前列腺肿瘤患者tPSA、Bax、HIF-1α表达水平及与病情的相关性研究
2019-06-18史建华刘瑞强尹茂轩杨帮东
史建华,刘瑞强,尹茂轩,杨帮东
(濮阳市人民医院泌尿外科,河南 濮阳457000)
前列腺癌多发于45~89岁的中老年男性人群,属于常见生殖系统恶性肿瘤,流行病学研究[1]提示年龄超过50岁的人群前列腺癌的发病率和死亡率呈指数增长,随着疾病的进展,多伴有尿路梗阻、血尿等并发症,严重降低了患者的生活质量,甚至威胁患者的生命安全。因而,探寻前列腺癌的有效诊断及病情评估方法以为制定有效的治疗方案做参考已成为现临床研究的重要方向。
前列腺特异性抗原 (Prostate specificantigen,PSA)是诊断前列腺疾病的重要指标,但研究[2]提示单独的PSA检测缺乏足够的特异性和敏感性。文献[3]提示Bax、HIF-1α在多类肿瘤细胞中呈现高表达,与肿瘤的发生、发展关系密切,但前列腺癌中上述Bax、HIF-1α的表达情况资料缺乏。故而,本研究深入观察了 前列腺肿瘤患者的tPSA、Bax、HIF-1α表达水平,并分析其临床意义,现报告如下。
1 资料与方法
1.1 患者一般资料 选取2015年8月-2018年5月在我院接受治疗前列腺肿瘤患者为研究对象。纳入标准[4]:⑴年龄≥50周岁;⑵经病理诊断确诊为前列腺肿瘤;⑶无其他系统严重疾病;排除标准:⑴临床资料不全者;⑵合并其他原发肿瘤疾病者。根据纳入排除标准共纳入病例数80例,年龄55~82 岁,平均 63.85±4.11 岁;对照组纳入标准:⑴年龄≥50周岁;⑵经病理确诊为前列腺增生;⑶无其他系统严重疾病者,共纳入80例,年龄54~82岁,平均64.12±5.03岁。两组患者年龄、性别等一般资料比较无差别,具有可比性。本项研究经医院伦理委员会评审通过,且患者均知情同意。
1.2 方法 取所有研究对象空腹静脉血,离心后分离血清,化学发光法检测血清总前列腺癌特异性抗原(tPSA)水平;采用免疫组化染色法检测Bax、HIF-1α蛋白表达表达水平;兔抗人蛋白多克隆抗体均购于美国GE公司;DAB显色盒、免疫组化试剂盒等相关试剂盒及染色液均购于南京建成生物研究所。适量前列腺癌灶组织、增生组织标本常规石蜡切片,梯度水化;热抗原修复,10min过氧化物酶修复;山羊血清1h封闭;分别滴加Bax、HIF-1α蛋白抗体,孵育(4℃)过夜;PBS缓冲液3次冲洗;滴加二抗 (辣根过氧化物酶标记);1h室温孵育,PBS3次冲洗;DAB显色,苏木素复染;自来水冲洗反蓝后梯度脱水,中性胶封片,高倍显微镜下观察。
结果判定标准:每张切片随机取5个高倍镜视野,对阳性细胞所占百分率进行计数;阳性细胞细胞数<10%为阴性,10%~25%轻度阳性,26%~50%中度阳性,超过50%强阳性;若阳性细胞≥10%均可判定为阳性表达[5]。
1.3 评价指标 观察两组患者 tPSA、Bax、HIF-1α表达的差异,比较不同临床病理特征前列腺肿瘤患者tPSA、Bax、HIF-1α表达情况,分析影响前列腺肿瘤患者的 tPSA、Bax、HIF-1α表达水平的因素。
1.4 统计学处理 数据录入后,采用SPSS 11.5软件进行分析。计数和计量资料分别采用例和均数±标准差表示。两组患者、不同临床病理特征前列腺癌患者tPSA、Bax、HIF-1α表达情况的比较采用卡方检验和t检验进行分析,采用回归分析法分析影响前列腺肿瘤患者的tPSA、Bax、HIF-1α表达水平的因素。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组患者tPSA、Bax、HIF-1α表达情况的比较前列腺癌患者的tPSA水平和HIF-1α阳性表达率高于前列腺增生组,两组患者的Bax阳性表达率无差别。见表1。
表1 两组患者tPSA、Bax、HIF-1α表达情况的比较
2.2 不同临床病理特征前列腺癌患者tPSA、Bax、HIF-1α表达情况的比较 中低分化、有转移、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ、有神经浸润的前列腺癌患者的tPSA水平和HIF-1α阳性表达率较高,Bax阳性表达率较低,不同年龄患者间无差别。见表2。
表2 不同临床病理特征前列腺癌患者tPSA、Bax、HIF-1α表达情况的比较
