胸腺瘤患者螺旋CT影像特征与CKP、VEGF表达的相关性研究

　，，立红，城瑞，　*

(1.河北省沧州市中心医院CT诊断科，河北 沧州061001；2.河北省沧州市中心医院胸外科；3.河北省沧州市中心医院病理科)

胸腺瘤为源于胸腺上皮的肿瘤，多发病于前纵隔处，临床上较为常见[1-2]。上皮细胞的主要构成成分细胞角蛋白(CKP)为重要的肿瘤标志物，其常用于诊断肿瘤[3]。肿瘤血管生成对肿瘤的生长起着重要的作用，血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)有益于血管内皮细胞的分裂增殖及强化血管通透性等，同肿瘤的生长、转移关系密切[4]。回顾性分析本院收治的83例胸腺瘤患者临床资料，分析其螺旋CT影像特征和肿瘤组织中CKP和VEGF的表达情况，进而探讨其相关性，现报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料以本院2013年2月～2017年4月收治的83例胸腺瘤患者为研究对象，所有患者均经手术病理检查确诊为胸腺瘤，其中男49例，女34例；年龄20～76岁，中位年龄55岁；37例表现为重症肌无力，有不同程度咳嗽、胸痛、声音嘶哑，疲乏无力及气短症状者30例，12例吞咽困难，5例上腔静脉综合征。病程1个月到3年不等。

1.2方法观察并记录所有患者的螺旋CT影像表现，如外形是否呈锯齿或尖角状，有无分叶状，密度是否均匀，病灶直径，肺部转移情况，心包、胸膜有无侵犯，纵隔脂肪线是否存在等。检测所有患者手术病理切片CKP和VEGF的表达情况。

1.2.1螺旋CT扫描方法采用德国西门子公司Somatom Emotion 16排螺旋CT扫描仪，扫描参数125 mA，120 kV；5～10 mm的准直器宽度，床移动速度为7.5 mm/s。自胸廓入口扫描至横隔处，容积扫描后重建薄层，index 1.5 mm。增强扫描对比剂为65%Angiografin、76%泛影葡胺，肘前静脉注射，流率为2～3 mL/s，延迟扫描时间12～15 s。图像均经VoxelQ工作站和胶片双重结合分析，由2位资深医生独立阅片，观察并记录数据。

1.2.2CKP、VEGF检测试验试剂：鼠抗人细胞角质蛋白(广谱)单克隆抗体，鼠抗人原始造血细胞单克隆抗体CD34，VEGF多克隆抗体(即用型)，DAB浓缩型试剂盒和SP免疫组织化学染色试剂盒均由上海科新生物技术公司提供。检测方法：取本组手术病理标本行免疫组化SP法染色观测CKP、VEGF表达情况，所有操作均按照试剂盒说明进行，具体方法：①石蜡切片行常规二甲苯脱蜡。②使用缓冲液PBS(pH 7.4)进行3次漂洗，每次3 min。③将定量pH=6.0的柠檬酸盐缓冲液放于微波盒并加热，直至沸腾，组织切片脱蜡水化后放于高温塑料切片架，放于沸腾缓冲液中，微波持续加热处理5～10 min，重复1次，取出微波盒冷却为常温。④取出玻片用蒸馏水冲洗2次，再用缓冲液漂洗2次，每次3 min。⑤滴加过氧化酶阻断剂，37 ℃环境下孵育10 min。⑥缓冲液漂洗3次，每次3 min。⑦甩去缓冲液，滴加非免疫性动物血清，并在37 ℃环境下孵育10 min。⑧甩去血清，并滴入第一抗体(CKP、VEGF)，4 ℃环境下过夜。而后缓冲液冲洗3次，每次3 min。再甩去缓冲液，滴入第二抗体(生物素标记的鼠抗人抗体)，37 ℃环境中孵育10 min，而后缓冲液漂洗3次，每次3 min。甩去缓冲液后加入DBA新鲜显色剂，显微镜下观察期显示状况。⑨用自来水冲洗后行苏木素复染，再用0.5%盐酸酒精分化，缓冲液漂洗，以氨水返蓝。再将切片行梯度酒精常规脱水，二甲苯透明，以中性树胶封片。

1.2.3结果判读以细胞阳性百分率和染色强度得分之和为CKP、VEGF表达评判标准[5]。随机选取(400倍)高倍镜视野5个来进行评判：①0分为无染色，1分为浅黄色染色，2分为棕黄色染色，3分为黄褐色染色。②0分为细胞阳性率低于5%；1分为细胞阳性率为5%～25%；2分为细胞阳性率为25%～50%；3分为细胞阳性率>50%。取上述两项得分之和，阴性(-)为0分；弱阳性(+)为1～2分；中度阳性(++)为3～4分；强阳性(+++)为≥5分。

1.3统计学方法所有数据均用软件SPSS18.0处理。计数资料以率(%)表示，比较采用χ2检验。以P<0.05表示差异有统计学意义。

2　结　　果

2.1胸腺瘤患者CT影像学特征所有患者均行CT平扫，显示病灶均处于前中纵隔或前纵隔，其中36例位于左前纵隔，42例位于右前纵隔，5例位于双前纵隔；外形呈尖角或锯齿状33例，呈分叶状55例；病灶最大13 cm×8 cm，最小2 cm×2 cm，直径≤10 mm 54例，>10 mm 29例；病灶密度均匀39例，密度不均匀44例；肺内转移7例，侵犯心包、胸膜27例；37例存在纵隔脂肪线，46例不存在。41例行增强扫描均显示病灶明显强化。

