宫颈癌组织中KGFR、TFPI-2的表达及临床意义

郭瑞玲(安阳市中医院妇产科，河南 安阳 455000)

近年来宫颈癌的发生率明显的上升，流行病学研究认为，我国宫颈癌的发病率可达274～483/10万人左右[1]。临床上宫颈癌的发生发展，能够导致患者无瘤生存时间的缩短，严重降低患者的生存质量[2]。

在研究宫颈癌的病情进展机制的过程中可以发现，癌细胞调控相关因子的改变，能够影响癌细胞的增殖、凋亡及分化等病理过程，进而促进宫颈癌的发生。角质细胞生长因子受体（KGFR）的表达能够通过激活络氨酸激酶，进而促进癌细胞内肿瘤相关信号通路的上调，增加了癌细胞增殖转录风险；组织因子途径抑制物-2（TFPI-2）是重要的丝氨酸蛋白抑制家族成员，其能够通过抑制癌细胞的增殖、促进癌细胞的凋亡，进而抑制早期恶性肿瘤的发生过程[3]。部分研究者报道了TFPI-2在胃癌或者食管癌患者病灶组织中的表达情况，认为TFPI-2的表达浓度的下降能够影响胃癌或者食管癌患者的病情转归，导致患者临床病理分期的进展[4，5]，但在宫颈癌患者中的研究不足。为了揭示KGFR、TFPI-2的表达与宫颈癌的关系，从而为临床上宫颈癌患者的临床诊疗提供参考，本次研究选取2016年1月至2018年1月我院保存的宫颈癌组织标本56例，探讨了不同肿瘤调控因子与宫颈癌病理学特征的相关性，报告如下。

1 材料与方法

1.1 组织标本 选取2016年1月至2018年1月我院保存的宫颈癌组织标本56例（宫颈癌组），同时选取正常宫颈组织35例（因子宫肌瘤或子宫腺肌症而行子宫全切术）作为对照组，两组受试者一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），见表1，纳入标准：⑴均经病理组织学确诊；⑵患者临床资料保存完整；⑶术前未行放化疗等治疗；⑷患者及家属知情同意。排除标准：⑴合并有其他恶性肿瘤者；⑵临床资料不完整。

表1 两组一般资料比较

1.2 检测方法 所有组织标本经石蜡包埋后作连续切片，厚度约为4μm，采用免疫组化链霉卵白素一生物素复合体法 (strep avidin-biotin complex，SABC法)染色，二氨基联苯胺(diamionben zidene，DAB)显色。KGFR、TFPI-2蛋白通用型二抗以及SP试剂盒和DAB显色盒均购自北京中杉金桥生物技术开发公司。以阳性片及PBS代替一抗分别作为阳性及阴性对照，高倍显微镜下观察KGFR、TFPI-2蛋白的表达情况，具体染色步骤严格按照SP试剂盒说明书进行操作。

1.3 结果判断 随机选取5个视野，每个视野计数100个细胞，胞质出现棕黄色为KGFR或TFPI-2表达阳性，阳性细胞占细胞总数的比例≥30%为阳性表达，否则为阴性表达。

1.4 统计学处理 统计分析采用SPSS 19.0软件，计量资料采用（）表示，比较使用t检验，计数资料比较使用χ2检验，相关性采用Spearman秩相关分析，以P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组中KGFR、TFPI-2阳性表达情况比较 宫颈癌组KGFR阳性表达率明显高于对照组 （P＜0.05），而TFPI-2阳性表达率明显低于对照组（P＜0.05）。见表2和图1。

表2 两组中KGFR、TFPI-2阳性表达情况比较

图1 免疫组化染色图

2.2 KGFR、TFPI-2表达与宫颈癌临床病理特征关系 KGFR阳性表达与宫颈癌TNM分期、分化程度有关（P＜0.05）；TFPI-2阳性表达与宫颈癌TNM分期、淋巴结转移有关（P＜0.05）。 见表 3。

2.3 相关性分析 将宫颈癌组织KGFR与TFPI-2表达进行相关分析，结果显示：KGFR与TFPI-2表达呈负相关（rs=-0.599，P＜0.05），见表 4。

