复方牛磺酸滴眼液抗眼疲劳实验研究

由 东 ，刘馨湄 ，才 凤

（1.辽宁省药品认证中心，辽宁 沈阳 110036； 2.辽宁省中医药研究院，辽宁 沈阳 110034；3.辽宁省食品检验检测院，辽宁 沈阳 110015）

眼疲劳会引起眼干、眼涩、眼酸胀、视物模糊，甚至视力下降。维生素与眼疾的发生及视力的好坏关系密切，用眼过多者，需要更多的维生素及矿物质，合理补充眼睛所需营养素，对于保护眼睛、防治眼疾、提高视力非常重要。牛磺酸是一种特殊的高渗透性氨基酸类物质，对视网膜损伤和视细胞凋亡有明显的保护作用[1－3]。复方牛磺酸滴眼液主要由牛磺酸、盐酸萘甲唑林、维生素B6、马来酸氯苯那敏、透明质酸钠和氯化钠组成，用于防治眼疲劳及过敏等。本研究中主要考察了复方牛磺酸滴眼液对紫外线辐射所致家兔睑结膜、球结膜和角膜炎性损伤的防护作用，以及对家兔眼分泌物和眼睫状肌张力的影响。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 动物、仪器与试药

实验动物：健康成年家兔30只，普通级，日本大耳白种，体质量为 2.1～2.7 kg，雌雄兼用，由中国医科大学第二临床学院医学实验动物中心提供，合格证号为SCXK（辽）2003－0013。所有家兔均自由采食和摄水。本研究严格符合眼科与视觉研究中使用动物的科学声明。

仪器：紫外灯，功率为30 W，波长为254 nm，由沈阳市东陵灯具厂生产。

试药：复方牛磺酸滴眼液，规格为每支10 mL，其成分为牛磺酸、盐酸萘甲唑林、维生素B6、马来酸氯苯那敏，含量分别为2%，1%，0.5%（以牛磺酸含量计），辽宁省药物研究院提供，批号为20050513；空白溶剂为透明质酸钠和氯化钠；萘敏维滴眼液，规格为每支10 mL，其成分为盐酸萘甲唑林、马来酸氯苯那敏、维生素B12，含量为0.02%（以盐酸萘甲唑林计），山东博士伦福瑞达制药有限公司生产，批号为20040302。

1.2 方法

1.2.1 分组

将家兔按体质量随机分为5组，各6只，即空白对照组（等容量溶剂，A组），萘敏维滴眼液组（0.02%，B组），复方牛磺酸滴眼液大剂量组（2.0%，C1组）、中剂量组（1.0% ，C2组）、小剂量组（0.5% ，C3组）。

1.2.2 模型建立与试验

兔眼紫外线辐射损伤模型[4－5]：取兔夹固定家兔，将波长为254 nm的紫外灯置兔眼前40 cm进行照射，照射强度为 5 000 μW ／cm2。第 1天上午照射 3 h，下午照射1 h，第2天、第 3天上午照射 2 h，下午照射2 h，3 d共照射12 h。末次照射后次日，开始滴眼药，连续给药 6 d。每天滴眼药 4次，每次 1只眼 1滴（0.05 mL），间隔2 h。自然光下，肉眼观察紫外灯照射前及照射后第3，6天睑结膜、球结膜和角膜的受损程度，以及眼分泌物。用分级计分法观察与统计结膜、角膜等辐射损伤程度，损伤评分标准参考文献[6]。

家兔眼睫状肌张力模型[7－9]：随机取健康家兔，摘取眼球，置K－H营养液中，除去晶状体和玻璃体，于巩膜和睫状肌间剥离，游离睫状肌，肌韧带与巩膜相连。将睫状肌连同巩膜纵向剪成约4 mm宽的肌条，剪断距离睫状肌正端约3 mm处巩膜，去掉多余的巩膜。将2条睫状肌条用丝线串连，上下两端串线，下固定于盛有K－H营养液的麦氏浴管底部，上连于换能器杠杆上，加负荷100 mg，恒温30℃，通氧气，用记录仪记录睫状肌收缩活动，温育约1 h，待肌张力稳定后，麦氏浴管中放19 mL K－H营养液，加空白溶剂(A组)、0.02%萘敏维滴眼液(B组)或2%复方牛磺酸滴眼液(C组)1 mL，终浓度即为原眼液被稀释20倍的浓度，观察睫状肌在药物作用下的张力。

