sICAM-1与suPAR联合检测对胎膜早破新生儿败血症的预测价值

傅潮琅

早发型败血症（early onset neonatal septicemia，EONS）是新生儿常见的急危重症，其发生率为0.77‰～1.00‰，病死率高达24.4%[1]。有学者认为，胎膜早破导致的宫内感染及绒毛膜羊膜炎与EONS的发生、发展相关，进而导致全身炎症反应综合征[2]。由于EONS起病急、进展快，因此探寻一种快捷、安全、准确、重复性高的早期诊断方法，对改善患儿预后意义重大。但目前临床上缺乏早期诊断EONS的有效方法；而作为金标准的血培养阳性率低、耗时长，易延误病情。可溶性细胞间黏附分子-1（sICAM-1）、可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体（suPAR）是免疫球蛋白超家族的主要代表，参与炎症早期进展。由于新生儿脐动脉血标本获取及时，sICAM-1、suPAR检测不仅便于EONS早期检查，还能有效避免传统采血导致的医源性损伤。本研究联合检测胎膜早破足月新生儿脐动脉血sICAM、suPAR水平，并探讨其对胎膜早破新生儿发生EONS的预测价值，现将结果报道如下。

1 对象和方法

1.1 对象 选取2017年1至12月本院新生儿科收治的胎膜早破、经阴道顺利分娩的291例足月单胎新生儿为胎膜早破组，其中男159例，女132例。纳入标准：（1）产妇胎膜早破符合《2015年胎膜早破的诊断与处理指南》中相关诊断标准[3]；（2）产妇胎膜早破时间＞12h；（3）产妇无宫腔外感染；（4）胎龄 37～42 周；（5）临床资料完整；（6）家属均签署知情同意书。排除标准：（1）新生儿染色体异常；（2）合并先天性代谢异常疾病；（3）重度窒息新生儿；（4）合并重要脏器器质性病变。另选同期产妇健康、未发生胎膜早破的147例足月健康新生儿为健康对照组，其中男72例，女75例。两组新生儿性别、胎龄、出生体重及产妇初产比例等比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05）。本研究经医学伦理委员会审查通过。

1.2 方法

1.2.1 实验室检测 新生儿娩出后，无菌状态下抽取脐动脉血2ml，室温下促凝管中静置2h，3 000r/min离心15min，取上清液入清洁EP管，于-80℃冰箱内保存。sICAM、suPAR水平检测均采取双抗体夹心ELISA法，sICAM酶联免疫检测试剂盒、suPAR酶联免疫检测试剂盒均购自美国B&D公司，操作严格按照产品说明书进行，最终根据吸光度（OD值）计算浓度。

1.2.2 EONS诊断标准[4]（1）娩出后发病时间≤7d；（2）无菌体腔内培养或血培养出致病菌；（3）若培养出条件致病菌，须与另一份无菌体腔内（或血）标本培养结果对比，结果为同种条件致病菌；（3）WBC＞25×109/L或＜5×109/L、C反应蛋白≥8mg/L、未成熟中性粒细胞与中性粒细胞计数的比值≥0.16、血沉≥5mm/h、降钙素原＞2μg/L、PLT≤100×109/L，以上外周血非特异性检查指标异常2项及以上；（5）外周血病原菌抗原或DNA阳性。在满足（1）的前提下，同时满足（2）至（5）任意一条即可确诊为EONS。291例胎膜早破新生儿发生EONS 31例，均有不同程度的呼吸系统（发绀、气促等）、神经系统（激惹、嗜睡等）、循环系统（血压不稳、心动过快或过缓等）的临床表现。

1.3 统计学处理 应用SPSS 20.0统计软件。计量资料若符合正态分布用表示，组间比较采用独立样本t检验；若不符合正态分布用 M（P25，P75）表示，组间比较采用Mann-Whitney U检验。计数资料比较采用χ2检验。绘制ROC曲线评价两项指标单独及联合检测对EONS的预测效能。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 胎膜早破组与健康对照组脐动脉血sICAM及su－PAR水平比较 胎膜早破组新生儿娩出时脐动脉血sICAM及suPAR水平均高于健康对照组，差异均有统计学意义（均 P＜0.05），见表 1。

表1 胎膜早破组与健康对照组脐动脉血sICAM及suPAR水平比较（μg/L）

2.2 不同胎膜早破时间新生儿脐动脉血sICAM及su－PAR水平比较 291例胎膜早破新生儿中，胎膜早破时间≤18h 84例，＞18h 207例。胎膜早破时间＞18h的新生儿脐动脉血sICAM及suPAR水平均明显高于≤18h的新生儿，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表2。

