早发型败血症早产儿脐血VDBP、25-(OH)D、PCT及IL-6水平变化

刘 鹏

新生儿败血症是一种发生于新生儿期的系统性感染，由病原体侵入血液循环所致，发病率为4.9%～17.0%[1]。其中早发型败血症（EOS）指在生后72 h内发生败血症，感染途径多为母婴垂直传播，与围生期因素密切关联[2]。早产儿因免疫系统更为不全，EOS发病率、死亡率显著高于足月儿[3]。早产儿EOS缺乏特异性表现，其诊断是新生儿医学的难点。细菌学培养是金标准，但培养周期长，不利于早期诊断。因此，探寻EOS诊断敏感且可靠的标志物有着迫切性。

近年来，不少研究分析了脐血降钙素原（PCT）和白细胞介素-6（IL-6）与新生儿EOS的关系，但确切意义仍有待探讨[4]。维生素D结合蛋白（VDBP）是一种主要由肝脏产生的多功能血浆球蛋白，具有结合、运输循环维生素D的功能。近年研究发现，[25-(OH)-D]及VDBP在机体损伤、感染中扮演着重要角色[5]。有研究显示，VDBP在脓毒症患者血液中显著降低[6]。但目前尚缺乏关于VDBP与早产儿EOS相关性的报道。为此，笔者检测了早产儿EOS脐血VDBP、25-(OH)D、PCT、IL-6 的变化，探究其意义，以期为EOS早期快速诊断提供指导。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取2013年7月～2018年6月医院新生儿重症监护室（NICU）收治的早产儿。纳入标准：（1）新生儿胎龄＜37 w；（2）生后 24 h 内入住 NICU。排除标准：（1）合并先天性发育畸形者；（2）双胎、多胎儿；（3）合并其他感染性疾病者；（4）未能采集合格血标本者。共纳入232例，男129例，女103例，胎龄 27+5～36+6w，出生体质量 968～2959 g。

1.2 EOS诊断标准 参照 《实用新生儿学（第3版）》中EOS相关诊断标准[7]：发生于出生后72 h内，同时满足以下（1）、（2）中任一项：（1）确诊败血症：有典型症状表现，且与以下任一项相符：①血培养明确提示存在致病原；②若血培养显示有机会致病菌，则须与另份血培养显示的致病菌相同。（2）临床诊断败血症：有典型症状表现，同时外周血检查满足≥2 项：WBC＜5×109/L 或＞25×109/L，杆状粒细胞与中性粒细胞之比值≥0.16，微量血沉≥5 mm/h，CRP≥8 μg/ml，血小板计数＜100×109/L。

1.3 检测指标 胎儿娩出后，立即夹闭脐带两端，抽取2～3 ml脐动脉血；并于早产儿生后72 h内，采集2 ml外周静脉血。确诊EOS的早产儿，在采取有效抗感染治疗10～14 d后，再抽取2 ml外周静脉血。血标本放置于促凝管，静置30 min，3000 r/min离心5 min分离血清，-80℃保存。以ELISA法检测VDBP、25-(OH)D、PCT、IL-6 水平，试剂盒均由中国艾莱生物科技有限公司提供。

1.4 统计学方法 应用SPSS21.0统计软件分析，计量资料以均数±标准差表示，组间比较行t检验；计数资料以频数和百分率表示，行χ2检验；采用受试者工作曲线（ROC）分析不同指标对EOS的诊断效能；P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 EOS患病情况 232例早产儿中，100例诊断为 EOS（EOS 组），132 例为非 EOS（对照组），两组一般资料比较无显著差异（P＞0.05，表1）。

表1 两组一般资料比较

2.2 两组脐血标志物比较 EOS组脐血VDBP与25-(OH)D水平低于对照组，PCT与IL-6水平高于对照组（P＜ 0.05，表 2）。

2.3 两组静脉血标志物比较 EOS组出生后72 h及抗感染治疗后，静脉血VDBP与25-(OH)D水平均低于对照组，PCT和IL-6水平高于对照组。EOS组抗感染治疗后，静脉血VDBP与25-(OH)D水平高于出生后72 h时，PCT与IL-6水平低于出生后72 h时（P＜ 0.05，表 3）。

