合并绒毛膜下血肿的先兆流产患者Th1/Th2细胞因子的平衡状态研究

陆洋 陈超 彭珊珊

先兆流产指妊娠28周前出现阴道流血伴或不伴有下腹痛, 其临床表现以阴道流血最为常见。1985年Mantoni首先报道了先兆流产合并绒毛膜下血肿(subchorionic hematoma,SCH)的超声研究, 随着超声在临床的广泛应用, 绒毛膜下血肿的持续存在会引起反复的阴道流血, 甚至引起子宫收缩,导致难免流产或演变为胎盘早剥, 造成不良妊娠结局。绒毛膜下血肿的发生发展机制尚未明了。现代生殖免疫学认为,妊娠过程是半同种移植, 其核心是母胎界面T淋巴细胞的耐受, T淋巴细胞生物行为异常与妊娠流产关系密切。本研究观察合并绒毛膜下血肿的先兆流产患者外周血中Th1型细胞因子和Th2型细胞因子指标, 分析合并绒毛膜下血肿的先兆流产患者Th1/Th2细胞因子的平衡情况。具体报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取2016年1~12月在本院妇科住院的60例患者作为研究对象, 将30例先兆流产合并绒毛膜下血肿者作为A组, 30例正常妊娠要求终止妊娠者作为B组。A组平均年龄(29.8±3.9)岁。B组平均年龄(27.2±5.2)岁。两组一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05), 具有可比性。纳入标准：A组：①年龄20~35岁；②诊断为先兆流产；③超声检查提示宫内妊娠, 单活胎, 绒毛膜下血肿声像,④出血先兆流产症状后至本次就诊前未采用任何药物治疗；⑤无其他相关内外科疾病及自身免疫性疾病。B组：①年龄20~35岁；②诊断为28周前要求终止妊娠；③无死胎、死产、自然流产史, 无产科疾病、其他相关内外科疾病及自身免疫性疾病；④超声检查提示宫内妊娠, 单活胎, 发育与孕周相符。

1. 2 先兆流产的诊断标准 根据第8版《妇产科学》教材定义, 妊娠28周前少量阴道出血, 无妊娠物排出, 有或无相继出现阵发性腹痛称为先兆流产。绒毛膜下血肿的诊断超声为：超声下见宫腔内、宫壁与妊娠囊之间出现无回声区, 形态多为新月形、三角形或多边形。

1. 3 方法 早晨空腹取两组肘正中静脉血3 ml, 取血1 h内,3000 r/min离心5 min, 留取上清液( 血清), 冻存于-20℃冰箱。采用酶联免疫吸附双抗体夹心法检测两组TNF-α、IL-2、IL-4、IL-10共4项指标的表达；试剂由深圳市达科为生物技术股份有限公司提供, 检测设备为瑞士TECAN的sunrise酶标仪。

1. 4 统计学方法 采用SPSS22.0统计学软件进行数据统计分析。计量资料以均数±标准差(±s)表示, 采用t检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

A组Th1细胞因子TNF-α(4.577±0.129)pg/ml、IL-2(0.853±0.441)pg/ml高于B组的(3.286±0.153)、(0.298±0.069)pg/ml, 差异有统计学意义(P＜0.05)；A组Th2型细胞因子 IL-4(0.571±0.054)pg/ml、IL-10(5.510±0.806)pg/ml低于B组的(2.380±0.276)、(12.424±1.891)pg/ml, 差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 两组Th1/Th2细胞因子水平比较±s, pg/ml)

表1 两组Th1/Th2细胞因子水平比较±s, pg/ml)

注：与B组比较, aP<0.05

组别 例数 Th1细胞因子 Th2细胞因子TNF-α IL-2 IL-4 IL-10 A组 30 4.577±0.129a 0.853±0.441a 0.571±0.054a 5.510±0.806a B组 30 3.286±0.153 0.298±0.069 2.380±0.276 12.424±1.891 t 35.33 6.81 35.23 18.42 P 0.000 0.000 0.000 0.000

