复发茶多酚含漱液对牙周炎患者龈沟液脂联素和内毒素水平的影响

时峰展

(镇平县人民医院口腔科，河南 镇平 474250)

牙周炎（periodontitis）是由食物嵌塞、创伤性咬合、牙结石、牙菌斑等多种因素侵袭牙周组织形成的慢性感染性疾病[1]。复方茶多酚含漱液（compound tea polyphenols）是一种以茶多酚为主料的植物抗菌药物，因其良好的抗菌效果、独特的预防作用及含漱的副作用较小等优点，得到了临床广泛应用[2]。有研究表明脂联素和内毒素与牙周炎的发病存在密切关系[3，4]，但复方茶多酚含漱液对牙周炎患者龈沟液脂联素和内毒素水平影响的报道较少，故本研究通过观察牙周基础治疗合并使用复方茶多酚含漱液对牙周炎患者龈沟液脂联素和内毒素水平的影响，以期为牙周炎的临床防治提供依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2015年9月-2018年9月就诊我院口腔科的200例牙周炎患者，其中男性63例，女性 37例，年龄 32～64岁，平均年龄（43.56±5.24）岁。随机将200例患者分为观察组（67例，复方茶多酚含漱液组）、阳性对照组（67例，洗必泰含漱液组）和阴性对照组（66例，清水含漱液组）。另选取30例同时期口腔健康体检者作为空白对照组。四组患者在年龄、性别和基础疾病等方面不具可比性(P＞0.05)。

纳入标准：⑴符合《牙周病学》[5]相关诊断标准；⑵口腔中有≥20颗残留牙齿，牙周袋探针深度≥5mm有4颗以上，≥2颗牙齿为重度牙周炎损牙；⑶无糖尿病、心血管疾病和造血系统疾病等全身疾病；⑷近3个月内未服用非甾体类抗炎药、抗生素、激素及免疫抑制剂；⑸近1年内未行任何牙周治疗；⑹自愿参加本研究并签署知情同意书。排除标准：⑴孕妇或哺乳期者；⑵对本研究治疗药物过敏者；⑶有癫痫、精神系统疾病、恶性肿瘤、自身免疫病等全身系统疾病者；⑷有长期吸烟和饮酒史者；⑸有口腔性化脓性感染者及咬合异常和接受正畸治疗者；⑹临床资料不完善者。

1.2 方法 口腔健康体检者予就诊当日采集龈沟液进行脂联素和内毒素测定。200例牙周炎受试者选取不在同一象限的2颗牙周袋深度≥5mm且无牙颈部龋齿、无咬合创伤及无充填体的患牙作为观察牙齿，于治疗前采集龈沟液进行进行脂联素和内毒素测定。口腔健康宣教以及龈上洁治术和龈下刮治术等基础治疗后，观察组予以复方茶多酚含漱液 （云南三利消毒药业有限公司），每次15ml含漱 2～3min，3 次/d，共 7d；阳性对照组予以洗必泰含漱液 （江苏晨牌邦德药业有限公司），每次 15ml含漱 2～5min，2 次/d，共 7d；阴性对照组予以清水含漱，每次 15ml含漱 5min，3次/d，共 7d。治疗1周后，再次取龈沟液进行脂联素和内毒素测定，比较治疗前后龈沟液脂联素和内毒素的变化。

1.3 龈沟液采集 受试者漱口后，取无菌洁治器械清除牙菌斑，使用气枪进行相邻牙龈组织和牙颊面的隔湿干燥后，将事先准备好的统一规格无菌滤纸小心插入取样牙周袋内约1mm，30s后取出滤纸，10s后进行同一位点的再次取样。随后立即将滤纸条放入无热源Eppendorf小管中密封，置于-20℃冰箱冻存待检。若滤纸条沾有唾液或者带血，则取样不合格，需重新取样。

1.4 检测方法 龈沟液于冰箱取出后，冻融备用。脂联素检测采用ELISA法，试剂盒购于美国R&D公司。内毒素检测使用鲎实验法，试剂盒购于厦门鲎试剂有限公司。

1.5 统计学处理 使用SPSS 23.0软件包进行数据处理分析。数据以均数±标准差（±s）表示，正态分布数据比较采用t检验，非正态分布资料比较采用非参数U检验。绘制ROC曲线分析龈沟液脂联素和内毒素对牙周炎的诊断价值。P值＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 治疗前后龈沟液脂联素和内毒素水平的比较在治疗前，观察组、阳性对照组和阴性对照组患牙龈沟液脂联素水平明显低于空白对照组，而内毒素水平显著高于空白对照组，比较差异有统计学意义（P＜0.05）。经 1周治疗后，观察组、阳性对照组和阴性对照组患牙龈沟液脂联素水平较治疗前呈升高趋势：观察组＞阳性对照组＞阴性对照组，有统计学意义（P＜0.05）。观察组、阳性对照组较空白对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）；阴性对照组龈沟液脂联素水平较空白对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；观察组、阳性对照组和阴性对照组组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。而龈沟液内毒素水平的变化呈相反趋势，见表1。

