肿瘤及肿瘤基质细胞释放的外泌体对肿瘤耐药产生的影响

刘丹丹 许尔屹 赵伟华

恶性肿瘤疾病对人类健康有高度威胁，其患者存活时间较短，经常发生死亡事件。伴随临床医学技术的不断进步，恶性肿瘤疾病的治疗手段逐渐增多，其中大部分患者均会接受化疗治疗方案，通过治疗来延缓生存时间并改善预后状况。化疗药物耐药是恶性肿瘤疾病治疗过程中的主要难点之一，发生药物耐药后容易促进肿瘤细胞的复发及转移，进而危及其生命安全[1]。目前，部分国外研究提出外泌体在肿瘤耐药中发挥着重要作用，对外泌体实施处理或有助于改善耐药问题，但国内临床尚缺乏此方面的试验分析。文章通过整合国内外相关报道，对其研究现状进行综合分析，旨在进一步认识其影响作用。

1 外泌体概述

外泌体主要是指人体多类型细胞所分泌的囊泡，其直径多趋于40～130 nm，内含胞质生物活性物质丰富，主要包括蛋白质、DNA、mRNA等，而表面多为脂质物质。上世界80年代，国外研究学者首次发现该物质，并将其归为外排转铁蛋白受体范围，通过不断研究在首次发现4年后将其命名为外泌体。在研究初期，人们普遍认为该物质为清除胞内废物，但持续研究表现出其转运功能在人体生物学方面可起到重要作用。在释放外泌体的细胞中，肿瘤及肿瘤基质细胞也较为常见，其释放的外泌体可直接控制疾病的发生与进展，通过检测外泌体能够辅助恶性肿瘤的诊断及预后评估[2]。李栋等[3]研究分析了 TWEAK 刺激后巨噬细胞外泌体中miRNA-7的表达水平，试验结果表示miRNA-7 在 TWEAK 刺激巨噬细胞分泌的外泌体中发挥重要作用，可通过抑制上皮性卵巢癌细胞中EGFR信号通路抑制其侵袭和迁移。颜晓慧等[4]报道分别收集26例健康成人、29例肺结核患者与94例肺癌患者为试验对象，提取其血清外泌体miRNA并开展临床检验，研究结果显示出血清外泌体miR-21有助于肺癌的临床检出，并提出将其作为诊断标志物可积极改善肺癌的诊断效果。吴凡等[5]报道评价了三阴乳腺癌细胞受脂肪干细胞来源外泌体的影响情况，试验分析表现脂肪干细胞来源外泌体能够对三阴乳腺癌细胞迁移形成明显促进作用，但并未影响其细胞增殖，并且在阿霉素耐药方面无显著作用。近年来，部分国外研究表示肿瘤及肿瘤基质细胞所释放外泌体与肿瘤化疗药物耐药有一定程度相关性，并认为开展此项研究有助于改善肿瘤耐药问题，但国内研究在此方面仍较为鲜见。许乘凤等[6]研究中分析了外泌体在乳腺癌细胞间耐药信息的传递作用，分别选择了MCF-7/ADR与MCF-7细胞株，观察阿奇霉素药物在肿瘤细胞中的浓度变化，并记录培养后P-gp与MDR1基因等表达情况，研究结果表现外泌体对乳腺癌细胞有确切的耐药信息传递作用，可促使敏感细胞获得耐药性，并不断传递P-gp，主要通过mRNA与蛋白形式完成传递。

2 肿瘤细胞释放外泌体对肿瘤耐药的影响

2.1 肿瘤细胞释放外泌体对肿瘤耐药的参与作用

肿瘤细胞自身所释放外泌体可将miRNAs转运至受体敏感细胞中，因其转运可对肿瘤耐药形成诱导作用或增强作用，并且在此过程中外泌体也对miRNAs形成了保护性作用。有报道表示肺腺癌耐药细胞中的外泌体表达增强，而其中miR-21、miR-33水平明显上升，将此外泌体作用于药物敏感细胞后会明显诱导细胞耐药[7]。

