D-双功能蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及意义

路欣 孔令玉

[摘要] 目的 檢测子宫内膜癌组织中D-双功能蛋白（DBP）表达水平，及其与血清肿瘤标志物癌胚抗原（CEA）、糖类抗原125（CA125）检测结果的相关性，探讨DBP对子宫内膜癌诊断和治疗的临床意义。 方法 选取2013年1月～2015年12月在河北省唐山市妇幼保健院（以下简称“我院”）进行子宫内膜癌切除术患者30例作为实验组，选取我院同期健康体检的正常者20名作为对照组，应用化学发光法检查血清肿瘤标志物CEA和CA125的表达水平，免疫组织化学法检测子宫内膜癌组织和癌旁组织DBP的表达水平，测量积分光密度值（IOD），采用Pearson相关分析法分析DBP与肿瘤标志物CEA、CA125的相关性。 结果 子宫内膜癌组织中DBP的IOD值表达高于癌旁组织，差异有统计学意义（P < 0.05），且DBP与肿瘤标志物CEA（r = 0.837，P < 0.01）和CA125（r = 0.787，P < 0.01）的表达水平呈线性正相关。 结论 子宫内膜癌患者DBP的表达升高，并且与子宫内膜癌的发生发展密切相关。CEA、CA125和DBP联合检测对子宫内膜癌早期诊断有重要的意义，并为子宫内膜癌的治疗和预后提供了一个新的研究靶点。

[关键词] 子宫内膜癌;D-双功能蛋白;癌胚抗原;糖类抗原125;基因诊断

[中图分类号] R737.33          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-7210（2019）02（a）-0161-04

[Abstract] Objective To detect the expression level of D-bifunctional protein （DBP） in endometrial cancer tissues and its correlation with the detection results of serum tumor markers carcinoembryonic antigen （CEA） and carbohydrate antigen 125 （CA125）， and to explore the clinical significance of DBP in the diagnosis and treatment of endometrial cancer. Methods From January 2013 to December 2015， 30 cases of patients undergoing endometrial cancer resection in Tangshan Maternal and Child Health Care Hospital （hereinafter referred to as "our hospital"） were selected as the experimental group， and 20 cases of normal persons who underwent physical examination during the same period in our hospital were selected as the control group. Chemiluminescence was used to detect the expression levels of serum tumor markers CEA and CA125， and immunohistochemistry was used to detect the expression levels of DBP in endometrial and paracancer tissues， and the integral optical density value （IOD） was measured. Pearson correlation analysis was used to analyze the correlation between DBP and tumor markers CEA and CA125. Results The expression of IOD value of DBP in endometrial carcinoma was higher than that in adjacent tissues， and the difference was statistically significant （P < 0.05）. There was a positive linear correlation between DBP and tumor markers CEA （r = 0.837， P < 0.01） and CA125 （r = 0.787， P < 0.01）. Conclusion The expression of DBP is increased in patients with endometrial cancer and is closely related to the occurrence and development of endometrial cancer. The combined detection of CEA， CA125 and DBP has important significance for the early diagnosis of endometrial cancer， and provides a new research target for the treatment and prognosis of endometrial cancer.

[Key words] Endometrial cancer; D-bifunctional protein; Carcinoembryonic antigen; Carbohydrate antigen 125; Genetic diagnosis

子宫内膜癌（endometrial carcinoma，EC）是门诊和住院患者中常见的妇科肿瘤，临床发病率近年呈现升高趋势，甚至在一些地区发病率超过子宫颈癌，严重影响着女性的生活和健康[1]。因此，EC的早期诊断和预后监测就变得尤其重要。近年来，EC的多学科联合检测为提高其诊断的准确率和敏感率做出很大贡献。D-双功能蛋白（D-bifunctional protein，DBP），也称为17β-雌二醇脱氢酶Ⅳ（17β-Hydroxysteroid dehydrogenase Ⅳ，HSD17B4），作为一种过氧化物酶蛋白，在类固醇的代谢过程中发挥着重要作用[2]。人类蛋白图谱（human protein atlas）网站报道，肝癌患者的癌组织石蜡切片中DBP的蛋白表达水平也很高。笔者前期对D-双功能蛋白在肝癌发病中的作用进行了研究，结果表明DBP不仅在肝癌HepG2细胞明显升高，在肝癌大鼠、肝癌患者肿瘤组织中也存在明显的高表达，并且同样在乳腺癌组织中也得到了证实[3]。因为子宫内膜癌同属于受激素影响的肿瘤，为进一步明确DBP在子宫内膜癌中的表达情况，本研究提出对子宫内膜癌患者血清的标志物癌胚抗原（CEA）和糖类抗原125（CA125），以及患者肿瘤组织学DBP水平检测，探讨DBP在子宫内膜癌表达情况，研究DBP和CEA、CA125联合在早期诊断子宫内膜癌中的临床意义及相关性分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择在河北省唐山市妇幼保健院（以下简称“我院”）2013年1月～2015年12月进行子宫内膜癌切除术患者30例为实验组，年龄34～65岁，平均（44.53±9.25）岁，子宫内膜癌患者全部经病理和临床确诊，子宫内膜癌患者术后的肿瘤组织和距离肿瘤边缘1 cm以上的癌旁正常组织留取病理标本，并经2名临床诊断经验丰富的病理科医师进行确诊，将癌旁正常组织无肿瘤细胞浸润作为手术切除完全的标准，手术前未经过放化疗等治疗，无其他特殊病史。选择同期我院20名健康体检女性为对照组，年龄28～62岁，平均（32.45±7.65）岁。两组年龄比较，差异无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。

