黄芪建中汤联合质子泵抑制剂四联序贯疗法防治 胃溃疡的疗效及对金属蛋白酶-3、Ghrelin表达的影响

王昆,张莹

(首都医科大学附属北京安贞医院,北京 100029)

胃溃疡是常见的消化性系统疾病之一，其临床特点通常为反复发作和节律性腹痛，由于胃酸分泌过多导致胃黏膜表层溃烂而发生，患者经常伴随有反酸、灼热、嗳气、嘈杂等生理感觉，严重时易出现便血、恶心、呕吐甚至呕血等现象[1-3]。一般引起胃溃疡的原因有不规律的生活节奏，长期吸烟喝酒，饮食上多为暴饮暴食，以及精神压力较大等[4-6]。出现胃溃疡的患者如果不及时进行治疗，严重时容易出现胃穿孔、胃出血等并发症，对患者生命健康造成较大的威胁[7]。为了进一步探索临床上对胃溃疡的有效治疗方法，本研究对比质子泵抑制剂四联序贯疗法单用和黄芪建中汤与质子泵抑制剂四联序贯疗法联用的疗效差异及其可能的作用机制，现报道如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料

选取本院2016年1月—2017年5月收入92例胃溃疡患者，随机分为治疗组和对照组，每组46例。对照组中男26例，女20例；年龄27～61(40.29±3.18)岁；病程7～15(4.25±1.26)d；胃溃疡直径(6.78±3.18)mm。治疗组中男27例，女19例；年龄26～63(40.78±4.35)岁；病程6～17(4.94±1.19)d；胃溃疡直径(6.28±3.79)mm。以上92例患者均有胃胀、泛酸、恶心呕吐、腹痛的临床症状，均进行了胃镜检查，确诊为胃溃疡，所有患者已排除心、肝、肾等器官损伤，以及全身性疾病。两组患者年龄、性别、病程、临床症状、身体状况等情况，经统计学处理差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 治疗方法

1.2.1 对照组

采用四联序贯疗法进行治疗。前45天口服兰索拉唑胶囊(国药准字H20066197，湖北华世通潜龙药业有限公司，30 mg/粒)，每次1粒，每日1次;口服阿莫西林胶囊(国药准字H19993034，山东鲁抗医药股份有限公司，0.25 g/粒)，每次2粒，每日2次。后45天口服兰索拉唑胶囊30 mg，每日1次;口服胶体果胶铋胶囊(国药准字H20023399，广州白云山光华制药股份有限公司，50 mg/粒)，每次3粒，每日3次;口服呋喃唑酮片(国药准字H14023937，山西云鹏制药有限公司，0.1 g/片)，每日1片，每日3次。

1.2.2 治疗组

治疗组在对照组所采用治疗方法上，口服黄芪建中汤(黄芪15 g，白芍15 g，桂枝、生姜、甘草各10 g，大枣10个，饴糖50 g)，每日1剂，连续服用30天作为1个疗程。两组患者均进行治疗3个月。

1.3 检测指标

1.3.1 胃镜检查

治疗结束后，两组患者均进行胃镜下黏膜愈合质量的检查。完全治愈：胃黏膜上溃疡消失，无炎症；基本治愈：溃疡愈合面积≥75%，周围炎症较轻；部分治愈：溃疡数目减少，溃疡愈合面积≥50%，<75%；无效：溃疡愈合面积<50%，炎症未减轻，或溃疡无变化甚至加重。有效治愈为完全治愈、基本治愈和部分治愈之和。

1.3.2 荧光定量PCR检测基质金属蛋白酶-3、ghrelin表达量

1)试剂：Trizol试剂(南京奥青公司)；逆转录、qRT-PCR试剂盒(南京百世金公司)；兔抗人基质金属蛋白酶-3、兔抗人ghrelin单克隆抗体、枸橼酸抗原修复液、DAB显色液(北京中杉金桥生物技术有限公司)。