2.3 影响前列腺肿瘤患者的tPSA、Bax、HIF-1α表达水平的因素分析 将单因素分析有意义的分化程度、转移情况、TNM分期、有无神经浸润作为自变量,将前列腺癌患者的tPSA、Bax、HIF-1α表达水平作为因变量进行回归分析,结果显示分化程度和有无转移是影响tPSA、Bax、HIF-1α表达的因素。见表3。
2.4 tPSA、HIF-1α对前列腺癌诊断价值分析 tPSA对前列腺癌诊断的阳性预测值、阴性预测值、灵敏度高于HIF-1α,特异度低于HIF-1α。见表4。
表3 -1影响前列腺肿瘤患者的tPSA表达水平的因素分析
表3 -2影响前列腺癌患者Bax表达的因素分析
表3 -3影响前列腺肿瘤患者的HIF-1α表达水平的因素分析
表4 tPSA、HIF-1α对前列腺癌诊断价值分析
3 讨论
全球范围内前列腺癌一般多发于欧美国家,已成为男性第二大恶性肿瘤,但近年来我国前列腺癌发病率也呈现显著上升趋势[6]。早期前列腺癌由于肿瘤细胞逐渐侵犯前列腺周围组织并不会表现出明显症状,随着病情的进行还可能表现为尿流缓慢、尿流中断、排尿不尽、尿频、尿急等症状,严重患者还可出现尿潴留、尿路梗阻及尿失禁等症状,严重降低了患者的生活质量[7,8]。因而,前列腺癌的早期准确诊断和病情评估具有重要意义。
tPSA是现临床泌尿科肿瘤中最灵敏的肿瘤标志物,其不是肿瘤的特异感应,而是器官的特异感应,正常男性的TPSA值是4ng/L以下,若超过4ng/L,也不能完全确定患者患有前列腺癌,要根据其超过的范围多少而定提示患者需要做进一步检查确诊[9,10]。BAX是与BCL-2同源的水溶性相关蛋白,是BCL-2基因家族中细胞凋亡促进基因,BAX的过度表达可拮抗BCL-2的保护效应而使细胞趋于死亡,对 Bcl-2 产生阻抑作用[11,12]。 HIF-1α 可调控多种信号途径并对细胞凋亡、血管新生及糖酵解均具有良好的调控作用[13-15]。上述因子均为肿瘤特异性标志物,本研究以此为研究点探讨相关因子与前列腺癌病情的相关性。
本研究多两组患者tPSA、Bax、HIF-1α表达情况比较发现前列腺癌患者的tPSA水平和HIF-1α阳性表达率高于前列腺增生组,两组患者的Bax阳性表达率无差别。上述结果提示前列腺肿瘤患者的tPSA、HIF-1α存在高表达,具有成为诊断前列腺癌重要指标的潜力。正常情况下PSA分布于前列腺导管内,组织表达水平较低,前列腺癌导管屏障遭到破坏,PSA快速释放入血,因此前列腺癌患者血清tPSA水平较高[16]。HIF-1α与缺氧环境关系密切,提示前列腺癌在发生、发展过程可能造成了缺氧环境。
进一步对不同临床病理特征前列腺癌患者tPSA、Bax、HIF-1α表达情况的比较发现中低分化、有转移、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ、有神经浸润的前列腺癌患者的tPSA水平及HIF-1α阳性表达率较高,Bax阳性表达率较低,不同年龄患者间无差别。上述结果说明高分化、高病理分期及存在神经浸润的前列腺癌患者的tPSA水平及HIF-1α阳性表达率较高,Bax低阳性表达,提示在前列腺癌的发展中,Bax蛋白的水平下降在肿瘤形成过程中抑制了细胞凋亡,前列腺癌HIF-1α蛋白可能通过调控Baxx蛋白的表达而抑制肿瘤细胞发生凋亡,促进肿瘤细胞的增殖。
本研究将单因素分析有意义的分化程度、转移情况、TNM分期、有无神经浸润作为自变量,将前列腺癌患者的tPSA、Bax、HIF-1α表达水平作为因变量进行回归分析,结果显示分化程度和有无转移是影响tPSA、Bax、HIF-1α表达的因素。该结果说明前列腺肿瘤患者的tPSA、HIF-1α、Bax水平均受分化程度和转移情况的影响。tPSA对前列腺癌诊断的阳性预测值、阴性预测值、灵敏度高于HIF-1α,特异度低于HIF-1α。tPS属激肽酶家族蛋白,存在于前列腺组织和精液中,正常人血清中含量极微,其水平的异常变化可提示前列腺癌的可能性;正常条件下HIF-1α可与基因产物pYHL结合并被降解,半衰期仅有数分钟,但在pVHL和缺氧环境下HIF-1α可快速升高,因此tPSA、HIF-1α均对前列腺癌的诊断具有重要价值。
本研究证实前列腺癌的发生、发展与多种信号通路、多种因子有关,为前列腺癌的诊断、病情程度及预后判断提供一定的基础,但具体机制还有待进一步研究探讨。
综上所述,前列腺肿瘤患者的tPSA、HIF-1α表达水平较高,Bax水平与非前列腺癌患者相当,但上述指标均受分化程度和转移情况的影响。