香菇新菌株森立17选育

戴 璐 张怀荣 霍文严 祁 鹏 张黎光 乔 婷 刘 愚 李峻志*

（1陕西省微生物研究所，陕西西安710043；2宁强县真菌研究所，陕西宁强724400）

目前陕南秦巴山区的香菇代料栽培大多采用春植秋冬出菇模式（简称春栽模式），该模式下的菌筒在越夏过程中，一方面容易染菌腐烂，另一方面其营养成分会有所消耗（大约消耗10%～20%），因而利用该模式生产的香菇的产量及品质相对较低。因此，选育出适宜陕南秦巴山区的，短菌龄、高产优质、抗逆性强的秋栽香菇新菌株，已是迫在眉睫的工作。迄今为止，杂交育种仍是香菇新品种选育及品种改良较为常用和有效的育种方法。此法是通过单×单杂交或单×双杂交使得双亲的优良性状互补或是借助一亲本的优良性状克服另一亲本劣势性状，达到选育出优良品种的目的。

1 材料与方法

1.1 亲本菌株

按育种目标收集综合性状优良、差异性状互补的8个袋栽香菇品种（菌株）作为杂交亲本，其编号分别为238、276、378、395、482、574、672、808，并适时栽培出菇，供孢子采集用。

1.2 培养基

PDA培养基：马铃薯200 g，琼脂20 g，葡萄糖20 g，蒸馏水1000 mL；栽培种培养基：杂木屑80%，麸皮20%，另加营养素0.15%；栽培袋培养基：杂木屑80%，麸皮17%，玉米面3%，另加营养素0.15%。

1.3 方法与步骤

1.3.1 技术路线

孢子采集→单孢分离与萌发→单核菌丝镜检→杂交配对→异核体镜检→拮抗试验→初选→复选→入选品系产鉴→品种鉴定。

1.3.2 孢子采集

采集尚未弹射孢子的香菇预选亲本个体（八成熟），置于钟罩式孢子采集器中。在22～24℃的空间温度，50%～70%的空间相对湿度的条件下，培养1～2 d。待孢子弹射后，取出载有孢子的滤纸片并置于无菌试管中，在4℃冰箱中进行短期保存。

1.3.3 孢子萌发与单核菌丝镜检

将收集的孢子进行梯度稀释后，将稀释好的孢子在装有PDA培养基的试管斜面上进行划线，并置于23℃恒温箱中培养。待孢子开始萌发后，挑取星芒状的单菌落转接至PDA试管斜面培养基中继续进行培养。随时观察菌丝的生长状态，并对每个菌落的菌丝进行镜检，检验有无锁状联合；将无锁状联合的菌丝挑选出来，视为单核菌丝。

1.3.4 杂交配对

分别挑取双亲单核菌丝，随机选择，交叉配对，将双亲单核菌丝各一块置于PDA培养基中，菌块相距2 cm，当两亲本单核菌丝愈合后，挑取中间部位的顶端粗壮且分枝明显的结合菌丝进行培养、镜检，并观察锁状联合。将具有锁状联合的结合菌丝进行编号、登记，转管培养，保存备用。

1.3.5 拮抗试验

拮抗试验采用PDA培养基。将两亲本菌丝与结合菌丝同时接入装有PDA培养基的培养皿中培养，呈三角形接种。观察结合菌丝与亲本菌丝相遇后是否产生拮抗线。与亲本产生明显拮抗线的结合菌丝，视为异核菌丝体，简称异核体，保留其菌丝体和编号。

1.3.6 异核体菌株初选

图1 森立17出菇状态及子实体形态

异核体菌株初选试验采用栽培种培养基，在23℃的条件下培养，测定菌丝的生长速度及茁壮程度，以香菇菌株209（引自华中农业大学菌种实验中心）为对照菌株。选择菌丝生长速度和茁壮程度优于对照菌株的异核体菌株用于后续的异核体菌株复选试验及生产鉴定。

1.3.7 异核体菌株复选及生产鉴定试验

将初选后保留的异核体菌株及对照菌株209，进行产量、质量比较及生产鉴定试验。试验采用栽培袋培养基，从中筛选出抗逆性强，产量高，质量佳，菌龄短的香菇菌株。

2 结果与分析

2.1 亲本单核菌丝体分离

12份亲本个体被使用，分离挑取单孢菌落246份，并从中镜检挑选出132份单核菌丝。

2.2 杂交配对及异核体挑选

共杂交配对578组，经镜检和拮抗试验，共检出126份异核体。

2.3 异核体初选试验结果

126份异核体菌株，经过菌丝生长速度测定试验，结果显示0017号菌株（森立17）等7个菌株的菌丝生长速度高于对照菌株，将其列入异核体菌株复选及生产鉴定试验。详见表1。

2.4 异核体菌株复选及生产鉴定试验结果

在异核体菌株复选及生产鉴定试验中，0017号菌株（森立17）出菇早，菌龄短，出菇温度范围广，菇形圆正，柄短叶大，产量高，综合评价高。其早熟性比较突出，比对照菌株209早出菇24 d。详见表2、表3、表4、表5、图1。

表2 森立17农艺性状

表3 森立17菌株子实体个体形态

表4 森立17菌株鲜菇产量（袋产量）

表5 森立17菇质综合评价

3 小结

采用单孢杂交技术，并通过挑选菌丝生长速度及茁壮程度优异的菌株进行初筛，再经复筛的技术路线是切实可行的。培育出的新菌株（森立17）具有以下特点：（1）在相同的温度条件下，森立17的菌丝生长速度及菌丝的茁壮程度明显优于对照品种209；（2）森立17菌丝生命力强，菌龄短（60～70 d），出菇快，出菇适宜温度广，是陕南秦巴山区理想的袋栽香菇秋栽菌株；（3）该菌株首次出菇整齐，菇体圆正、厚实、肥大、柄短，菇潮一致，生物转化率可达86.7%；同时菇质紧密，折干率高，鲜菇货架期长，既适合鲜销，又适合加工为干品，是收益理想的袋栽香菇品种。