2.2 TD-exosomes运转对肿瘤耐药的参与作用

TD-exosomes对多药耐药蛋白质进行转运后，使敏感肿瘤细胞出现耐药表现，影响药物外排进而不断抑制药物作用，在依靠外泌体转运时便会直接形成降敏效果，形成肿瘤耐药诱导或增强作用[8]。通常情况下，恶性肿瘤进展时可形成不同的转运系统，将介导药物自胞内排向胞外，该种转运体主要为胞内转运蛋白，处于细胞内体、多囊泡小体界膜中。当前研究已证实该转运系统对常用化疗药物作用均有影响作用，在乳腺癌细胞、前列腺细胞等试验中均有证实。另外，TD-exosomes对肿瘤细胞同抗癌靶向药物的结合作用也有影响，此类影响也会形成肿瘤耐药情况[9]。例如，在血液系统肿瘤中经常应用的化疗药物利妥昔单抗，主要通过细胞表面CD20通气药物Fc段相结合来形成毒性细胞清除作用，但恶性肿瘤释放外泌体中存在较多CD20，在用药过程中不断形成竞争性结合作用，进而减轻药物作用效果[10]。

3 肿瘤基质细胞中外泌体对肿瘤耐药的影响

3.1 肿瘤及肿瘤基质细胞相互作用对肿瘤耐药的影响

现阶段临床已证实评估患者预后状况过程中肿瘤微环境是必不可少的影响因素之一，其含有细胞种类较多，包括上皮细胞、免疫细胞、纤维细胞等等。研究报道证实食管癌细胞耐药可受到其miR27纤维细胞的影响，非小细胞肺癌患者在其EGFR突变影响下导致吉非替尼药物耐药状况不同，而吉非替尼耐药者的CAF平足蛋白表达显著较高[11]。

3.2 肿瘤基质细胞释放外泌体对肿瘤耐药的影响

肿瘤基质细胞所释放外泌体也会诱导或增加肿瘤耐药，现阶段国外研究已发现了多种基质细胞释放外泌体对肿瘤耐药形成的影响作用。人间充质干细胞释放外泌体对多种通路产生活化作用，从而影响到5-氟尿嘧啶用药，诱导胃癌肿瘤细胞耐药而降低药用效果。成神经细胞瘤可收到单核细胞来源外泌体的影响，导致顺铂药物耐药性形成或增加。有研究认为，肿瘤基质细胞释放外泌体不仅对其肿瘤耐药形成影响，通过抑制其活性可积极避免耐药问题，增强细胞对药物的敏感性，而改善患者预后效果[12]。

4 外泌体与逆转肿瘤耐药的研究分析

化疗药物耐药一直是恶性肿瘤疾病治疗的难点之一，发生药物耐药后容易促进肿瘤细胞的复发及转移，进而危及其生命安全。近年研究提出外泌体在肿瘤耐药中发挥着重要作用，对外泌体实施处理或有助于改善耐药问题。现阶段研究中外泌体对恶性肿瘤耐药的影响分子较多，而此类报道均认为通过对外泌体进行抑制处置可逆转其耐药问题。有研究对乳腺癌细胞应用贝沙罗汀与没药甾酮进行处理，明显抑制了乳腺癌耐药蛋白表达，从而影响其耐药转运，阻滞外泌体释放，进而提升药物作用。间充质干细胞释放外泌体实施转染法处理以提高其anti-miR9表达，经处理后提高多形性成胶质细胞瘤细胞中miR9水平，从而影响到替莫唑胺对肿瘤的耐药性。

5 结论

恶性肿瘤疾病对人类健康有高度威胁，其患者存活时间较短，经常发生死亡事件。伴随临床医学技术的不断进步，恶性肿瘤疾病的治疗方法逐渐增多，其中大部分患者均会接受化疗治疗方案，通过治疗来延缓生存时间并改善预后状况。化疗药物耐药是恶性肿瘤疾病治疗过程中的主要难点之一，发生药物耐药后容易促进肿瘤细胞的复发及转移，进而危及其生命安全。获得性耐药一直是恶性肿瘤中的重点研究课题，其发生机制极为复杂，肿瘤及肿瘤基质细胞来源外泌体对其有重要影响作用，不仅能够对耐药分子形成运转传递，也直接参与到肿瘤耐药中，通过对此类外泌体形成抑制作用，必然能够逆转肿瘤耐药问题，更有效的发挥靶向治疗效果。现阶段，国内临床尚较缺乏此类试验研究，肿瘤医师在日后工作中还需加强对其研究深度，为克服肿瘤耐药形成有利支持。