表1 治疗前后龈沟液脂联素和内毒素水平的比较

2.2 绘制ROC曲线分析龈沟液脂联素和内毒素对牙周炎的诊断价值 绘制ROC曲线分析龈沟液脂联素和内毒素对牙周炎的诊断价值，结果显示：脂联素和内毒素的AUC面积分别是0.698和0.913，诊断敏感性分别为53.3%和80.0%，诊断特异性分别为80.0%和90.0%，诊断最佳cut-off值分别为1.75ug/ml和 2.25EU/ml，见表 2 和图 1。

表2 龈沟液脂联素和内毒素对牙周炎的诊断价值

3 讨论

图1龈沟液脂联素和内毒素对牙周炎的诊断价值

牙周炎是一种发病机制较复杂的慢性炎症，牙周炎在世界范围内发病率占牙周疾病90%以上，其炎症始动因子为牙菌斑中的多种微生物及其代谢产物[6]。牙菌斑中的多种微生物可通过细菌本身侵袭牙周组织或产生弹性蛋白酶、细胞因子、胶原酶等代谢产物作用引起牙周组织的直接破坏和通过引发宿主炎症反应及免疫反应造成牙周组织的间接破坏。牙菌斑中的微生物主要以革兰阴性杆菌为主，而内毒素是革兰阴性杆菌细胞壁外膜中的主要成分，可引起牙周炎症、出血、牙槽骨的破坏和吸收以及影响牙龈成纤维细胞的活力，具有极高的毒性，在牙周炎的发生发展过程中发挥着重要作用[7-9]。

脂联素是一种由脂肪细胞分泌的特异性胰岛素增敏激素，可抑制促炎因子的刺激反应和促进抗炎介质的释放，为一种保护性细胞因子[10]。Xuan D等[11]人通过研究牙周炎的表观遗传学，发现脂联素可通过调节巨噬细胞JMJD3-IRF4轴的表达从而促进巨噬细胞的抗炎作用。孟馨等[12]人发现脂联素可在TNF-α的引导作用下促进机体内皮细胞中炎性介质的表达，降低内皮细胞中单核细胞的黏附作用，抑制其他炎性介质的活化，从而发挥抗炎作用。

龈上洁治术和龈下刮治术等传统牙周基础治疗是牙周炎的主要治疗手段，其优点在于能够有效清除牙龈下细菌，但仍存在对牙周深部软组织和牙周袋炎症治疗效果不理想等局限性，因此，抗菌药物的使用成为基础治疗后的重要治疗环节[13]。大量研究表明，广谱杀菌剂洗必泰含漱液能够较好地干扰菌斑形成、预防和减少牙周疾病以及龋齿，但其存在口感较差、易造成口腔菌群失调、黏膜刺激性和容易使得牙齿着色等副作用，使得其临床应用受到一定的局限性[14]。复方茶多酚含漱液是一种新型漱口液，其主要成分为天然茶多酚，辅以替硝唑、粘膜保护剂和香料，具有预防龋齿、降低细菌葡萄糖基转移酶活性、减少口腔细菌黏附等抗菌作用[15]。

目前关于复方茶多酚含漱液对牙周炎患者龈沟液脂联素和内毒素影响的报道较少，故我们检测了治疗前后牙周炎患者与口腔健康者以及予以不同治疗后牙周炎患者龈沟液脂联素和内毒素水平的变化，结果表明在治疗前，观察组、阳性对照组和阴性对照组患牙龈沟液脂联素水平明显低于空白对照组，而内毒素水平显著高于空白对照组（P＜0.05）。经 1周治疗后，观察组、阳性对照组和阴性对照组患牙龈沟液脂联素水平较治疗前呈升高趋势：观察组＞阳性对照组＞阴性对照组，内毒素水平变化呈相反趋势，牙周炎患者各组组间比较有统计学意义（P＜0.05）。这表明复方茶多酚含漱液和洗必泰含漱液在治疗后均能提高牙周炎患者龈沟液脂联素水平和降低内毒素水平，且复方茶多酚含漱液的效果优于洗必泰含漱液。复方茶多酚含漱液对龈沟液内毒素水平的影响结果与王萍等[16]人研究的一致。

绘制ROC曲线分析龈沟液脂联素和内毒素对牙周炎的诊断价值，结果显示：脂联素和内毒素的AUC面积分别是0.698和0.913，诊断敏感性分别为53.3%和80.0%，诊断特异性分别为80.0%和90.0%，诊断最佳cut-off值分别为1.75ug/ml和2.25EU/ml。这表明龈沟液中内毒素的诊断效能优于脂联素，其原因可能与龈沟液中脂联素的产生需要经过各方面的作用，而内毒素可由龈沟液中的细菌直接作用产生有关。

综上所述，牙周基础治疗合并复方茶多酚含漱液的局部应用可有效改善牙周炎患者龈沟液中脂联素和内毒素水平，有利于牙周炎的防治，具有较高的临床应用价值。