网织血小板及其相关参数在儿童免疫性血小板减少症及脓毒症中的应用

宋 辉，孔飞飞， 刘 旋， 石翠明， 常 敏， 完颜新蕊

（1.济宁医学院附属医院检验科，山东 济宁 272000；2.济宁医学院生物科学学院，山东 济宁 272029）

1969年，Ingram和Coopersmith在大量失血患者的外周血中第1次发现一种新生血小板（platelet，PLT）。这种新生PLT与成熟的PLT相比，体积更大，胞质颗粒更加粗糙，可被美蓝染液染色，说明其胞质中存在RNA残留成分，并且具有更强的活性，因此将其称为网织血小板（reticulated platelet，RP）或未成熟血小板（immature platelet fraction，IPF）。RP是骨髓巨核细胞释放到外周血中的幼稚PLT，反映人体PLT的更新速度及骨髓中PLT的生成能力[1]。PLT参数——平均血小板体积（mean platelet volume，MPV）及血小板分布宽度（platelet distribution width，PDW）反映了PLT体积的大小及PLT容积的变异程度。RP及PLT相关参数在儿童免疫性血小板减少症（immunological thrombocytopenia，ITP）和儿童脓毒症导致的PLT降低患者的鉴别诊断、疗效观察、预后等方面具有重要的临床意义。本研究拟探讨网织血小板比率（reticulated platelet ratio，RP%）、RP绝对值、MPV和PDW在儿童ITP及儿童脓毒症导致的PLT降低疾病鉴别诊断中的价值。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取2015年6月—2016年6月济宁医学院附属医院门诊及住院，初次确诊为儿童ITP患者（ITP组）及儿童脓毒症（脓毒症组）所致的PLT降低患儿各30例。ITP组中男18例，女12例，年龄4个月~12岁；脓毒症组中男17例，女13例，年龄6个月~14岁。以同期济宁医学院附属医院初次确诊的再生障碍性贫血（aplastic anemia，AA）患儿（AA组）20例作为疾病对照组，其中男8例、女12例，年龄4个月~13岁。以同期济宁医学院附属医院体检健康儿童30名作为正常对照组，其中男15名、女15名，年龄3个月~14岁，PLT总数正常，临床查体各项指标均正常。

1.2 方法

采集所有对象的血液标本。采用XN-9000全自动血液分析仪（日本希森美康公司）及配套试剂检测RP%、RP绝对值、MPV和PDW。用配套校准品校准仪器，每日测试前仪器都进行本底检测和室内质控，质控通过后再进行标本的检测。

1.3 统计学方法

采用SPSS 17.0软件进行统计分析。呈正态分布的计量资料采用±s表示，多组间比较采用方差分析，两两比较采用q检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

ITP组和脓毒症组RP%、MPV、PDW均明显高于正常对照组及AA组（P＜0.05），且ITP组高于脓毒症组（P＜0.05）。ITP组和脓毒症组RP绝对值低于正常对照组（P＜0.05）。AA组与正常对照组之间RP%、MPV、PDW差异均无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

3 讨论

表1 ITP、脓毒症组、AA组及正常对照组RP%、RP绝对值、MPV和PDW的比较 （±s）

表1 ITP、脓毒症组、AA组及正常对照组RP%、RP绝对值、MPV和PDW的比较 （±s）

注：与正常对照组比较，*P＜0.05；与AA组比较，#P＜0.05；与ITP组比较，△P＜0.05

组别 例数 RP%（%） RP绝对值（×109/L） MPV（fL） PDW（fL）正常对照组 30 2.90±1.07 5.80±3.54 10.40±1.90 13.00±2.77 AA组 20 2.70±1.02 0.90±0.39 10.00±1.94 12.60±2.63 ITP组 30 16.80±4.28*# 3.60±2.12*# 20.00±4.63*# 26.50±3.68*#脓毒症组 30 8.30±2.96*#△ 4.50±2.51*# 14.30±2.66*#△ 18.60±3.64*#△

RP是骨髓释放到外周血中的新生PLT，是巨核细胞生成的幼稚PLT，存在于RP胞质中的RNA成分与巨核细胞活性有着密切关系。李文庆等[2]的研究结果显示，IPF%（IPF与PLT总数的比值）与MPV、PDW、大血小板比率均呈正相关，且与PDW高度相关。他们认为IPF%可用于判断骨髓PLT的增生情况，特别是部分标本未能报告出MPV、PDW时，IPF%可作为MPV、PDW必要的补充。巨核细胞活性增强，RP胞质中RNA水平增高，即RP%增高。所以，RP%可判断巨核细胞活性，预测RP生成能力。MPV代表单个PLT平均体积，常用来评价骨髓功能。PDW是反映PLT体积大小变化的重要参数。PLT相关参数与体外PLT功能具有很好的相关性，可间接反映PLT功能状况。通过对RP及其参数的检测，可鉴别患者PLT减少原因是骨髓生成障碍还是外周血PLT破坏增加导致。因此，RP及其参数是分析骨髓PLT生成及PLT更新速度的重要指标。随着检测方法的不断改进，RP在临床上的应用更加广泛，在儿童血小板减少症病因诊断及疗效观察中具有更重要意义。

儿童ITP是由于免疫性因素，患者PLT破坏增加导致的PLT减少性疾病。ITP患儿由于外周血PLT破坏增加，因此骨髓中的巨核细胞生成PLT的速率加快，释放到外周血中的RP增加。ITP过去的诊断标准仅以PLT计数＜100×109/L作为唯一的标准[3]。儿童脓毒症往往导致多器官功能障碍，骨髓是常见的受累器官，常表现为PLT降低。PLT作为急性生理与慢性健康评分-Ⅱ和简明急性生理学评分Ⅱ的评分项目，在脓毒症患者中是一个独立的危险因子，PLT进行性下降往往提示疾病预后不良[4-6]。PLT降低的主要原因是由于严重的感染导致患者的凝血功能障碍，大量微血栓的形成引起PLT过度消耗[7]，由于PLT的消耗过度，导致PLT的生成速率加快，释放到外周血中的新生PLT明显增加，与之相关的RP、RP%、MPV及MPV等PLT参数也随之升高。陈建霞等[8]的研究结果显示，RP及RP%可以有效地明确PLT的降低是外周血中的PLT遭到破坏所致。AA是由骨髓造血功能障碍导致的，其发生虽然与免疫因素有关，但免疫因素仅影响早期阶段及造血干/祖细胞，对PLT的质量没有影响。治疗后AA患儿的RP检测结果有可能会发生变化，但还有待于进一步研究。PLT相关参数具有不同的特点，其对指导PLT减少症病因的判断具有一定的意义[9]。

综上所述，RP在PLT减少性疾病的诊断和治疗过程中有较高的临床应用价值，特别是在儿童ITP及儿童脓毒症所致的PLT降低患儿中，RP及PLT相关参数的检测可以部分替代骨髓穿刺等检查，用于反映骨髓中巨核细胞的增生情况，减少创伤性检查给患者带来的痛苦，对分析患者PLT降低的原因具有重要的意义，同时在患者的疗效观察上也有非常重要的应用价值。因此，RP%、RP、MPV、PDW可作为儿童ITP及儿童脓毒症患儿的常规检查项目。