RSV毛细支气管炎患儿血ECP和尿LTE4水平及价值

党媛媛，严 华，冯 雪，田庆玲，洪 源，杨 硕

(唐山市妇幼保健院感染性疾病科，河北 唐山 063000)

毛细支气管炎为1岁以下，特别是2～6月龄的婴幼儿中最常见的呼吸道疾患，具有较高的发病率。呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus，RSV)为一种副黏病毒科肺炎属RNA病毒，约占毛细支气管炎病原体的52%以上，是毛细支气管炎最常见的感染病原体[1]。目前对RSV感染性毛细支气管炎病情严重程度主要依靠临床症状诊断，具有较高的主观性；此外，对于RSV毛细支气管炎患儿继发支气管哮喘尚缺乏预判指标[2]。血嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)、尿白三烯E4(LTE4)是反应机体免疫反应的指标，为了探究毛细支气管炎患儿血ECP、尿LTE4水平与病情严重程度的相关性和预测继发哮喘的效能，本文对105例RSV毛细支气管炎患儿进行了一项前瞻性研究，现汇报如下。

1材料与方法

1.1一般资料

选择2015年3月至2016年3月间于唐山市妇幼保健院住院治疗并确诊的毛细支气管炎患儿，并进行分析和随访。纳入标准：①年龄为1个月～2岁；②病史资料完整；③症状、体征和相关辅助检查符合《毛细支气管炎诊疗与预防专家共识(2014版)》[3](简称指南)的诊断要点；④经咽拭子或鼻咽部抽吸等呼吸道分泌物病原学检测明确为RSV感染。排除标准：①病史资料不足；②病原体检测受到污染；③存在免疫缺陷或继发肺结核等肺部感染。本次共纳入RSV毛细支气管炎患儿105例，男性56例，女性49例；平均年龄为(12.8±4.2)个月。症状评分根据指南[3]制定，评分≤7为轻度组(79例)，>7为中-重度组(26例)，见表1。另外，选择同期同年龄段的26例健康体检者作为对照组。

表1毛细支气管炎症状评分

Table 1 Symptom score of bronchiolitis

项目1分2分3分喂养量正常下降<1/2下降>1/2或拒食呼吸频率正常/稍快>60次/分钟>70次/分钟吸气性三凹征无/轻度中度重度鼻翼煽动/呻吟无/轻度无有血氧饱和度>92%88%～92%<88%精神状况正常轻微烦躁烦躁不安/嗜睡

1.2检测方法

RSV病原学检测：患儿入院后8小时内采集咽拭子，使用七项呼吸道病毒检测试剂盒(美国Merck Millipore)进行直接免疫荧光检测[4]。对确诊为RSV感染毛细支气管炎患儿进一步做血ECP及尿LTE4水平测定。

于清晨采集纳入研究儿童空腹静脉血和清洁中段尿，离心后分别采用嗜酸性粒细胞阳离子蛋白ELISA试剂盒(采购自上海西唐生物)、人白三烯E4定量检测试剂盒(采购自上海西唐生物)，使用HBS-1096A全自动酶标仪定量检测患儿血清ECP水平和尿LTE4水平。

1.3随访情况

每6个月对所有患儿通过电话、邮件和微信等进行随访，主要终点事件为哮喘发作，次要事件为失访。中位随访时间为(20.6±5.1)个月，共有18例患儿继发支气管哮喘。哮喘的诊断标准根据《儿童支气管哮喘诊断与防治指南(2016年版)》[5]，即存在支气管哮喘典型的发作症状(如反复喘息、咳嗽、气促和胸闷)和体征(发作时双肺可闻及散在或弥漫性哮鸣音)，及支气管舒张试验阳性。

1.4统计学方法

2结果

2.1各组患儿血ECP和尿LTE4水平的对比

中-重度组血ECP和尿LTE4水平均显著高于对照组(t值分别为11.230和13.086，均P<0.05)和轻度组(t值分别为7.616和7.245，均P<0.05)，轻度组血ECP和尿LTE4水平均显著高于对照组(t值分别为10.914和6.673，均P<0.05)；

继发哮喘组血ECP和尿LTE4水平均显著高于对照组(t值分别为10.868和11.934，均P<0.05)和非哮喘组(t值分别为4.538和7.150，均P<0.05)，非哮喘组血ECP和尿LTE4水平均显著高于对照组(t值分别为8.460和7.668，均P<0.05)，见表2。

组别例数(n)血ECP(ng/mL)尿LTE4(pg/mL)对照组2636.31±10.57352.11±122.32病情 轻度组7964.76±11.82*561.53±143.66* 中-重度组2690.68±22.31*#973.46±208.91*#F(对照组与病情各组)94.233111.255P<0.001<0.001预后非哮喘组7566.55±17.22*606.82±153.11*哮喘组1887.89±20.68*△906.82±186.46*△F(对照组与预后各组)61.57683.749P<0.001<0.001

注：*与对照组比较P<0.05；#与轻度组比较P<0.05；△与非哮喘组比较P<0.05。

2.2患儿病情评分与血ECP和尿LTE4水平的相关性

经线性相关分析显示，毛细支气管炎病情评分与血ECP(r=0.776，P<0.05)和尿LTE4(r=0.765，P<0.05)水平具有明显的相关性，见图1A、图1B。

