散发性结直肠癌癌组织中错配修复蛋白和nm23蛋白表达与临床病理特征的关系

2018-08-10徐晋珩刘丽云田莉王爱军郝世柱张志勇

东南大学学报（医学版） 2018年4期

徐晋珩,刘丽云,田莉,王爱军,郝世柱,张志勇

(唐山市工人医院 1.病理科,2.肿瘤外科,河北唐山 063000)

结直肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一，居我国恶性肿瘤的第4位。近年来相关数据表明，结直肠癌的发病率有逐年上升的趋势，严重威胁着人们健康[1]。结直肠癌的发生过程十分复杂，同时牵涉多个肿瘤相关基因的参与[2]。临床上发现，参与结直肠癌发生的分子途径主要有染色体不稳定性途径(CIN)与微卫星不稳定(MSI)。在结直肠癌患者中CIN占80%左右，而导致CIN发生因素有癌基因、抑癌基因突变，经过多阶段、多因素而致癌[3]。MSI主要是由错配修复基因缺陷造成。目前临床上发现的错配修复蛋白(MMRP)共有7种，临床上主要研究的蛋白只有4种，而这些蛋白表达水解后的产物均为一种核酸水解酶，这种水解酶能纠正DNA复制过程中错配的碱基，使基因在复制过程中更具有保真性[4]。除此之外，还有研究[5]表明错配修复基因与肿瘤患者某些临床病理特征存在一定的相关性。因此，本研究以680例散发性结直肠癌患者作为研究对象，探讨MMRP和nm23蛋白表达与临床病理特征的关系及两者相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2014年8月至2017年1月本院存档的680例手术切除散发性结直肠癌标本。纳入标准：根据患者临床症状以及相关检查病理检查，确诊为散发性结直肠癌患者。排除标准：(1) 符合Amsterdam Ⅱ诊断标准的遗传性非息肉病性结直肠癌(HNPCC)；(2) 在手术治疗前经过放化疗治疗的患者。本组患者中男380例，女300例；年龄38～68岁，平均(48.34±7.54)岁。

1.2 研究方法

标本采用10%甲醛固定、常规脱水、取材、石蜡包埋、HE染色。根据HE切片选取病灶区域，用记号笔定位。用采样针从标记好的蜡块组织中取 2～4 mm长的组织条，打入42孔(6×7)蜡块微阵列中。其中第1行后2个孔作为空白及定位标识。

1.3 指标检测

对MLH1、PMS2、MSH2、MSH6以及nm23进行染色，采用罗氏全自动免疫组化仪执行，MLH1、PMS2、MSH2、MSH6以及nm23抗体均由中杉金桥公司提供。

1.4 判断标准

每张切片选取阳性率高的区域10个高倍视野，每个视野计数100个细胞。(1) MMRP各蛋白表达检测：MLH1、PMS2、MSH2和MSH6均在细胞核内表达，采用半定量积分法检测。0分表示无阳性，1分表示阳性细胞占≤10%，2分表示阳性细胞占11%～50%，3分表示阳性细胞占51%～80%，4分表示阳性细胞所占比例≥81%；0分为无色，1分为浅黄色，2分为棕黄色，3分为棕褐色。两种得分结果相乘，0分表示蛋白缺失，1分表示蛋白低表达，≥2分表示蛋白阳性，缺失与蛋白低表达按照阴性表达计算。(2) nm23：表达于细胞质，细胞质呈黄色或是棕黄色为表达阳性。

1.5 统计学处理

2 结果

2.1 MMRP在散发性结肠癌组织中的表达

本组MMRP阳性者605例，表达缺失者75例，缺失率为11.03%。其中MLH1缺失11例(14.67%)，PMS2缺失5例(6.67%)，MSH2缺失6例(8.00%)，MSH6表达缺失3例(4.00%)；MLH1联合PMS2表达缺失19例(25.33%)，MSH2联合MSH6表达缺失12例(16.00%)， MLH1联合MSH2表达缺失5例(6.67%)，MLH1联合MSH6表达缺失3例(4.00%)，MSH2联合PMS2表达缺失3例(4.00%)，MLH1联合MSH2、MSH6表达缺失2例(2.67%)，MSH2联合MSH6、PMS2表达缺失3例(4.00%)，4种表达均缺失者有3例(4.00%)。见图1。