表2 不同胎膜早破时间新生儿脐动脉血sICAM及suPAR水平比较（μg/L）

2.3 EONS与脐动脉血sICAM及suPAR水平的关系291例胎膜早破新生儿中，发生EONS 31例；EONS组新生儿脐动脉血sICAM及suPAR水平均高于非EONS组（均 P＜0.05），见表 3。

表3 EONS与脐动脉血sICAM及suPAR水平的关系（μg/L）

2.4 脐动脉血sICAM及suPAR水平对EONS的预测效能 脐动脉血sICAM水平预测EONS的AUC为0.651，诊断阈值为349.50μg/L，灵敏度为0.677，特异度为0.596，约登指数为0.273，阳性似然比为1.68，阴性似然比为0.54；脐动脉血suPAR水平预测EONS的AUC为0.649，诊断阈值为12.01μg/L，灵敏度为0.903，特异度为0.323，约登指数为0.226，阳性似然比为1.33，阴性似然比为0.30，ROC曲线见图1。以sICAM＞349.50μg/L与suPAR＞12.01μg/L（联合）对EONS进行预测，结果显示灵敏度为0.794，特异度为0.832，约登指数为0.626，阳性似然比为4.73，阴性似然比为0.25；其中特异度、约登指数、阳性似然比均高于两者单独检测，阴性似然比低于两者单独检测。

图1 胎膜早破新生儿脐动脉血sICAM及suPAR水平预测EONS的ROC曲线

3 讨论

胎膜早破是指妊娠期妇女临产前出现的胎膜自然破裂[5]。据文献显示，足月单胎胎膜早破在临床上的发生率约为8%，与产妇绒毛膜羊膜炎存在一定相关性，可能导致新生儿感染[6]。EONS是新生儿感染的严重并发症之一，常发生在新生儿娩出后7d内，大肠埃希菌、B组链球菌等源于母亲产道或胃肠道的微生物是其主要致病菌[7]。由于EONS病死率较高，而临床上以血培养为主要诊断方法，但其阳性率低、耗时长且极易延误病情[8]。因此，寻找一种早期预测并辅助诊断EONS的方法对改善患儿预后具有重要意义。

学者尝试将全血细胞计数、IL、C反应蛋白、降钙素原等实验室指标用于EONS的早期诊断，但发现均有一定的局限性[9-12]。外周血象在新生儿娩出早期波动较大，且受采血部位、窒息等因素干扰；IL-6在新生儿感染后24h即可恢复正常，且难以准确检测；C反应蛋白、降钙素原检测的灵敏度及特异度均不高，且受窒息、溶血、组织损伤等非感染性因素干扰[9]。sICAM-1、suPAR是免疫球蛋白超家族的主要代表。其中sICAM-1广泛分布于人体细胞外，在生理条件下，sICAM-1呈低表达状态。有学者研究发现，内皮细胞在内毒素等致病因子刺激下会增加膜表面黏附分子数量，该过程发生在炎症早期[10]。suPAR广泛分布于人体尿液、血液、脑脊液或唾液中，与细胞趋化、游走、黏附、免疫活化、信号转导等过程密切相关。有学者研究发现ICU败血症患者血suPAR水平明显升高，且参与炎性细胞聚集、黏附以及抑制中性粒细胞凋亡等活动[11]。故本研究将脐动脉血sICAM与suPAR水平作为胎膜早破新生儿EONS的联合检测指标。

目前关于新生儿血sICAM与suPAR水平的报道不多，其正常范围也尚未完全确定。据荟萃分析显示，新生儿血sICAM及suPAR水平的正常范围分别为79.40～1 252.00、3.70～10.80μg/L[12]。而本研究发现，健康对照组新生儿血sICAM及suPAR水平范围为139.42～356.95、4.54～8.60μg/L，与 Begum 等[13]研究基本一致。此外，胎膜早破时间＞18h的新生儿以上两项指标水平更高，提示胎膜早破时间越长，新生儿宫内感染机率越大，炎症程度越重；这与Goudev等[14]研究结果一致。与非EONS胎膜早破新生儿进行比较，发生EONS的新生儿脐动脉血sICAM及suPAR水平更高；提示以上两项指标与感染性炎症有关。进一步绘制ROC曲线，结果显示sICAM单独检测的灵敏度为0.677，低于Leupold等[15]报道的0.782；推测可能与实验室条件差异和试剂来源不同有关。而suPAR单独检测的灵敏度及特异度均高于文献报道[16]；可能与本研究所取的脐动脉血标本降低了宫腔外感染因素的影响有关。两项指标联合检测的约登指数、阳性似然比均高于单独检测，阴性似然比低于单独检测；这体现了联合检测的预测价值。

综上所述，sICAM-1与suPAR联合检测可作为早期诊断胎膜早破新生儿EONS的辅助实验室指标，有助于EONS的早发现、早治疗，对改善患儿预后具有临床意义。