143株肺炎链球菌的临床分布及耐药性分析

郭晓艳，康运凯

(郑州人民医院 检验科，河南 郑州450003)

肺炎链球菌是社区获得性肺炎的常见致病菌之一。肺炎链球菌寄居在人的上呼吸道，是大叶性肺炎、支气管肺炎的病原菌，还可引起中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑膜炎和菌血症等。肺炎链球菌的侵袭力主要是荚膜，失去荚膜其毒力减弱或丧失，其溶血素、神经氨酸酶也是主要致病因子[1]。针对肺炎链球菌的感染，青霉素一直是治疗的首选药物，此外，阿莫西林、头孢菌素类也可用于治疗青霉素敏感的肺炎链球菌引起的感染[2]。近年来，由于抗生素的不合理运用，对青霉素耐药的肺炎链球菌(PRSP)逐年增多，因此必须根据药敏试验结果合理选择抗菌药物。现对本院2015年1月至2016年12月临床分离的143株肺炎链球菌的临床分布及耐药性进行回顾性分析，为临床合理用药提供可靠依据。

1 材料与方法

1．1菌株来源标本收集自2015年1月1日至2016年12月31日从本院门诊及住院患者各标本中(包括痰液、血液、鼻咽拭子等)分离的肺炎链球菌菌株，剔除同一患者相同部位的重复分离菌株。质控菌株为肺炎链球菌ATCC49619。

1．2试剂与仪器分离培养基为郑州安图生物科技有限公司的哥伦比亚血琼脂平板。采用法国梅里埃公司VITEK-2Compact全自动微生物分析仪进行细菌鉴定。药敏纸片及E-test试验条均购自英国OXOID公司。

1．3试验方法标本的采集、细菌的分离培养根据卫生部《全国临床检验操作规程》第3版进行操作。将标本接种于哥伦比亚血琼脂平板，置于35℃、含5%CO2的恒温箱培养24 h。观察菌落，挑取α溶血、中间有凹陷的透明小菌落或粘液型菌落进行革兰氏染色，若显微镜下为矛头状成双排列且有荚膜，可做optochin纸片试验及胆汁溶菌试验，如果抑菌圈直径≥14 mm，胆汁溶菌试验阳性可确定为肺炎链球菌。采用法国梅里埃公司VITEK-2Compact全自动微生物分析仪进行细菌鉴定，采用K-B纸片琼脂扩散法对待检细菌进行药敏试验，采用2016版CLSI标准[3]对结果进行判读。

1．4统计分析采用WHONET5.6软件进行数据分析。

2 结果

2．1标本种类分布

临床分离的143株肺炎链球菌主要来源于痰液标本，构成比为83.9%；其次是血液和鼻咽拭子，构成比分别为6.3%和4.9%(表1)。

表1 临床分离的肺炎链球菌标本分布

2.2肺炎链球菌临床分布

临床分离的肺炎链球菌主要来源于儿科和呼吸内科，构成比分别为23.8%和17.5%；其次是神经内科和肿瘤内科，构成比分别为11.9%和11.2%(表2)。

表2 肺炎链球菌感染临床分布

2.3药敏试验结果

根据CLSI2016版判读标准，药敏结果显示：肺炎链球菌对复方新诺明、红霉素、克林霉素、四环素的耐药率比较严重，均在80%以上；对青霉素的耐药率2015年为1.7%，2016年为2.4%；对左氧氟沙星、美罗培南的耐药率均在20%以下；未发现对万古霉素、利奈唑胺、利福平耐药的菌株(表3)。

表3 肺炎链球菌对常用抗菌药物的耐药率分析

3 讨论

肺炎链球菌是引起社区获得性肺炎的常见病原菌，该菌也可导致败血症及化脓性脑膜炎，由于临床抗菌药物的广泛应用以及该菌在体外生存能力较弱等因素，导致该菌的临床分离率较低，尤其是脑脊液中阳性率更低(由表1可知)，因此标本的留取显得尤为重要，标本一定要在抗菌药物使用之前采集，并要及时送检。

从表2可以看出临床分离的肺炎链球菌主要来源于儿科和呼吸内科(本院呼吸内科主要以老年人为主)，这可能与儿童和老年人免疫力均较低有关。

1942年青霉素被应用于临床，在很长一段时间内该药一直是治疗肺炎链球菌感染的敏感药物，直到1974年，对青霉素不敏感的脑膜炎株首次被美国报道[4]。在对青霉素治疗脑膜炎株失败的实验数据和临床经验的基础上建立了青霉素耐药的定义[5,6]。由于血脑屏障，静脉注射后，血液中的青霉素浓度应该高于脑脊液中的浓度，因此对于青霉素耐药性的定义非脑膜炎株应该区别于脑膜炎株[6]。2008年CLSI发布了新的标准，此标准建立在对非脑膜炎株成功治疗的案例上[7]。本院分离的肺炎链球菌非脑膜炎株对青霉素的耐药率处于低水平，可以作为临床上治疗颅外肺炎链球菌感染的首选药物。

临床上大环内脂类抗菌药物的广泛使用，使肺炎链球菌对大环内脂类耐药率迅速增高，国内报道的肺炎链球菌对红霉素的耐药率高达89.4[8]，由表3可以看出，肺炎链球菌对红霉素的耐药率为90%以上；肺炎链球菌对复方新诺明、克林霉素、四环素的耐药率处于较高水平，均在85%以上，故临床上治疗肺炎链球菌的感染应慎选这四种药物；肺炎链球菌对阿莫西林/克拉维酸、左氧氟沙星、美罗培南的耐药率均在25%以下；未发现对万古霉素、利奈唑胺、利福平耐药的菌株。

肺炎链球菌是社区获得性肺炎的重要致病菌之一，随着抗菌药物的广泛使用，该菌对抗菌药物的耐药性呈现上升的趋势。微生物室应及时准确的出具细菌培养和药敏试验结果，为临床合理使用抗菌药物提供可靠依据。