香椿不同部位药理作用研究

赵天会

香椿(Toona sinensis),别名椿树, 属于特有珍贵速生树种，具有很高的经济价值，包括食用价值、药用价值等[1]，香椿的叶、果实、皮、芽、根均可作为中药材[2]，现代药理学表明[3]，香椿叶具有抗菌、抗炎、镇痛、降血糖、抗癌、降血压、抗氧化、抗凝血、增强免疫等作用，本文分别对香椿不同药用部位的提取液进行了抗炎、镇痛研究。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 药品与实验动物 香椿叶、子、皮干燥产物购置于药店，产地中国安徽亳州，为秋季产物。盐酸地塞米松(批号20170442)、二甲苯、70%乙醇、阿司匹林(批号20161028)、冰醋酸、蒸馏水；双人双面操作台、滤纸片、纱布、6 mm打孔器、提取瓶、冷凝管、提取管、500 ml烧杯，量筒、50 ml容量瓶。

小鼠，体重20±2 g，雌雄混搭，购自吉林大学实验动物中心。

1.1.2 器材 电子天平(AL204-IC，美特勒-托利)；八两装中药粉碎机(LG08A，瑞安市百姓药机械厂)；循环水式多用真空泵(SHB-III,郑州长城科工贸有限公司)；旋转蒸发仪(R1001-VN,州长城科工贸有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 香椿不同药用部位有效成分的提取 (1)香椿叶有效成分的提取：香椿叶预处理：把购买得到的香椿叶检出其中腐烂发黄的叶片，用清水冲洗晾干。采用醇提法提取有效成分：将预处理成功后的香椿叶精密取200 g，用剪刀剪碎，加入索氏提取器中，加入浓度为70%的乙醇600 mL，回流提取3次，采用循环水式多用真空泵抽滤，收集滤液。减压蒸馏：用旋转蒸发仪蒸发香椿叶提取液中的乙醇，设置水的温度为40 ℃，待乙醇不再蒸发时，停止蒸发，倒出旋转瓶内剩余的浓缩香椿叶提取液，冷藏备用。(2)香椿子、皮有效成分的提取：提取方法参考1.2.1.1。

1.2.2 抗炎作用试验 (1)动物分组：小鼠40只(20±2.0 g)，雌雄混搭随机分成5组，自由采食饮水，分别为空白对照组，阳性对照组(注射用地塞米松)，香椿叶实验组，香椿子实验组，香椿皮实验组，每组8只。(2)二甲苯致小鼠耳廓肿胀法：采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法[4-5]，将分组后的小鼠自由采食饮水适应性喂养3 d ，空白对照组灌胃生理盐水0.2 mL/10 g，实验组分别灌胃香椿叶，香椿子，香椿皮的提取液，0.2 mL/10 g，阳性对照组腹腔注射地塞米松 1 mL。每日早晚灌胃2次，连续灌胃3 d，末次给药30 min后，用微量进样器抽取二甲苯0.03 mL，在小鼠右耳前后两面分别涂抹，每面各0.015 mL，左耳不做任何处理。(3)统计方法：1 h后观察小鼠右耳肿胀变化，脱臼处死，延耳廓基线剪下两耳，用6 mm直径打孔器在左右耳对称部位打下圆耳片，称量各鼠耳，并记录质量，按照公式计算香椿叶、子、皮提取物实验组和地塞米松药物对照组肿胀度和肿胀抑制率[左右耳片重量差值为肿胀度，肿胀率=(右耳重量-左耳重量)/左耳质量*100%，肿胀抑制率=(空白对照组肿胀度-试验组肿胀度)/空白对照组肿胀度]。

1.2.3 香椿不同药用部位提取物镇痛作用试验 动物分组：分组方法同1.2.2.1。(2)冰醋酸致小鼠扭体试验法：采用冰醋酸致小鼠扭体试验法[6]，将分组后的小鼠自由采食饮水适应性喂养3 d之后,空白对照组灌胃生理盐水0.2 mL/10 g，实验组灌胃香椿叶，香椿子，香椿皮的提取液，0.2 mL/10 g，药物对照组腹腔注射1 mL阿司匹林，每日2次，连续3 d，末次给药30 min后，各组腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.1 mL/10 g。(3)统计方法：灌胃结束后，记录各小鼠第一次出现扭体反应的时间及30 min后，记录各组小鼠在15 min内的扭体次数，得到各组小鼠的平均扭体次数，按照公式计算实验组和对照组的镇痛抑制率。(镇痛抑制率=(对照组扭体次数 - 给药组扭体次数)/对照组扭体次数)。