1.2 检測方法

晨起空腹时采取两组实验对象的静脉血，经离心机分离血清后，用我院检验科的DX-800i化学发光仪，采用化学发光免疫法检测血清CEA和CA125，所有试剂购买自美国贝克曼公司;子宫内膜癌肿瘤组织和癌旁正常组织用石蜡包埋后，莱卡组织切片机，先用普通染色检测切片情况，然后应用免疫组织化学检测试剂盒（北京中杉金桥生物公司）检测DBP表达水平，肿瘤组织的DBP表达水平用分析测量图象软件Imagepro-Pro-Plus 6.0（IPP 6.0）对积分光密度值（IOD）进行测量，最后分析实验组DBP表达水平与CEA和CA125的相关性。

1.3 统计学方法

应用SPSS 17.0软件进行统计分析，计量资料采用均数±标准差（x±s）表示，比较用t检验。相关性采用Pearson相关分析。以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 实验组与对照组血清CEA和CA125水平比较

2.2 子宫内膜癌癌组织和癌旁组织DBP表达水平比较

排除实验组个别离均值后，分别对12例实验组术后癌组织和癌旁组织DBP表达水平比较，免疫组化分析结果显示癌组织显著高于癌旁正常组织（图1，封四）。进一步通过灰度值的分析，子宫内膜癌组织DBP的灰度值（56.26±11.44）高于癌旁组织（29.87±5.73），差异有统计学意义（P < 0.05）。

2.3 实验组CEA、CA125与DBP表达水平的相关性分析

3 讨论

肿瘤血清标志物的临床检测是一种无创且有一定指导性的检查方法，但血清学单项检测在肿瘤早期诊断和预后中灵敏性和特异性不高，因此可通过联合检测的方法解决这个问题，而且在检验和临床中得到了专家学者的认可。CEA常常被认为是胃肠道肿瘤早期诊断及预后评价的良好指标之一，而近年的相关报道，其对妇科生殖系统肿瘤的诊断和预后检测也有很好的临床参考价值，同时在其他恶性肿瘤的鉴别诊断、病情和预后中CEA检测也有重要临床意义[4]，但是该指标检测存在非特异型，通常与其他指标联合应用[5]。本研究结果显示，实验组CEA表达水平也是明显升高的，提示血清CEA检测对子宫内膜癌的早期诊断是有着一定的临床价值。CA125是对卵巢癌的诊断最敏感的肿瘤标志物之一，临床实践中有较高的准确率，有研究报道，在术前对疑似卵巢癌患者CA125水平进行检测确诊可高达80%左右[6-7]。CA125作为肿瘤标志物不仅仅是卵巢癌诊断较高灵敏性的非特异性肿瘤标志物，在其他妇科肿瘤患者中的表达水平也会过高表达[8-11]。洪锡田等[12]研究表明诊断乳腺癌的患者中血清CA125的阳性率达到31.8%，这也说明CA125也作为乳腺癌诊断的肿瘤标志物。虽然CEA、CA125等血清肿瘤标志物诊断妇科肿瘤比较敏感，但毕竟受血清学影响因素限制，因此并不是太稳定。

DBP是一种与炎症、脂肪酸代谢，特别是性类固醇代谢密切相关的酶蛋白分子。研究报道DBP表达水平与肿瘤发生有密切关系，DBP不仅前列腺癌肿瘤组织比癌旁正常组织明显升高，并且在前列腺癌预后较差的患者中检测有重要临床意义[13]。另外研究也显示其他肿瘤组织如肝细胞肝癌、直肠癌中都高度表达，DBP在卵巢等与激素相关的肿瘤组织也存在高表达[14-17]，并且DBP在类固醇的代谢过程中发挥重要的作用，这就为研究子宫内膜癌的诊断和治疗检测提供了新的方向和靶点[18-21]。

本课题在前期研究基础上，以DBP为切入点，探讨子宫内膜癌的DBP与CEA、CA125的关系，本研究与前期肝细胞肝癌、乳腺癌研究结果表现存在一致性，子宫内膜癌患者肿瘤组织的DBP基因表达水平升高，并且明显高于癌旁的正常组织，实验组血清CEA、CA125表达水平显著高于对照组，提示子宫内膜癌肿瘤组织DBP表达水平与患者血清CEA、CA125表达呈线性正相关的关系。鉴于DBP基因的特点，它在血清学检测中几乎不表达，可以作为基因检测的重要手段，本研究也表明DBP结合血清肿瘤标志物CEA和CA125的检测更好地提升临床诊断价值，且DBP可以作为子宫内膜癌术后和病情监测的新基因靶点，并将进一步探索和研究。

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（收稿日期：2018-08-06  本文編辑：封   华）