3 讨论

在合并有高危HPV病毒感染的人群中，宫颈柱状上皮病变的风险可显著的上升，宫颈癌的发病率或者病死率等指标均明显恶化。特别是在经济条件差、多次流产病史或者过早性生活的患者中，宫颈癌的发病风险可进一步的上升[6，7]。现阶段临床上宫颈癌患者综合性治疗措施治疗后的病情缓解率仍然较低，5年内的病死率仍然超过了25%[8]。免疫学方面的治疗能够在宫颈癌的综合性治疗过程中发挥重要的作用，而本研究对于宫颈癌患者病情组织中KGFR、TFPI-2的分析研究，不仅能够为揭示宫颈癌的发病病因提供参考，同时还能够为宫颈癌的免疫方面的治疗提供理论靶点。

KGFR是生长因子家族成员，其羧基末端结构包含了4个重复性的络氨酸激酶区域，能够结合上皮细胞膜上的糖蛋白配体，促进癌细胞内第二信使的激活。KGFR对于癌细胞内的AKT或者MAPK信号通路的激活，能够上调癌细胞DNA的转录活性，导致癌细胞浸润能力的增强。部分研究者报道了KGFR的表达与宫颈癌的关系，认为KGFR能够导致宫颈患者治疗预后的恶化[9]，但对于EGFR的表达与宫颈癌患者临床病理特征的关系研究不足；TFPI-2是丝氨酸激酶家族成员，其对于宫颈上皮细胞周期的调控作用，能够稳定G0/S期比例，抑制癌细胞快速跨越G0期，并能够提高癌细胞的分化成熟能力。TFPI-2还能够影响到癌细胞的凋亡过程，通过激活细胞内的BCL-2蛋白的表达，进而促进癌细胞的凋亡[10]。部分研究者揭示了TFPI-2与恶性肿瘤的关系[11]，但相关临床病理特征的分析研究不足。

表3 KGFR、TFPI-2表达与宫颈癌临床病理特征关系

表4 相关性分析

免疫组化结果分析可以发现，KGFR在宫颈癌病灶组织中的表达阳性率明显的上升，而TFPI-2蛋白的表达阳性率明显的下降，提示KGFR、TFPI-2蛋白的异常表达均能够参与到宫颈癌的发生发展过程，通过荟萃分析不同的临床文献，笔者认为这主要与 KGFR、TFPI-2 的下列作用有关[12，13]：⑴KGFR的上升能够导致癌细胞的生物学特征的改变，导致癌细胞的浸润能力和增殖能力的提升；⑵TFPI-2的表达下降能够导致癌细胞的凋亡比例的下降，提高了癌细胞对于基底膜组织的侵袭能力。孙彦珍等[14]研究者也认为，在宫颈癌病灶组织中，TFPI-2蛋白的表达阳性率可平均下降35%以上，同时在合并有明显的宫旁组织浸润或者3年内病死率较高的患者中，TFPI-2蛋白的表达阳性率可进一步的下降。免疫组化染色分析可见，KGFR主要表达于宫颈癌上皮细胞异型性较为明显的区域，特别是在癌细胞质或者细胞核周边，KGFR的染色程度较深，推测KGFR的表达可能在影响癌细胞的异型性方面发挥了重要的作用。在探讨KGFR、TFPI-2的表达与宫颈癌患者临床病理特征的关系时可以发现在临床分期较晚或者癌细胞分化程度较低的患者中，KGFR的表达阳性率可明显的上升，提示了KGFR的表达能够显著影响宫颈柱状上皮细胞的分化成熟能力，同时KGFR的表达上升还能够导致癌细胞对于临近正常组织的浸润程度的加深，促进宫颈癌患者临床分期的进展；在临床分期较晚或者发生了淋巴结转移的宫颈癌患者中，TFPI-2的表达浓度显著的下降，提示了TFPI-2的下降对于宫颈癌患者临床病理特征的影响，这主要考虑由于TFPI-2的表达浓度下降能够导致癌细胞对于淋巴结内皮细胞的粘附能力的改变[15]。

综上所述，KGFR在宫颈癌患者中的表达明显的上升，而TFPI-2的表达明显的下降，二者的异常表达均能够影响到宫颈癌患者的临床病理特征的进展。后续临床研究可以增加对于KGFR、TFPI-2与宫颈癌患者临床预后的关系研究。