电针不同腧穴对急慢性结肠炎大鼠模型血清IL-6含量的影响

闫丽萍 ，薛美婷 ，吕竹青 ，谢保弟 ，韩国伟

（1.山西中医药大学，山西晋中 030619； 2.遵义市中医院，贵州遵义563000）

结肠炎为临床常见病，有急性与慢性两种类型。无论是急性还是慢性结肠炎，肠黏膜炎症为其主要病理改变。大量文献表明，针灸对于肠道炎症有很好的疗效。本文以急性与慢性结肠炎模型大鼠为研究对象，电针大肠俞、天枢、足三里、上巨虚4个不同的特定穴，观察电针不同特定穴对急、慢性结肠炎大鼠模型血清IL-6含量的影响。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 急性结肠炎实验：清洁级SD大鼠 60 只，体质量（190±10）g，雌雄各半，购自北京海淀兴旺实验动物养殖场，许可证号：SCXK-（京）2014-0013。慢性结肠炎实验：清洁级SD大鼠120只，余同前。适应性饲养1 w后实验。实验室通风良好，温度22～24℃，相对湿度50%～60%。

1.1.2 试剂与仪器 华佗牌SDZ-Ⅱ型电子针疗仪（苏州医疗用品厂有限公司）、CP214电子天平［奥豪斯仪器（上海）有限公司］、Spectramax全波长酶标仪（美国分子仪器有限公司）、DHG-9243BS数显恒温水浴锅（上海博讯实业有限医疗设备厂）、02-0510匀浆机（美国PRO）、L535R-1低速冷冻离心机（长沙湘仪离心机仪器有限公司）、DW-HL388超低温冷冻储存箱（中科美菱低温科技有限责任公司）、冰乙酸（天津市光复科技发展有限公司）、水合氯醛（天津市科密欧化学试剂有限公司）、甲醛溶液（成都市科龙化工试剂厂）、IL-6试剂盒（武汉博士德生物工程有限公司）。

1.2 实验方法

1.2.1 电针不同腧穴对急性结肠炎模型大鼠血清IL-6含量的影响 60只清洁级大鼠随机分为空白组、模型组、大肠俞组、天枢组、足三里组和上巨虚组，每组10只。选用6%冰乙酸溶液灌肠制备急性结肠炎大鼠模型［1］。造模前24 h，大鼠禁食不禁水。除空白组外，大鼠固定后，将石蜡油润滑过的直径为2 mm的聚氯乙烯管插入大鼠肛门8 cm，缓慢注入6%冰乙酸溶液1 mL，立即捏紧肛门，定时15 s后，反折软管，接装有5 mL生理盐水的注射器，松开反折的软管，注入生理盐水冲洗，1次即可。空白组生理盐水1 mL灌肠，余处理不变。各腧穴组造模后即刻固定，电针相应穴位［2］（双侧）。大肠俞：第4腰椎棘突下，旁开5 mm；天枢：神阙穴旁开5 mm；足三里：膝关节后外侧，在腓骨小头下5 mm；上巨虚：足三里向下5 mm。电针选用疏密波，以电针局部微微颤动为度，1次/d，30 min/次，共3 d。空白组、模型组只做相应固定，不针刺。第3次治疗后，大鼠禁食不禁水，次日腹腔注入10%水合氯醛溶液（0.4 mL/100 g）麻醉，腹主动脉采血，常温静置2 h，于低速冷冻离心机（设置参数为4℃、3 000 r/min，15min）中离心，分离血清，贮存于-20℃冰箱，待测。

1.2.2 电针不同腧穴对慢性结肠炎模型大鼠血清IL-6含量的影响 分组同1.2.1，每组20只。采用免疫法加局部刺激制备慢性结肠炎大鼠模型［3-5］。取家兔新鲜结肠黏膜层，加适量生理盐水制成黏膜匀浆，放于-20℃冰箱中冷冻24 h，溶冻后置于低速冷冻离心机（参数：4 ℃，3 000 r/min，30 min）中离心，取上清液测定蛋白质含量后存于冰箱备用。造模时取出，与完全Freund佐剂等体积混匀成乳剂。除空白组外，其余各组每只足跖内注射抗原3 mg，并于第10天、17天、24天、31天分别于足跖、背部、腹股沟、腹腔注射抗原6 mg，腹腔注射时不加完全Freund佐剂。禁食24 h，次日用10%水合氯醛溶液（0.4 mL/100 g）行腹腔注射麻醉，1%福尔马林溶液2 mL灌肠，留置1 h后用生理盐水冲洗。再用抗原液8 mg灌肠，留置2 h后，生理盐水冲洗。治疗疗程为10 d，余同1.2.1。大鼠治疗3 d后先处死一半采血，剩余大鼠继续治疗7 d后处死采血，余同1.2.1。

1.3 统计学方法

实验数据采用SPSS17.0统计软件处理，以均数±标准差（±s）表示，经正态检验后，组间比较采用单因素方差分析。

2 结果

2.1 电针对急性结肠炎模型大鼠血清IL-6含量的影响

与空白组比较，模型组血清IL-6含量升高，差异有统计学意义（P＜0.01）；与模型组比较，各腧穴组血清IL-6含量均下降，差异有统计学意义（P＜0.05，P＜0.01）；各腧穴组血清IL-6含量进行比较，差异无统计学意义。结果见表1。