1.2.3 统计学处理

2 结果

2.1 对兔眼紫外线辐射损伤的防护作用

家兔眼经紫外线辐射后，睑结膜和球结膜均呈现充血、水肿等炎性反应，炎性反应随辐射剂量的增加而加重，复方牛磺酸滴眼液呈现显著的保护作用（P＜0.05）；眼角膜受长时间紫外线辐射后，出现散在浑浊或半透明区，给药各组眼角膜的损伤明显减轻（P＜0.01）；经紫外线辐射后，从外观所见兔眼分泌物增加，与空白对照组相比，眼分泌物均明显少于给药各组。详见表1。

表1 对家兔眼紫外线辐射损伤的保护作用试验结果（s，分，n＝6）

表1 对家兔眼紫外线辐射损伤的保护作用试验结果（s，分，n＝6）

注：与空白对照组比较， P ＜0.01， P ＜0.05。

组别 给药剂量（%） 睑结膜损伤程度 球结膜损伤程度A组B组C1组C2组C3组－0.02 2.0 1.0 0.5给药前2.40 ± 0.52 2.40 ± 0.52 2.30 ± 0.48 2.30 ± 0.67 2.27 ± 0.65 3 d 2.30 ± 0.48 1.30 ± 0.48 1.10 ± 0.57 2.00 ± 0.67 1.80 ± 0.79 6 d 1.80 ± 0.42 0.80 ± 0.63 0.30 ± 0.48 1.10 ± 0.88 1.30 ± 0.82给药前2.25 ± 0.45 2.30 ± 0.67 2.40 ± 0.52 2.40 ± 0.69 2.30 ± 0.48 3 d 2.20 ± 0.47 1.30 ± 0.82 1.20 ± 0.63 1.50 ± 0.53 1.90 ± 0.57 6 d 1.70 ± 0.48 0.90 ± 0.74 0.20 ± 0.42 0.60 ± 0.69 1.30 ± 0.67组别 给药剂量（%）A组B组C1组C2组C3组眼角膜损伤程度 眼分泌物变化－0.02 2.0 1.0 0.5给药前2.50 ± 0.53 2.40 ± 0.52 2.40 ± 0.52 2.40 ± 0.69 2.60 ± 0.52 3 d 2.20 ± 0.42 1.20 ± 0.63 1.00 ± 0.67 1.40 ± 0.69 1.60 ± 0.52 6 d 1.72 ± 0.48 0.52 ± 0.53 0.40 ± 0.52 0.70 ± 0.48 0.90 ± 0.57给药前2.50 ± 0.53 2.60 ± 0.52 2.40 ± 0.69 2.50 ± 0.53 2.40 ± 0.69 3 d 2.20 ± 0.63 1.60 ± 0.52 1.30 ± 0.67 1.80 ± 0.63 1.90 ± 0.57 6 d 1.60 ± 0.52 0.60 ± 0.52 0.40 ± 0.52 0.70 ± 0.48 1.10 ± 0.74

2.2 对家兔眼睫状肌张力的影响

给予复方牛磺酸滴眼液后，睫状肌张力逐渐降低，5 min最大下降(3.62±0.61)mm，详见表 2。

表2 对家兔眼睫状肌张力的影响试验结果

3 讨论

目前，眼科常用消炎药为皮质激素类或非甾体激素类滴眼剂，前者副作用较大，长期应用可导致白内障、青光眼等严重并发症[10]，后者虽无严重副作用，但有一定的刺激性[11]。马来酸氯苯那敏为H1受体拮抗剂，对由组织胺引起的渗出、水肿有较强的抑制作用，广泛用于过敏及其他炎症的治疗[12]。本研究中将副作用极小的复方牛磺酸滴眼液应用于动物实验，观察其消炎作用和对眼睫状肌张力的影响，验证其是否具有抗眼疲劳作用。

根据视疲劳的临床症状和电光性眼炎动物模型实验报道[13－15]，用家兔经过多次试验确定紫外线辐射的剂量、时间和距离，建立视疲劳动物模型。结果表明，复方牛磺酸滴眼液能显著防护兔眼睑结膜、球结膜和角膜的炎性损伤，拮抗紫外线辐射所致眼分泌物增多的作用较强，并成一定的量效关系，具有明显的降低兔眼睫状肌张力作用。

综上所述，复方牛磺酸滴眼液具有明显的抗眼疲劳作用，为治疗眼疲劳的适应证提供了实验室依据。