降钙素原、C反应蛋白检测在新生儿血流感染诊断中的价值

王昭蓉，邵雪峰

（南通市妇幼保健院检验科，江苏 南通 226018）

新生儿血流感染是新生儿期一种严重的全身性感染性疾病，因细菌或真菌侵入血液循环大量繁殖并产生毒素，引起全身炎症，其发病急、病死率高[1]。血培养作为诊断血流感染的“金标准”，能为临床诊断和合理使用抗菌药物提供依据，但有阳性检出率低、培养周期长以及样本采集易受污染等缺点，给临床诊断和治疗带来困扰，不利于患儿的早期诊治[2]。有研究结果表明，降钙素原（procalcitonin，PCT）和C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）在血流感染诊断中有重要作用，作为细菌感染的早期标志物已被广泛应用于临床[3-4]，用于细菌、病毒或真菌感染、局部感染或全身感染的鉴别诊断。本研究探讨PCT和CRP在新生儿血流感染诊断中的价值，旨在为血流感染的早期诊断和抗菌药物治疗提供依据。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取南通市妇幼保健院2015年7月—2016年9月新生儿科血培养结果为阳性且血培养报阳时间 ＜15 h的患儿55例为实验组，以同期南通市妇幼保健院血培养结果为阴性、临床诊断为非血流感染患儿55例为对照组。

1.2 病例入选标准

（1）年龄1～27 d； （2）PCT、CRP检测与血培养样本采集时间差＜8 h；（3）同一患儿住院期间行多次血培养的计为1例。

1.3 方法

1.3.1 新生儿病例资料采集 记录新生儿的基本信息，如年龄、性别、血培养样本采集同期的实验室检测结果（PCT、CRP）。PCT采用VIDAS全自动荧光免疫分析仪（法国生物梅里埃公司）及配套VIDAS B.R.A.H.M.S PCT试剂（酶联荧光法）检测，检出限为0.05 ng/mL。CRP采用免疫透射比浊法，试剂由上海申索佑福医学诊断用品有限公司提供，检测仪器为AU640全自动生化分析仪（日本奥林巴斯公司）。参考区间：PCT为0～0.2 ng/ mL，CRP为0～6 mg/L。

1.3.2 细菌培养及鉴定 采用BACTEC 9050全自动血培养仪（美国BD公司）及配套培养瓶进行血培养，阳性报警后记录时间，并转种哥伦比亚血琼脂平板进行分离培养，分离单个菌落后采用MicroScan WalkAway 96 plus全自动微生物鉴定与药敏分析系统（美国Beckman-Coulter公司）及配套鉴定卡和药物敏感性试验卡进行鉴定及体外药物敏感性试验。

1.4 统计学方法

采用WHONET 5.6和SPSS 21.0软件进行统计分析。经计算各组数据峰度系数和偏度系数不等于0，且W检验显示数据呈偏态分布，因此计量资料采用中位数（M）[四分位数（P25~P75）]表示，组间比较用秩和检验。采用受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线评估PCT和CRP诊断新生儿血流感染的价值。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 实验组与对照组PCT、CRP检测结果

实验组PCT和CRP水平均明显高于对照组（P=0.000、P=0.002）。见表1。

表1 实验组与对照组PCT、CRP水平及阳性数的比较

2.2 实验组病原菌分布

实验组55例血培养阳性样本中检出革兰阳性菌38株，占69.1%；革兰阴性菌17株，占30.9%。具体细菌种类见表2。

表2 实验组病原菌分布

2.3 革兰阳性菌组与革兰阴性菌组PCT、CRP检测结果比较

革兰阴性菌组PCT水平明显高于革兰阳性菌组（P＜0.05），而CRP水平2个组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。见表3。

2.4 PCT、CRP诊断效能的比较

ROC曲线分析显示，以PCT=0.245 ng/ mL为诊断血流感染的临界值，其敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确度分别76.4%、78.2%、77.8%、76.8%和77.3%，曲线下面积（area under curve，AUC）[95%可信区间（confidence interval，CI）]为0.830（0.751~0.910）；以CRP=9.185 mg/L为诊断新生儿血流感染的临界值，其敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确度分别为56.4%、72.7%、67.4%、62.5%和64.5%，AUC（95%CI ）为0.669（0.565~0.772）。见图1。

