部分猪场猪瘟和蓝耳病抗体检测与分析

刘保红

（河南省郑州市中牟县畜牧中心451450）

猪瘟和蓝耳病是我国猪场多发的传染性疫病，严重阻碍我国养猪业的健康发展[1，2]。随着我国养猪业不断向集约化、规模化方向发展，猪的养殖密度越来越高，猪群的购入或外调频率逐渐频繁，导致疫病发生概率也相应提高，目前对于猪瘟、蓝耳病等传染性疫病的防控措施主要以预防为主。对猪群的猪瘟和蓝耳病抗体进行监测，有利于了解猪场猪瘟和蓝耳病疫苗免疫效果和及时调整免疫程序，对相应疾病防控措施的制定有重要的指导意义[3]。基于此，于2017年4～8月应用ELISA检测技术对中牟县部分猪场的629份猪血清样品进行猪瘟和蓝耳病抗体水平监测，旨在初步了解当地猪场对猪瘟和蓝耳病的防控效果。

1 材料与方法

1.1 相关定义

猪瘟抗体阳性猪：用猪瘟阻断ELISA试剂盒检测为猪瘟抗体阳性的血清对应的猪只。

猪蓝耳病抗体阳性猪：用蓝耳病抗体检测试剂盒检测为猪蓝耳病抗体阳性的血清对应的猪只。

猪瘟抗体合格场：猪瘟抗体阳性率大于等于70%的猪场。猪蓝耳病抗体合格场：猪蓝耳病抗体合格率大于等于70%的猪场。

1.2 抽样方案设计

采用两阶段随机抽样结合便利抽样方法进行抽样方案设计。

第一阶段选择规模猪场采用便利抽样方式选择6个规模化猪场为研究对象。

第二阶段分别计算每个规模猪场的抽样数量。规模场内猪只数量计算按估计流行率的方法[4]计算，按95%置信水平，预期阳性率90%（猪瘟和蓝耳病采用同样的预期阳性性），7%的可接受误差，群体数量均按无穷大，计算公式为，则场群内需抽取不少于70只猪的全血。所有猪场按照配额方法随机选择仔猪（1～3周龄）、保育猪（4～10周龄）、育肥猪（11～20周龄）和繁殖母猪（＞20周龄）。

1.3 血清样品

根据1.2设计的抽样方案，最终本次研究获得来自上述6个规模猪场的629份猪血清猪场编号分别为A、B、C、D、E和F，各猪场血清样品数量分别为80、92、94、76、121和166份，从前腔静脉采集血液5ml/头，实验室常规方法分离血清，保存于-20℃，待检。

1.4 主要试剂盒

本次研究所用的猪瘟阻断ELISA试剂盒 （批号：20161207）和蓝耳病抗体检测试剂盒（批号：20170123）分别购于武汉科前生物科技有限公司和荷兰Biochek公司。

1.5 检测方法及判定标准

试验检测方法和判定标准均参考试剂盒说明书进行操作和判定。

1.6 数据分析

用Excel整理采集到的数据，用SPSS23进行统计学卡方检验。

2 结果与分析

2.1 中牟县部分猪场猪瘟抗体检测结果

本次研究共对中牟县6个猪场的629份血清样品进行猪瘟抗体检测，结果显示，517份血清样品检测为猪瘟抗体阳性，平均阳性率为82.19%，达到了农业农村部高于70.0%的要求，说明受免疫得猪群得到较好保护，但不同猪场猪瘟抗体阳性率绝对值存在一些差异，为66.25%～91.56%，群合格率为83.3%（1/6），从总体统计学检验来看差异也不显著（经卡方检验，p≥0.05），但A猪场猪瘟抗体阳性率稍低于70.0%，为66.25%；通过分析不同发育阶段猪群猪瘟免疫效果发现，仔猪、保育猪、育肥猪和繁殖母猪猪瘟抗体阳性率分别为86.55%、69.44%、83.22%和87.0%，总体而言，各阶段猪瘟抗体阳性率之间差异不显著（经卡方检验，p≥0.05），但从保育猪和育肥猪猪瘟抗体检测情况看，A场、B场和D场存在一些合格率低于70.0%的情况。

2.2 中牟县部分猪场蓝耳病抗体检测结果

通过对中牟县6个猪场的629份血清样品进行蓝耳病抗体检测，结果显示，584份血清样品检测为蓝耳病抗体阳性，其平均阳性率为92.85%，说明当地猪群蓝耳病免疫情况较好，猪群能得到较好的保护；不同猪场蓝耳病抗体阳性率存在一定差异，但均在85.0%以上，且群合格率为100%，从总体统计学检验来看差异也不显著（经卡方检验，p≥0.05）；通过分析不同发育阶段猪群蓝耳病抗体阳性率差异，与猪瘟抗体阳性率类似，保育猪群抗体阳性率相对较低，为82.63%，而仔猪和育肥猪群抗体阳性率相对较高，分别为89.92%和91.61%，繁殖母猪抗体阳性率最高，为97.30%。但总体来说，各阶段猪之间猪瘟抗体阳性率之间差异不显著（经卡方检验，p≥0.05）。

3 讨论

本次于2017年4～8月对中牟县部分猪场进行猪瘟和蓝耳病抗体水平检测，旨在通过检测了解当地猪场猪瘟和蓝耳病的免疫效果，为疫病防控措施的制定提供参考。检测结果显示，被检测的629份猪血清样品中分别有519份和584份样品检测为猪瘟和蓝耳病抗体阳性，平均阳性率分别为82.19%和92.85%，猪瘟和蓝耳病抗体合格率均高于国家制定标准（＞70.0%），而通过调查也发现，这些规模化猪场场长们对猪瘟和猪蓝耳病的免疫比较重视，虽然检测场数不是太多，但从侧面也反映出该地区受免疫猪群维持较高的免疫保护水平。通过分析不同猪场这2种传染病抗体检测差异发现，6个不同猪场猪瘟抗体阳性率分别为66.25%、82.60%、82.98%、72.36%、85.12%和91.56%；蓝耳病抗体阳性率分别为85.0%、95.65%、89.36%、88.15%、93.39%和92.77%，只有A猪场猪瘟抗体合格率低于国家制定标准，且该猪场蓝耳病抗体合格率也稍低于其他被检猪场，其原因可能与该猪场饲养水平较低或疫苗免疫程序不规范有关；通过分析不同生长发育阶段猪群这2种传染病血清抗体阳性率发现均为保育猪阶段猪群抗体阳性率较低，分别为69.44%（猪瘟）和82.63%（蓝耳病），甚至部分猪场保育猪猪瘟血清抗体阳性率不足50.0%，说明此阶段猪群可能容易感染猪瘟，应加强免疫。值得注意的是，此次研究仅对血清样品进行抗体检测，无法区分是野毒感染或疫苗接种所产生的抗体，需要进一步试验以确定是否为野毒感染。