2)总RNA提取：按照Trizol试剂说明书，采用一步法提取胃黏膜组织RNA，采用紫外分光光度计法对提取的总RNA质量进行定量，并相应调整RNA浓度。本研究所制备组织总RNA的质量及浓度经调整后均达到可以进行PCR反应的条件，将提取后的RNA进行分装，贴上标签保存于-80℃超低温冰箱，或立即将其进行逆转录。

3)qPCR：根据试剂盒说明书进行逆转录，实验方法采用两步法，反应条件如下：70℃ 10 min，冰浴2 min，42℃ 16 min，70℃ 10 min，逆转录后得到的cDNA于-80℃条件下暂时保存。qPCR采用Tapman探针法，反应体系参照试剂盒说明书进行，反应条件如下：42℃预变性30 s；95℃变性10 s；60℃退火20 s；70℃延伸10 s；共重复进行40个同样的循环。使用定量PCR仪平台进行检测，内参为RNU6B，计算方法为相对定量法，用2-△△Ct表示基质金属蛋白酶-3、ghrelin的相对表达量，每个实验进行3次重复取平均值。

1.3.3 中医证候积分

对两组患者治疗前后的中医证候积分进行对比，主要观察症状为胃脘胀痛，嗳气，反酸，呕吐共4项，按照无(0分)，轻(1分)，中(3分)，重(5分)进行评分，次要观察症状为大便秘结，口干苦，舌质红绛或黄腻苔，脉弦滑等，按照无(0分)、有(1分)进行评分。最后将所有评分项进行相加，分值越高，表明患者症状越严重。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 两组患者胃镜下黏膜愈合质量比较

如表1所示，治疗后，对照组和治疗组患者的总有效治愈率分别为76.1%(35/46)和97.8%(45/46)，治疗组的治愈率明显高于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)。

表1 两组患者胃镜下黏膜愈合质量比较[例(%)]

注:与对照组相比,*P<0.05

2.2 两组患者基质金属蛋白酶-3、ghrelin表达量的比较

如表2所示，两组患者治疗前，对照组患者的基质金属蛋白酶-3(MMP-3)基因表达量是(1.21±0.33)，治疗组为(1.20±0.51)，两者不具有显著性差异(P>0.05)。治疗后，两组患者胃黏膜基质金属蛋白酶-3的基因表达量均显著升高，且治疗组显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前，对照组患者的ghrelin基因表达量是(1.81±0.27)，治疗组为(1.82±0.29),两者不具有显著性差异(P>0.05)；治疗后两组患者ghrelin表达量均显著下降，且治疗组显著低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。

表2 两组患者基质金属蛋白酶-3、ghrelin表达量的比较

2.3 两组患者中医证候积分比较

如表3所示，两组患者治疗前，对照组患者的中医证候积分为(15.18±4.29)，治疗组为(15.21±4.61)，两者不具有显著性差异(P>0.05)；治疗后，两组患者中医证候积分均显著减少，且治疗组显著低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。

表3 两组患者中医证候积分的比较

3 讨论

胃溃疡是非常常见的消化系统疾病之一，主要症状为上腹部疼痛，严重时易出现胃穿孔或胃溃疡出血等并发症[8]。引起胃溃疡的原因有很多，比如幽门螺杆菌感染，阿司匹林或皮质类固醇等药物的长期服用史，长期吸烟、饮酒或经常饮用浓茶及咖啡，生活作息紊乱，饮食不规律，精神长期处于紧张、焦虑状态等[9]。胃溃疡发生的最终决定性因素是胃酸，所以有效治疗胃溃疡的方法就是抑制胃酸分泌过多，同时保护患者的胃黏膜，防止其受到损伤，另外还需要有效杀灭体内的幽门螺杆菌[10]。

