冷凝集导致血常规结果失真的处理方法比较

吉黎

（成都市第六人民医院检验科 四川 成都 610051）

利用全自动血细胞进行血常规分析是现代医院最基本的一项血液检查[1]，其检测具有高效、快速、方便的特点，大大提高了结果的及时性和准确性。但是近年来研究发现，血常规分析仪检测结果的影响因素很多，其中冷凝集是很重要的一种干扰因素之一，其标本红细胞结果降低，而MCV、MCH、MCHC结果假性升高。对此，研究报道中多偏向采用37℃水浴半小时来解决此类问题。但当遇见高效价冷素标本时，该方法不一定有效。据文献报道，针对冷凝集标本还可使用血浆置换法[2]和标本试剂双重加温法[3]。因此，本文选取经37℃水浴半小时后血常规结果仍不能被纠正的标本进行血浆置换法和试剂标本双重加温法，现将结果报道如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

收集2016年2月—2017年12月在我院检验科进行血细胞分析时出现冷凝集现象的标本，其中采用37℃水浴半小时后仍出现结果不能被纠正的标本共8例。该类标本不常见且不能保留，因此在发现此类标本后立即进行了相关检查分析，并进行结果记录。

1.2 仪器与试剂

日本希森美康公司生产的XT-2000i全自动血细胞分析仪，配套的原装试剂和高、中、低三个水平的质控物，LDZ5-2型离心机，0.9%氯化钠溶液，移液器及吸头，Olympus显微镜。瑞氏染液购于珠海贝索。血常规仪器每年进行两次校准，每天进行质控检测，结果无失控，提示仪器状态正常。

1.3 方法

进行冷凝集标本的筛选：查看血常规标本结果时红细胞偏低，血红蛋白偏高，明显不成比例，MCV、MCHC偏高，将标本颠倒混匀后肉眼观察到试管管壁有明显的细沙样颗粒。同时查看仪器是否有报警信息，如红细胞凝集?、混浊/血红蛋白干扰?等，嗜碱通道的右侧出现长长的拖尾现象[4]。手工推片镜检，镜下红细胞呈片状分布，提示筛选。将此类标本先进行37℃水浴半小时后进行上机检测，若结果仍未被纠正，则进行血浆置换及试剂标本双重加温法。

1.3.1 试剂标本双重加温法 取一干净试管，使用移液器精确吸取160μLSysmex CELLPACK放入37℃水浴箱中孵育30min，再加入经37℃水浴后的标本40μL，充分混匀后采用Sysmex XT-2000i血细胞分析仪的毛细管模式进行检测分析并其记录结果。

1.3.2 血浆置换法 将水浴后的标本3000rmp/min离心5min，用移液器慢慢吸去上层血浆，并记录吸出的量，再加入等量的0.9%氯化钠溶液，混匀后再次离心，吸取上层液体，反复洗涤3次后上机检测并记录其结果。

1.4 处理有效的判断

仪器报警无提示，细胞散点图无异常，红细胞与血红蛋白比例趋于合理。推片镜检时，镜下红细胞未见聚集。肉眼观察标本管壁未见凝集颗粒出现。

1.5 统计学处理

应用统计软件SPSS19.0进行数据分析，采用配对t检验进行组间比较，计量资料以均数±标准差表示，以P＜0.05认为差异有统计学意义。

2.结果

检测后的结果表明，经血浆置换法和试剂标本双重加温法处理后的红细胞（RBC）、平均红细胞体积（MCV）差异具有统计学意义（P＜0.05）。两种方法处理后的血红蛋白（HGB）、白细胞（WBC）、血小板（PLT）差异无统计学意义（P＞0.05）。血浆置换法处理后的血小板低于处理前和试剂标本双重加温法。见表。

表8 例标本处理后结果比较

3.讨论

冷凝集现象的出现主要是因为患者的血清中存在冷凝集素。它是一种针对红细胞（RBC）膜抗原的IgM型自身抗体[5]。在温度较低时可诱导自身红细胞聚集，导致红细胞检测结果假性降低，同时红细胞的相关参数，如平均红细胞容积（MCV）、平均血红蛋白含量（MCH）及平均血红蛋白浓度（MCHC）水平也异常升高。部分健康人体内也会存在这种抗体，但效价低，一般不会引起红细胞聚集。对于冷凝集现象出现的原因机制还不明确，但有文献[6]报道，肺炎支原体感染可能会导致标本出现冷凝集现象。

在日常血常规检测中，冷凝集现象是影响其结果准确性的主要因素之一。血细胞分析仪检测红细胞的原理主要为电阻抗法。在检测冷凝集标本时，由于红细胞聚集在一起，不能单个通过细胞通道，因此导致红细胞计数偏低，红细胞体积偏大。而白细胞使用荧光染料进行染色，流式细胞术进行计数，检测原理与红细胞不用，因此结果影响没有红细胞那么大。

目前，关于如何消除冷凝集标本的检测方法研究结果不一。对于冷凝集的标本，可以首先采用37℃水浴半小时的方法进行纠正。但遇到严重凝集的标本，采用血浆置换法或试剂标本双重加温的方法，能有效的去除冷凝集素的干扰。由本文表1可以看出，冷凝集标本经两种方法处理后与37℃水浴法比较，MCV结果低于水浴法，红细胞（RBC）结果高于水浴法，血红蛋白（HGB）、血小板（PLT）、白细胞（WBC）这三个结果无明显差异。但是血浆置换过程有可能引起PLT丢失，导致PLT检测结果均明显降低，造成PLT结果不可信，并且操作繁琐，手工造成的误差大。试剂标本双重加温法使整个检测过程中血液温度接近37℃，基本消除冷凝集现象，使得结果更加准确可靠。

综上所述，冷凝集主要影响红细胞检及其参数的检测，对白细胞、血红蛋白、血小板基本无影响。为保证检验质量，避免冷凝集标本对血常规检查的干扰，对经37℃水浴后冷凝集现象不能改善的标本，采用试剂标本双重加温法及时检测，能保证血常规结果准确可靠。