表3 革兰阴性菌组和革兰阳性菌组PCT、CRP水平及阳性数的比较

图1 PCT和CRP鉴别新生儿血流感染的ROC曲线

3 讨论

血培养阳性是血流感染的“金标准”，但其敏感性差，耗时长，操作过程中样本容易被污染而影响检测结果，因此快速诊断血流感染是一个长期困扰临床的问题。PCT是无活性的降钙素的前肽物质，由116个氨基酸组成，半衰期为25~30 h。PCT作为炎症标志物之一，不直接启动脓毒反应，但可放大并加重脓毒血症的病理过程[5]，其上升幅度与疾病的严重程度呈正比[6]。新生儿PCT水平不受母体影响，仅与自身细菌感染的严重程度有关。新生儿出生2 d内PCT水平生理性升高，出生12 h内＜2 ng/mL，24～35 h达高峰（可达20 ng/mL），而后下降，72 h降至成人水平。CRP是一种由肝细胞合成的非特异急性时相蛋白，被公认为是敏感性较强的炎性指标之一，是目前临床上应用较广泛的检测项目。正常情况下CRP水平较低，当出现感染、外伤、心脑血管疾病时会迅速升高[7]，一般在炎症感染后12～18 h升高，其浓度与感染的严重程度呈正相关，其动态变化反映了体内炎性反应的程度[4]。

本研究结果表明，实验组PCT、CRP水平明显高于对照组（P＜0.05），提示PCT、CRP的检测结果对新生儿血流感染的辅助诊断有一定价值。在55例血培养阳性样本中革兰阳性菌占69.1%，革兰阴性菌占30.9%。革兰阴性菌组PCT水平高于革兰阳性菌组（P＜0.05），这可能与体内代谢途径以及菌体成分不同有关：（1）革兰阴性菌细胞壁中的脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）又称内毒素，是极强的内源性致热源，在体内诱导相应细胞分泌PCT的过程中起重要作用[8]；（2）革兰阴性菌表面覆盖的LPS能够与Toll样受体（Tolllike receptor，TLR）-4受体结合，而革兰阳性菌表面覆盖的肽聚糖与TLR-2受体结合，二者激活不同的信号转导通路，导致免疫细胞分泌的炎性介质如PCT等的量也不同。革兰阳性菌组和革兰阴性菌组CRP水平差异无统计学意义（P＞0.05），说明CRP并不能区分革兰阳性菌和革兰阴性菌的感染。本研究结果显示，对照组有27.3%的患儿CRP水平高于临界值，提示局部感染也可导致CRP水平升高，因此CRP缺乏特异性[9]，临床价值有一定的局限性。

本研究结果显示，PCT和CRP诊断新生儿血流感染的AUC分别为0.830和0.669，提示PCT较CRP在鉴别新生儿血流感染时具有更大的意义[10]。因此，PCT更适于新生儿血流感染的早期监测，能更好地指导临床医生合理使用抗菌药物。另外，实验组中有23.6%的血培养阳性者PCT水平未升高，这可能是由药物等因素所致。马超等[11]的研究结果显示，牛磺酸等药物可减少婴幼儿体外循环下PCT的释放[11]。还应注意的是，当PCT水平升高，血培养结果又是阴性，而临床又高度怀疑血流感染时，应结合其他感染指标综合判断。由于血培养结果受采血量、采集时间等诸多因素的影响，所以血培养阴性并不能完全排除血流感染。对照组中有21.8%的患者PCT阳性，这主要是因为受系统性炎症反应综合征、神经内分泌肿瘤等因素的影响，PCT水平异常升高。提示依靠PCT判断阳性结果时需排除以上干扰因素。CRP的AUC、敏感性、特异性均低于PCT，因此对新生儿血流感染的诊断价值有限。

综上所述，PCT、CRP水平在新生儿血流感染的诊断中有一定的临床应用价值，但PCT的诊断效能更高。