表1 急性结肠炎大鼠血清IL-6含量比较 （±s）

表1 急性结肠炎大鼠血清IL-6含量比较 （±s）

注：与空白组比较，1）P＜0.01；与模型组比较，2）P＜0.05，3）P＜0.01

组别 n IL-6（pg/mL）空白组 10 86.28±5.83模型组 10 124.09±7.781）大肠俞组 10 118.11±4.312）天枢组 10 114.46±4.543）足三里组 10 116.59±5.663）上巨虚组 10 116.65±4.723）

2.2 电针对慢性结肠炎模型大鼠血清IL-6含量的影响

与空白组相比，模型组血清IL-6含量升高，差异有统计学意义（P＜0.01）。电针3 d后，各腧穴治疗组血清IL-6含量较模型组均降低，但组间比较差异无统计学意义。电针10 d后，天枢组下调效果优于大肠俞组、足三里组和上巨虚组，差异有统计学意义（P＜0.05），上巨虚、大肠俞、足三里3组比较差异无统计学意义。结果见表2、表3。

表2 慢性结肠炎大鼠治疗3 d后血清中IL-6含量比较 （±s）

表2 慢性结肠炎大鼠治疗3 d后血清中IL-6含量比较 （±s）

注：与空白组比较，1）P＜0.01；与模型组比较，2）P＜0.01

组别 n IL-6（pg/mL）空白组 10 87.12±5.39模型组 10 122.10±5.711）大肠俞组 10 117.65±3.02天枢组 10 115.95±3.60足三里组 10 116.13±3.77上巨虚组 10 115.91±4.20

表3 慢性结肠炎大鼠治疗10 d后血清IL-6含量比较 （±s）

表3 慢性结肠炎大鼠治疗10 d后血清IL-6含量比较 （±s）

注：与空白组比较，1）P＜0.01；与模型组比较，2）P＜0.05，3）P＜0.01；与天枢组比较，4）P＜0.05

组别 n IL-6（pg/mL）空白组 10 86.83±5.86模型组 10 120.93±5.321）大肠俞组 10 104.37±4.383）4）天枢组 10 99.95±4.603）足三里组 10 103.03±3.183）上巨虚组 10 102.71±3.613）

3 讨论

结肠炎属于肠道炎症病变，大量临床和实验研究表明，针刺穴位能有效改善结肠炎的肠黏膜损伤。本实验分别电针大肠俞、天枢、足三里、上巨虚4个穴位治疗结肠炎，大肠俞是大肠经的背俞穴，早期实验发现俞募配穴、合募配穴对大肠腑病均有一定的治疗作用，其中以合募配穴疗效最佳［6］。天枢是大肠经的募穴，实验表明艾灸天枢和足三里均能改善大鼠溃疡性结肠炎的损伤，天枢治疗效果更好［7］。足三里为胃经合穴，也是下合穴，是胃经经气合于脏腑的部位，针刺足三里等穴位能有效改善溃疡性结肠炎病变。上巨虚是大肠经下合穴，动物实验显示，电针上巨虚能降低溃疡性结肠炎模型大鼠结肠黏膜溃疡及炎症评分，疗效较足三里等穴位佳，且存在一定的特异性［8］。结肠炎大都属于气滞血瘀，血败肉腐，产生溃疡。气行血自行，血行脓自化，大肠俞是大肠经的背俞穴，天枢是大肠经的募穴，都有调畅气血的作用。足三里和上巨虚分别是胃经、大肠经的下合穴，下合治内腑，通过针刺足三里或者上巨虚能够刺激胃肠蠕动，调节肠道微循环，改善结肠炎症损伤。IL-6属于Th1类细胞因子，由T淋巴细胞、单核巨噬细胞等产生，是促炎细胞因子，参与炎症与免疫反应，对多种效应细胞产生作用，介导免疫蛋白分泌，刺激参与免疫反应的细胞增殖、分化并提高其功能，它是结肠炎发病机制的关键因素，在炎症发生、发展过程中均有重要作用。

急性结肠炎实验中，与空白组相比，模型组血清IL-6含量升高，差异有统计学意义。各腧穴组与模型组比较，血清IL-6含量均降低，差异有统计学意义，说明4个特定穴对急性结肠炎血清IL-6均有下调作用。4个特定穴组间血清IL-6含量比较，差异无统计学意义，说明急性结肠炎经4个腧穴组治疗3次后在降低血清IL-6含量方面效果相当。

慢性结肠炎实验中，与空白组相比，模型组血清IL-6含量升高，差异有统计学意义。电针3 d与10 d后，各腧穴组血清IL-6含量均较模型组降低，差异有统计学意义，说明4个特定穴在慢性结肠炎电针3 d和10 d后对血清IL-6含量均有下调作用。电针3 d后，各腧穴组血清IL-6含量较模型组均降低，但组间比较差异无统计学意义，说明各腧穴对慢性结肠炎电针3 d后在炎症减轻方面未显现出差异。电针10 d后，天枢组下调效果优于大肠俞组和足三里组，差异有统计学意义，上巨虚组与之比较无统计学差异，上巨虚、大肠俞、足三里3组比较差异无统计学意义。说明随着治疗次数的增多，天枢在血清IL-6含量下调方面的作用效果逐渐凸显，优于其他腧穴。

综上所述，各腧穴对急性与慢性结肠炎均有治疗效果，其作用机制可能与电针穴位下调血清IL-6含量，抑制炎症过程中炎细胞因子的释放有关，其中电针天枢对慢性结肠炎模型大鼠血清IL-6含量下调作用更显著。