2.4 脐血 VDBP、25-(OH)D、PCT、IL-6预测 EOS的ROC曲线分析 绘制脐血 VDBP、25-(OH)D、PCT、IL-6预测EOS的ROC曲线，得到的曲线下面积及最佳诊断临界值及相应敏感度，见表4。

表2 两组脐血VDBP、25-（OH）D、PCT、IL-6水平比较

表3 两组静脉血VDBP、25-（OH）D、PCT、IL-6水平比较

表4 脐血VDBP、25-（OH）D、PCT、lL-6预测EOS的ROC曲线分析结果

3 讨论

寻找早期诊断EOS的理想指标有着重要意义。近年研究发现，IL-6、PCT在EOS诊断中表现出优越诊断价值[8-9]。IL-6作为典型的促炎因子，正常生理状态下，机体IL-6水平极低，当病原菌感染后可出现迅速增高，是反映早期感染的重要指标。PCT是一种无活性的降钙前肽物质，在健康人血清中水平很低，亦是临床常用的感染指标。本研究结果显示，EOS组较对照组脐血及血清IL-6、PCT水平均明显增高，且EOS组经有效抗感染治疗后，血清IL-6、PCT水平明显降低，证实IL-6、PCT可作为早产儿EOS早期诊断及疗效评价的血清指标。

25-(OH)D是人体血循环中维生素D的主要形式，其半衰期长，稳定性良好，能够很好地反映机体VD水平。25-(OH)D可调节免疫功能，通过激发中性粒细胞、T淋巴细胞等活动，而激发对细菌、真菌的免疫反应，还具有炎症调节作用[10]。新生儿脐血25-(OH)D由胎盘营养供应，其水平与胎龄无关[11]。VDBP是一种主要由肝脏产生的糖基化α-球蛋白，具有结合、转运循环中VD作用。而VDBP在败血症发生时，通过调控巨噬细胞、促进中性粒细胞趋化等多种作用，参与免疫炎症反应，还能够通过与血浆内毒素相结合而减轻机体损害[12]。研究表明，血清25-(OH)D及VDBP水平随着感染程度加重而下降[13]。败血症危重症患者较无败血症危重症患者血清25-(OH)D、VDBP均明显降低，且与不良预后相关[14]。还有研究显示，与健康新生儿相比，EOS新生儿脐血25-(OH)D、VDBP均明显降低[15]。本研究也证实，EOS组脐血25-(OH)D、VDBP均明显低于对照组，提示EOS早产儿脐血25-(OH)D、VDBP水平可作为早期预测EOS的重要指标。本研究还发现，EOS组出生后72 h时血清25-(OH)D、VDBP水平相较于对照组明显降低；而经有效抗感染治疗后，EOS组血清25-(OH)D、VDBP水平明显增高，可见提示此两者亦可用于评估EOS疗效。

进一步采用ROC曲线分析脐血VDBP、25-(OH)D、PCT、IL-6预测EOS的临床价值，结果显示，4种指标的曲线下面积分别为 0.784、0803、0.836、0.851，提示这4个指标均对预测早产儿EOS有较高价值。且PCT、IL-6曲线下面积大于25-(OH)D、VDBP，提示在诊断早产儿EOS上，脐血PCT、IL-6应用价值可能略优于25-(OH)D、VDBP。但有研究表明，脐血PCT、IL-6水平可由胎膜早破、低氧血症等非感染性疾病的影响而出现增高[16]。而目前尚未见25-(OH)D、VDBP水平受非感染因素影响而变化的报道，提示25-(OH)D、VDBP可能更加可靠，有待进一步研究确定。

综上所述，VDBP、25-(OH)D在EOS早产儿脐血明显降低，可用于早产儿EOS早期诊断及疗效评价的新指标，但它们与PCT、IL-6之间是否存在优势仍有待探讨。