、IBT-ANAs联合检测应用于AID的临床诊断鉴别中的重要性与必要性，减少AID漏诊、误诊，提高检验准确。现将研究的结果做出如下报道。

1 资料与方法

1.1 一般资料：实验资料选择2017年2月至2018年8月之间我实验室收集的2000例患者的血清样本分别采用免疫荧光法（IIF）与免疫印迹法（IBT）进行ANA与ANAs检测。患者的平均年龄为（45.64±12.68）岁，其中男性患者1200例，女性患者800例。将两组患者的一般资料进行对比，组间对比结果差异小，没有统计学意义，具有可比性（P＞0.05）。

1.2 实验方法

1.2.1 IIF-ANA检测：ANA检测采用IIF，HEP-2（细胞/猴肝切片）为基质，操作严格要求无菌。标本的稀释浓度设置为1：100.荧光片采用Olympus-BX42型显微镜进行观察后将ANA检测结果与ANAs检测结果进行对比[4]。

1.2.2 IBT-ANAs检测：ANAs检测采用IBT。其中特异性抗体包括：IBT_ANAs检测ANAs检测采用IBT。检测的项有Sm、AMA-M2、nRNP/Sm、组蛋白、Jo-1、SS-A、R0-52、核糖体p蛋白、PCNA、SS-B、PM-Scl、CENP-B、dsDNA、核小体、Scl-70等。操作严格要求无菌。采用全自动免疫印迹仪检测。检测后采用Lide100扫描仪扫描结果后用EUROLineScan自动判别软件自动判定[5]。

1.3 数据处理：在本次研究中，使用SPSS20.0软件对数据进行统计学处理，计量资料以（±s）进行表示，采用t检验法。计数资料，采用卡方检验法。若P＜0.05则认为二者差异具有统计学意义。

2 结 果

2000份血清样中共有1270例ANA阳性血清，ANA阳性率63.5%（1270/2000）。ANA滴度与ANAs及确诊AID例数的关系，见表1。

表1 IBT-ANAs结果与IIF-ANA结果对照表

2000份血清样中共有1060例ANA阳性血清，ANAs阳性率53%（1060/2000）。抗体单项阳性率分别为Sm2.83%、AMA-M21.89%、nRNP/Sm1.89%、Jo-12.36%、SS-A22.6%、R0-5223.58%、PCNA2.36%、SS-B2.83%、PM-Scl4.34%、dsDNA4.34%、CENP-B 1.98%、Scl-70 1.60%、核糖体p蛋白 1.60%、组蛋白20.75%、核小体2.1%；抗两种以上抗体的阳性率为占 75.47%（800/1060）。单项阳性抗 体最多的三个为：SS-A、Ro52以及组蛋白。见表2。

表2 ANAs阳性检测率对比表

3 讨 论

检验自身抗体是诊断AID的重要指示指标。血清中每一种AID指标都具有一定的特征性的自身抗体谱。血清中高效价的自身抗体都是AID的特异质指标值之一，也是临床医学诊断的主要依据。ANA是真核细胞的细胞核、细胞质。细胞膜等多重组合成分自身抗体的总称，不同的AID有不同的抗核抗体谱。

IIF检测是检验ANA的金标准，是实验室检查自身抗体的最主要方法。在各大检验实验室以及医院检验科均采用该方法进行检验。彼此实验中的IIF检验共进行了2000份血样筛查，共筛查出1270例ANA阳性患者，，ANA阳性率63.5%（1270/2000）。

本次研究中，ANA滴度ı1：1000的阳性率最高达到了92%（460/500）；其次是ANA滴度≥1∶320的阳性率最高达到了82%（320/390）；第三为ANA滴度≥1∶100的阳性率最高达到了53.85%（220/260）。ANAs检测2000份血清样中共有1060例ANA阳性血清，ANAs阳性率53%（1060/2000）。抗体单项阳性率分别为Sm2.83%、AMA-M21.89%、nRNP/Sm1.89%、Jo-12.36%、SS-A22.6%、R0-5223.58%、PCNA2.36%、SS-B2.83%、PM-Scl4.34%、dsDNA4.34%、CENP-B 1.98%、Scl-70 1.60%、核糖体p蛋白 1.60%、组蛋白20.75%、核小体2.1%；抗两种以上抗体的阳性率为占75.47%（800/1060），上述研究结果说明两种方法中，ANA检测具有高度灵敏度，ANAs检测具有强特异性。

综上所述，IIF对于血清样本中ANA的敏感性高，IBT针对血清中ANAs的特异性好，二者联合检验可减少AID的漏诊与误诊，提高检验准确率，值得应用。