对大前庭水管综合征的基因、影像学诊断研究△

马新春，郭 斌，徐 聪，张 英

(青海大学附属医院 耳鼻咽喉科，青海 西宁 810001)

高分辨率颞骨轴位CT检查被认为是确诊大前庭水管综合征(large vestibular aqueduct syndrome，LVAS)的金标准[1，2]，但患儿对该检查配合性较差。

随着分子生物学的发展，多项基因检测研究分析发现LVAS的根本病因与SLC26A4基因的突变关系密切，尤其是确认了IVS7-2A>G及2168A>G位点的突变是导致LVAS的常见突变位点[3，4]。因此拟对患儿采用基因检测方法诊断。

本研究探讨SLC26A4基因突变检测及颞骨高分辨率CT检查对诊断大前庭水管扩大综合征的一致性。为临床推广SLC26A4基因突变检测提供支持。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选取2016年12月至2018年2月于青海大学附属医院耳鼻咽喉科行人工耳蜗植入手术的患者作为研究对象，共216例。患者入院后询问相关信息，主要包括患者的一般信息、家族史、药物史、个人史(有无外伤史)，耳聋的发病年龄及母亲的孕期情况等；完善耳鼻喉科专科查体、听力学检查、影像学检查(高分辨率颞骨轴位CT)等。符合条件的216名耳聋患儿中，男性129例，女性87例；年龄均在1～12岁，平均年龄为3.9±1.9岁，上述所有患者住院后均行基因检测及影像学检查。

1.2 检测方法

1.2.1 基因检测分析方法：经监护人知情同意后，采用天根生物工程公司的全血基因组DNA核酸提取试剂盒提取基因组DNA，检测基因组的纯度及浓度，对符合标准的基因组DNA进行PCR扩增，采用北京博奥生物公司提供的基因芯片，对患者基因组进行杂交、芯片洗涤与甩干、芯片扫描，检测、分析责任基因SLC26A4上的IVS7-2A>G、2168A>G位点突变情况。

1.2.2 影像学检查分析方法：对患儿行高分辨率颞骨轴位CT检查，其检查由青海大学附属医院影像中心完成。LVAS扩大判断标准：轴位颞骨CT上前庭导水管中段最大直径超过1.5 mm、前庭导水管外口超过2.5 mm。为排除误差，每名患儿的影像学检查结果均由影像中心的3名高年资医生判读。

1.3 统计学方法

采用SPSS19.0软件对两种诊断结果行Fisher确切概率或行×列表卡方检验法，检测两种方法的差异性，其检验水准为α=0.05。

2 结果

2.1 颞骨CT检查结果

行颞骨HRCT检查的216例患者结果：正常148例，内耳畸形68例(导水管扩大39例，其中合并有耳蜗Mondini畸形5例)；通过Monte Carlo(蒙特卡洛)确切概率法分析发现LVAS的检出率在性别及民族构成比上均无统计学差异(表1)。

表1 216例患者影像学结果(%)

Table 1Imaging results of 216 patients(%)

*：表示Fisher确切概率法所得结果

2.2 责任基因检测结果

行基因检测的216例患儿结果：正常180例，SLC26A4基因位点突变的有36例，汉、回、藏及其他民族检出率分别为16.26%、14.54%、26.09%、22.22%，民族上无统计学意义。突变者中IVS7-2A>G纯合突变16例、2168A>G纯合突变2例，共18例；IVS7-2A>G杂合突变11例、2168A>G纯合突变5例，共16例，IVS7-2A>G与2168A>G的复合杂合突变为2例(表2)。

表2 216例患者SLC26A4基因检测结果(%)

Table 2Results of SLC26A4 gene test in 216 patients(%)

*：表示Fisher确切概率法所得结果

2.3 影像学诊断与基因检测结果对比分析情况

39例导水管扩大畸形患者中检测出36例伴有责任基因的突变，另有3例颞骨HRCT影像学诊断符合标准，但未检测出SLC26A4基因的位点突变。我们通过医学统计方法对于影像学诊断与基因检测两种诊断方法进行一致性检验，Kappa=0.952，提示两种方法存在较好一致性(表3～4)。

表3VA扩大患者在基因突变中的分布(%)

Table 3Distribution of Patients with enlarged VA in gene mutations(%)

表4SLC26A4基因检测与影像学检查结果(%)

Table 4Results of SLC26A4 gene test and imaging examination(%)

3 讨论

基因检测技术，尤其是基因芯片的出现成为分子生物医学的重要组成部分。基因芯片的原理是将已知的固定在支持物的探针与带有标记的待测基因杂交，通过探针上的杂交信号获取检测基因的各项信息[5]，目前已成为分子生物学的重要检测方法而广泛应用于生物科学的众多领域中。

多项研究表明SLC26A4是导致LVAS的责任基因，SLC26A4基因突变具有种族差异，在我国LVAS患者的SCL26A4基因检出率高达97%，占所有突变类型的57.63%，尤其是IVS7-2A>G及2168A>G位点的突变[6]。其中以IVS7-2A>G突变最为多见，约有80%的LVAS患者中可以检测到IVS7-2A>G位点的突变。本研究发现，SLC26A4基因突变的检出率为16.67%，其中 IVS7-2A>G位点突变约占责任基因突变的80.56%，2168A>G位点突变占22.22%，这与国内其他研究结果相一致[7，8]。结合本研究结果及相关结论，对于可疑患儿可采用基因检测有效地发现或确诊LVAS。

前庭导水管异常扩大时，外力的作用可引起颅内压异常增高，致内淋巴逆流，损伤内耳毛细胞，进而导致LVAS患者听力下降[9]。LVAS是一种常见的内耳畸形[10]，本研究显示，36例SLC26A4基因突变者的影像学检查均提示双侧VA扩大，3例患者的影像学检查虽然符合LVAS诊断标准，但未检测到责任基因的突变。分析原因：LVAS为常染色体隐性遗传性疾病，目前关于LVAS责任基因主要认为是SLC26A4的突变，也不排除是其他责任基因的突变，或是SLC26A4基因上其他位点的突变导致了LVAS的发生，本研究的样本量尚少，有待进一步确认。

本研究显示，基因检测与影像学检查两种方法对诊断LVAS具有良好的一致性。