传统的质子泵抑制剂四联序贯疗法中几种药物可以有效抑制胃酸的分泌，另外还具有杀灭幽门螺杆菌的功能，可以在一定程度上起到对胃溃疡的防治作用，但是对于患者来说，长期服用西药进行治疗对身体会有一定影响[11]。一方面，四联序贯疗法中的几种药物都会引起不同程度的副作用，并且长期服用以上几种药物会引发机体正常菌群的紊乱，从而引发严重的不良反应，对患者的身心造成不可逆转的损伤[12]。另一方面，序贯疗法的理念是仅仅根据胃溃疡的发病机制来进行针对性的治疗，但是仅依据发病机制来抑制疾病的发生、发展并不等于从根本上解决问题，因为导致患者患病的因素非常多，并非单单两个方面就可以解决，这样的治疗方式很容易造成日后复发[13]。

在中医学中，胃溃疡的发病原因可以归结为饮食所伤，情志不遂或外感邪气等多种因素，导致脾胃受伤，横逆犯胃，胃气阳滞。中医上对胃溃疡的治疗，常考虑从加强机体抵抗力和免疫力入手，增加胃黏膜血流量，从而加快溃疡的愈合[14]。本研究中所采用的黄芪建中汤中，黄芪具有补气固表、敛疮生肌的功效，常用于食少便溏、中气下陷、久溃不敛等，其含有的有效成分具有抗溃疡的作用，可减轻溃疡损伤面积，并且还具有抗炎、增强免疫功能的作用，有利于有害菌群的抑制及溃疡的愈合；白芍具有抗菌、抗炎、抑制溃疡的作用；桂枝可用于脘腹冷痛，具有抗菌、抗炎的作用；生姜可用于治胀满、腹痛；甘草可用于脾胃虚弱、脘腹疼痛等；大枣能健脾益胃，中和药性。在传统的四联序贯疗法基础上，再服用此中药方剂既能杀灭幽门螺杆菌，抑制胃酸分泌，又能健脾开胃，增强机体免疫功能，有利于溃疡的愈合，有效防治胃溃疡。本研究的结果显示，治疗后治疗组患者(黄芪建中汤联合四联序贯疗法)与对照组患者(四联序贯疗法)相比，治疗组黏膜溃疡愈合有效率显著高于对照组(P<0.05)，且治疗组的中医证候积分明显低于对照组(P<0.05)，说明联合使用比四联序贯疗法单用更能有效防治胃溃疡,改善临床症状。

基质金属蛋白酶-3(MMP-3)在机体多种组织和细胞中都广泛存在，属于基质溶解素，具有激活其他MMPs的作用[15]。溃疡的治疗过程一般会经历4个阶段：凝血期、炎症期、移行增殖期和重建期。在这个过程中，基质金属蛋白酶是降解细胞外基质以及基底膜的关键酶之一，对黏膜血管的再生和胃黏膜受损上皮细胞的修复有重要作用，所以对胃溃疡的治疗有密切关系，起着十分关键的作用[16]。ghrelin是机体内生长激素促分泌素针对其受体的一个内源性配体，具有调节生长激素或者一些胃肠肽类成分的释放的作用，在生物学功能上，扮演着促进胃肠蠕动以及调节胃酸分泌的角色[17-20]。本研究发现，胃溃疡患者的黏膜ghrelin基因表达量升高，即分泌量增多，经过治疗后，患者ghrelin表达量下降，说明ghrelin的表达与机体胃酸的分泌过程有一定关系，参与溃疡的发生发展过程。本研究结果显示，治疗后两组患者的基质金属蛋白酶-3升高，ghrelin下降，并且治疗组患者的基质金属蛋白酶-3表达量显著高于对照组(P<0.05)，而ghrelin表达量显著低于对照组(P<0.05)。

综上所述，相比于传统的四联序贯疗法单用的方法，黄芪建中汤联合四联序贯疗法可以有效提高胃镜下黏膜愈合质量，升高基质金属蛋白酶-3表达量，降低ghrelin表达量，从而降低患者中医证候积分，提高胃溃疡患者的治愈率，对胃溃疡的防治具有较好的临床疗效，值得推广和应用。