图1患儿病情评分与血ECP和尿LTE4水平的相关性

Fig.1 Correlation of children's disease severity score with blood ECP and urinary LTE4 levels

2.3应用血ECP和尿LTE4水平单独或联合预测继发哮喘效能情况

ROC曲线显示，血ECP和尿LTE4单独预测继发哮喘的曲线下面积均低于0.9(AUC值分别为0.806、0.855)；联合预测毛细支气管炎后继发哮喘风险的效能较高(AUC=0.908，P<0.05)，见图2、表3。

图2应用血ECP和尿LTE4水平单独或联合预测继发哮喘的ROC曲线

Fig.2 ROC curves for predicting secondary asthma by blood ECP or urinary LTE4 level alone or by combination of them

表3应用血ECP和尿LTE4水平单独或联合预测继发哮喘效能的比较结果

Table 3 Comparison of efficacy of ECP and LTE4 levels alone or in combination in prediction of secondary asthma

检验结果变量AUC标准误差P95%CI尿LTE40.8550.044<0.050.789～0.922血ECP0.8060.056<0.050.697～0.916尿LTE4+血ECP0.9080.042<0.050.826～0.991

3讨论

毛细支气管炎常表现为咳嗽、发热、憋喘和呼吸困难，甚至出现紫绀，是1岁以下幼儿住院治疗的最常见原因，在世界各地广泛流行，冬春季节常出现暴发疫情[6]。尽管多数毛细支气管炎患儿临床表现较轻，且具有明显的自限性，但对于<12周、低出生体重和先天性疾病的患儿，仍具有较高的死亡率[7]。此外，流行病学研究显示，超过34%的毛细支气管炎患儿可能继发气道高反应性疾病，而哮喘是其中最常见的类型[8]。探讨毛细支气管炎患儿继发哮喘的有效预测方法，能够对高危患儿采取针对性的防治措施，有效地降低患儿哮喘的发生风险或延缓哮喘的发生。

3.1不同病情和预后患儿血ECP和尿LTE4水平的分析

本研究通过对比不同病情程度患儿血ECP和尿LTE4的水平显示，中-重度患儿血ECP和尿LTE4明显高于对照组和轻度组，轻度组患儿显著高于对照组(均P<0.05)。经线性相关分析显示，毛细支气管炎病情评分与血ECP和尿LTE4水平呈明显正相关。通过对所有患儿进行中位随访时间为(20.6±5.1)个月的随访，共有18例患儿继发支气管哮喘，12例失访，继发支气管哮喘的发生率为17.14%，这一发生率低于Balekian等[9]进行的为期5年的研究结果(27.8%)，其原因可能与随访时间较短，样本量较小，且存在12例失访病例有关。尽管RSV感染性毛细支气管炎后继发支气管哮喘的几率较高，但目前尚无较好的预测方式，对于具有发生支气管哮喘的患儿无法实施早期干预措施，以降低哮喘发生风险，减少发作次数[10]。本研究应用ROC曲线进行评估，血ECP和尿LTE4联合预测毛细支气管炎后继发哮喘风险的效能较高(P<0.05)。

3.2血ECP和尿LTE4与RSV感染性毛细支气管炎的相关性分析

RSV感染性毛细支气管炎的病理基础是RSV感染毛细支气管引起的毛细支气管黏膜水肿、上皮细胞脱落坏死和气道堵塞等表现；而此时毛细支气管周围表现为较高水平的炎性细胞和炎性介质浸润，其中嗜酸性粒细胞和白三烯(leukotriene，LT)最为常见[11]。ECP是嗜酸性粒细胞释放的一种特异性炎症介质，可反应嗜酸性粒细胞的活化程度[12]。ECP还参与了气道炎症反应，高水平的ECP能够增加气道的高反应性[13]。LT主要由肥大细胞和嗜酸性粒细胞产生，I型半胱酰白三烯(CysLT1)受体广泛分布于支气管和细支气管的平滑肌细胞、巨噬细胞和嗜酸性粒细胞。CysLT1介导的一系列炎性反应可以造成毛细支气管周围急性炎症、黏膜水肿、黏膜上皮细胞的坏死及黏液分泌增多，从而引起RSV毛细支气管炎的诸多症状[14]。RSV感染性毛细支气管炎继发支气管哮喘与气道的持续高反应性有关，而各种炎性细胞和炎性因子的高水平在其中发挥了重要作用[15]。有研究显示，在毛细支气管炎的治疗中应用白三烯调节剂(如孟鲁司特等)，能够显著抑制气道的高反应性[16]，明显降低毛细支气管炎后发生持续喘息的风险[17]，也可降低继发性支气管炎的发生率[18]，尤其是用于存在过敏体质和支气管哮喘家族史的患儿[19]。

综上所述，RSV毛细支气管炎患儿血ECP、尿LTE4水平与病情严重程度呈正相关；血ECP联合尿LTE4能够较好地预测患儿继发支气管哮喘的风险。