2 结果与分析

2.1香椿不同药用部位提取物对二甲苯所致小鼠耳肿胀模型的影响

表1 不同实验组对小鼠耳廓肿胀度的影响

注：*表示与空白对照组相比差异显著(P<0.05)，#表示与阳性对照组相比

差异显著(P<0.05)

香椿不同药用部位提取物对二甲苯所致小鼠耳肿胀模型的影响结果见表1。从表1中看出，药物对照组、香椿叶实验组、香椿子实验组、香椿皮实验组肿胀度抑制率为别为36.41%，35.17%，34.94%，25.49%，香椿叶实验组平均肿胀度为2.30±0.81，显著低于空白对照组，与药物对照组相比差异不显著；香椿子实验组平均肿胀度为2.31±0.64，显著低于空白对照组，与药物对照组相比差异不显著；香椿皮实验组平均肿胀度为2.66±0.86，显著低于空白对照组，显著高于药物对照组；香椿子实验组，香椿皮实验组，香椿叶实验组与空白对照组比较有统计学意义(P<0.05)。由此可见，香椿不同部位对小鼠耳廓肿胀度和肿胀率均具有一定的作用，香椿叶与香椿子的抗炎作用明显高于香椿皮的抗炎作用，三者的抗炎作用均弱于地塞米松的抗炎效果。

2.2香椿不同药用部位提取物对冰醋酸所致小鼠疼痛的影响

香椿不同药用部位提取物对冰醋酸所致小鼠疼痛的影响结果见表2。

表2 不同试验组对小鼠扭体的影响

注：*表示与空白对照组相比差异显著(P<0.05)，#表示与阳性对照组相比差异显著(P<0.05)

从表2中看出，香椿叶实验组、香椿子实验组、香椿皮实验组、药物对照组镇痛率为别为53.83%，21.13%，51.94%，57.82%，香椿叶实验组第一次扭体反应出现的时间为6.5±2.8；在15 min内的扭体次数为14.70±10.17，与空白对照组相比差异显著；与药物对照组相比差异不显著；香椿子实验组第一次扭体反应出现的时间为5.8±2.3；在15 min内的扭体次数为27.11±14.11，与空白对照组相比差异不显著，与药物对照组相比差异显著(P<0.05)；香椿皮实验组第一次扭体反应出现的时间为6.7±2.1；在15 min内的扭体次数为15.30±11.96，与空白对照组相比差异显著，与药物对照组相比差异不显著；香椿叶实验组、香椿皮实验组与空白对照组比较差异显著(P<0.05)，香椿叶、香椿皮、香椿子实验组进行比较，第一次出现扭体反应的分别是香椿子实验组、香椿皮实验组、香椿叶实验组；从在15 min内总的扭体次数来看，香椿子实验组的扭体次数最多，与香椿皮实验组、香椿叶实验组相比差异显著(P<0.05)。

3 讨 论

3.1由试验数据可得，香椿不同部位的抗炎作用顺序为香椿叶、香椿子、香椿皮，但是香椿叶与香椿子的抗炎作用明显高于香椿皮的抗炎作用，三者的抗炎作用均弱于地塞米松的抗炎效果，根据香椿叶、子、皮的

成分来看，抗炎作用可能与各部位中存在的黄酮化合物、萜类化合物有关[7]。

3.2香椿不同药用部位提取物对冰醋酸所致小鼠扭体反应的抑制作用来确定香椿不同药用部位的镇痛作用。以第一次出现扭体时间和在15 min总共扭体次数来评价香椿不同药用部位提取物的镇痛作用，结果得出：香椿叶与香椿皮的镇痛效果高于香椿子的镇痛效果，三者的镇痛作用均弱于阿司匹林镇痛作用，镇痛作用可能与香椿不同药用部位中存在的黄酮类化合物有关[8]。

3.3在试验中验证了香椿不同药用部位的抗炎镇痛作用；中药的抗炎机制十分复杂，具有多途径多环节的特点，在本次试验中由于对不同药用部位的提取物没有进行分离单独测其抗炎镇痛作用，不能确定是其中某个单体发挥抗炎镇痛作用，同时香椿不同药用部位抗炎镇痛机制尚不明确，可能与清热散血消肿等功效有关，尚待进一步研究阐明，因此应该加强多学科交叉研究，更深更全面的研究香椿抗炎镇痛的作用机制。