2.2胸腺瘤CKP、VEGF表达同CT强化幅度的关系在41例行CT增强扫描的患者中，CT强化幅度>20 HU的病灶25例，CT强化幅度≤20 HU的病灶16例。在CT强化幅度>20 HU的病灶中VEGF阳性表达率明显高于CT强化幅度≤20 HU的病灶(χ2=6.002，P=0.011)；但强化幅度同CKP的阳性表达率无明显相关性(χ2=0.151，P=0.672)。见表1。

表1　41例胸腺瘤患者CKP和VEGF阳性表达同CT强化幅度间的关系　(例，%)

注：CKP为细胞角蛋白，VEGF为血管内皮生长因子

2.3胸腺瘤CKP表达同CT影像学特征的相关性分析83例胸腺瘤患者病灶CKP表达均呈阳性，但阳性强度不同，分析其表达同CT影像学特征的关系。结果提示：胸腺瘤CKP表达与病灶外观是否呈尖角或锯齿状、密度是否均匀、是否侵犯心包及胸膜和是否存在纵隔脂肪线存在相关性，而与外观是否呈分叶状、病灶直径、肺内是否转移无关。见表2。

表2　83例胸腺瘤CKP表达同CT影像学特征的相关性分析　(例，%)

注：CKP为细胞角蛋白

2.4胸腺瘤VEGF表达同CT影像学特征的相关性分析83例胸腺瘤患者病灶VEGF表达均呈阳性，且阳性强度不同，分析其表达同CT影像学特征的关系，结果提示：胸腺瘤VEGF表达与病灶外观是否呈尖角或锯齿状、是否呈分叶状、肺内是否转移存在相关性，而与密度是否均匀、病灶直径、有无纵隔脂肪线和是否侵犯心包、胸膜无关。见表3。

表3　83例胸腺瘤VEGF表达同CT影像学特征的相关性分析　(例，%)

注：VEGF为血管内皮生长因子

3　讨　　论

胸腺瘤是一种发病在纵隔处的原发性肿瘤，其发病率较高，占前纵隔肿瘤的50%左右[6-8]。既往研究发现，多数胸腺瘤的包膜较完整，一部分胸腺瘤会发生转移、侵犯和复发，其在生物行为学上多表现为低度恶性或潜在恶性[9-10]。本文对本院83例经手术病理检查确诊的胸腺瘤患者的临床资料进行回顾性分析，通过分析其CT影像学资料，总结出胸腺瘤大致的影像学特征：①多发病于前中纵隔或前纵隔，本组36例位于左前纵隔，42例位于右前纵隔，5例位于双前纵隔；②病灶多不规则，本组呈尖角或锯齿状33例，呈分叶状55例；③病灶密度无特殊差异，本组病灶密度均匀39例，密度不均匀44例；④少部分发生肺内转移，可侵犯心包、胸膜，本组肺内转移7例，侵犯心包、胸膜27例；⑤增强扫描多强化，本组41例行增强扫描均显示病灶明显强化。

大量文献显示，肿瘤的生长及转移的主要过程是肿瘤内部新生血管形成，该新生血管导致毛细血管通透性、血容量等变化[11-13]。肿瘤细胞分泌的VEGF是诱导血管生成的重要因子，VEGF在肿瘤中的过高表达对胸腺瘤内血管的生成起着推动作用[14]。同时VEGF还能增加CT检查对比剂的滞留量，故可增强CT增强扫描对肿瘤的分辨能力，可以完整显示肿瘤状况，全面反映肿瘤供血状况[15]。本文结果显示，CT增强幅度越大，VEGF阳性表达率越高，而CKP阳性表达率同CT的增强幅度无关。为此，可以通过增强CT扫描的强化幅度对肿瘤性质、转移、预后和侵犯情况进行判断。

KUO等[16]研究表明，CKP和VEGF是上皮细胞的重要组成部分，均为重要的肿瘤生物学标志物，当上皮细胞发生肿瘤病变时，二者均会出现高表达。本文所有患者的CKP和VEGF表达均为阳性，但有强弱差别。在CT特征表现为外形呈尖角或锯齿状、密度均匀、有纵隔脂肪线存在和有心包、胸膜侵犯时，CKP均表达为中阳性和强阳性，提示胸腺瘤CKP表达与病灶外观是否呈尖角或锯齿状、密度是否均匀、是否侵犯心包及胸膜和是否存在纵隔脂肪线存在相关性，而与外观是否呈分叶状、病灶直径、肺内是否转移无关。此状况可能同胸腺瘤的类型有关，有研究发现上皮型胸腺瘤中CKP表达多为中等阳性和强阳性，呈弱阳性的多为淋巴型胸腺瘤[17-18]。可见，单纯看CKP表达并不能判断胸腺瘤的性质，该表达只是提示此肿瘤发生于上皮细胞，但可以此来鉴别胸腺淋巴瘤。VEGF是判断肿瘤性质及预后的重要指标[19]。本文胸腺瘤CT特征表现为尖角或锯齿状、分叶状、肺内转移时，其VEGF多表现为中等阳性和强阳性，提示胸腺瘤VEGF表达与病灶外观是否呈尖角或锯齿状、是否呈分叶状、肺内是否转移存在相关性，而与密度是否均匀、病灶直径、有无纵隔脂肪线和是否侵犯心包、胸膜无关。此结果提示出现此类影像学特征时胸腺瘤的恶性程度较高，且肿瘤生长较为活跃。

总之，胸腺瘤螺旋CT影像特征与CKP、VEGF表达明显相关，为胸腺瘤的诊断提供了一种便捷的方法，对该病的临床诊断及治疗具有重要价值。