3 讨论

绒毛膜下血肿又称为胎膜后出血, 是指绒毛膜板与底蜕膜分离出血, 使血液积聚在绒毛膜与底蜕膜之间, 临床症状主要为间断性阴道流血、下腹隐痛等, B超是主要的诊断方式。相关学者［1］曾对6675例孕妇进行前瞻性研究, 得出绒毛膜下血肿在正常妊娠妇女中的发生率为3.1%。国内外研究结果均提示绒毛膜下血肿在妊娠早期会增加自然流产率,妊娠中晚期会增加早产率、胎盘早剥率, 并且还会影响胎儿的正常发育以及导致产妇的产后出血发生率显著增加［2-5］,但至今绒毛膜下血肿的病因仍不明。

近年来研究发现, Th1/Th2平衡对妊娠结局有很大影响,Th1/Th2平衡的建立有利于受精卵的着床和胚胎、胎儿的发育, 使妊娠正常进行［6］。T淋巴细胞中的辅助细胞CD4+细胞分为两种亚型：Th1型细胞分泌IL-2、干扰素(IFN)-γ、TNF-α等, 主要促进细胞免疫和局部炎症反应, 具有胚胎毒作用；Th2型细胞分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10等, 辅佐B细胞产生抗体, 介导体液免疫和同种排斥反应耐受, 抑制Th1型细胞因子的生成, 在维持妊娠和促进胎儿生长发育方面发挥作用［7］。正常妊娠表现为一种特殊的Th2现象, Th1处于抑制状态。如果Th1型细胞因子过度表达, 将导致流产的发生［8］。

关于妊娠流产与Th细胞已有的研究表明, 复发性流产妇女Th1型细胞因子的水平显著高于正常妊娠妇女, 而Th2型细胞因子的水平却显著降低, Th1/Th2的平衡偏向Th1［9］；先兆流产患者血清IL-6 水平降低、IL-8 水平升高, 血清IL-6、IL-8 的表达水平可以作为判断先兆流产预后的参考指标［10］；还有研究表明, 原因不明复发性流产患者外周血与蜕膜组织中IL-10等Th2型细胞因子明显低于正常妊娠组,而IFN及TNF等Th1型细胞因子的表达水平明显升高, 给予人为性主动免疫后妊娠尚可得以正常进行, 再次检测母体细胞因子表达水平提升Th1/Th2型细胞因子比值下降［11］。

目前合并绒毛膜下血肿的先兆流产发病机制研究不多,特别在与Th细胞的关系上。本课题旨在以往的理论上逐渐深入, 探讨绒毛膜下血肿与Th1/Th2的平衡关系。研究结果显示, A组Th1细胞因子TNF-α(4.577±0.129)pg/ml、IL-2(0.853±0.441)pg/ml高于B组的(3.286±0.153)、(0.298±0.069)pg/ml, 差异有统计学意义(P＜0.05)；A组Th2型细胞因子 IL-4(0.571±0.054)pg/ml、IL-10(5.510±0.806)pg/ml低于B组的(2.380±0.276)、(12.424±1.891)pg/ml, 差异有统计学意义(P＜0.05)。提示绒毛膜下血肿患者流产与Th细胞的不平衡有关, 向Th1的方向移动, 并偏离Th2, 但Th1/Th2的不平衡可能影响绒毛膜下血肿的发生, 也可能绒毛膜下血肿的发生影响了Th1/Th2的不平衡, 其因果关系有待进一步研究和证明。

综上所述,Th1/Th2细胞因子的平衡是维持妊娠生理所必须的, 平衡失调就会影响正常妊娠的维持和发展, 其平衡向Th1发展, 可能导致流产的发生和发展。绒毛膜下血肿的发生发展可能与Th细胞因子的不平衡有关, 且向Th1细胞因子的方向移动, 并偏离Th2。