ICP-MS法测定注射用牡荆素铅、镉、砷、汞、铜的含量

徐茂红，　邵　旭,　牛海军,　李晓亮,　李光辉

(1.皖西卫生职业学院 药学系，安徽 六安　237000；2.合肥七星医药科技有限公司，安徽 合肥　230088)

牡荆素(Vitexin)为来源于牡荆叶、牡荆子和山楂叶中黄酮类有效单体，具有镇痛、抗炎免疫、抗缺血性脑损伤及抗心肌缺血再灌注损伤等多种生物学活性[1-3]。由于牡荆素注射剂直接进入血液，风险较大，其中重金属检测和限量控制对中药注射剂用药安全具有重要意义[4]。本研究采用ICP-MS测定注射用牡荆素中铅、镉、砷、汞、铜含量，并制定限度控制产品质量，保证临床用药安全。

1　材料与方法

1.1　药品与试剂

注射用牡荆素(合肥七星医药科技有限公司，批号：20161020、20161022、20161024)；铅、镉、砷、汞、铜单元素标准溶液(100μg/mL)，购自国家标准物质研究中心；硝酸、硫酸、盐酸优级纯，购自南京化学试剂股份有限公司，娃哈哈纯化水：经Milli-Q滤过，电阻率达到18.2MΩ.cm/25 ℃。

1.2　主要仪器与设备

ELAN DRC-e电感耦合等离子体质谱仪，美国PE公司；MARS-X微波消解仪，美国CEM公司；

1.3　试验方法

应用ICP-MS测定法，采用四级杆碰撞反应池技术，有效减少多原子离子的干扰，保证156CeO/140Ce<1.5%，双电荷70Ce2+/140Ce<3%。优化的ICP-MS工作参数(表1)。

表1　ICP-MS仪器的工作参数

1.4　溶液的制备方法

1.4.1供试溶液的制备取供试品0.50 g，精密称定，置耐压耐高温微波消解罐中，加硝酸5 mL，安装好消解罐置微波消解仪内，按表2条件消解。消解完成后温度显示低于60 ℃以下取出消解罐，放冷、少量水洗涤消解内罐，取出消解液置50 mL容量瓶中，加入金单元素标准溶液(1 μg/mL)200 μL，用水稀释至刻度，摇匀，即得。除不加金单元素标准溶液外，同法制备试剂空白溶液。

表2　微波消解仪的分析条件参数

1.4.2标准品储备液的制备分别精密量取铅、镉、砷、汞单元素标准溶液适量，用10%硝酸稀释制成浓度为1 μg/mL标准品储备液。另精密量取铜单元素标准溶液适量，用10%硝酸溶液制成浓度为10 μg/mL标准品储备液(塑料瓶内密封低温保存)。

1.4.3标准溶液的制备精密量取铅、镉、砷、铜标准品储备液，用10%硝酸溶液稀释制成每1 mL含铅0 ng、1 ng、5 ng、10 ng、20 ng，含镉0 ng、0.5 ng、2.5 ng、5 ng、10 ng，含砷0 ng、1 ng、5 ng、10 ng、20 ng，含铜0 ng、40 ng、100 ng、200 ng、500 ng的系列浓度混合溶液。另精密量取汞标准品储备液适量，用10%硝酸溶液稀释制成每1 mL分别含汞0 ng、0.2 ng、0.5 ng、1 ng、2 ng、5 ng的溶液(临用前配制)。

1.4.4标准曲线的绘制使用1.0 μg/mL在线内标溶液，将标准系列溶液进机测定，测得的工作曲线方程(表3)。

表3　标准曲线及线性范围

1.4.5重复性试验和加样回收率检测：取供试品(批号：20161020)约0.5 g，精密称定，平行6份，按1.4.1制备，供试品(批号：20161020)约0.5 g，精密称定，平行6份，分别精密加入相应的铅、镉、砷、汞、铜标准溶液，按1.4.1制备，铅回收率(%)=(测得铅总量-样品中铅量)/添加铅量×100%；镉回收率(%)=(测得镉总量-样品中镉量)/添加镉量×100%；砷回收率(%)=(测得砷总量-样品中砷量)/添加砷量×100%A；汞回收率(%)=(测得汞总量-样品中汞量)/添加汞量×100%；铜回收率(%)=(测得铜总量-样品中铜量)/添加铜量×100%。

2　结果与分析

2.1　样品检测

2.2　重复性试验

由表4可知，检测结果显示重复性较好。

表4　重复性检测结果

2.3　加样回收率

由表5～9可知,铅、镉、砷、汞、铜五种重金属，其回收率分别为97.8%、97.2%、104.0%、91.2%和92.8%，综合表明回收率较好，符合要求。

表5　铅加样回收率

表6　镉加样回收率

表7　砷加样回收率

表8　汞加样回收率

表9　铜加样回收率

按照同样方法对3批牡荆素样品进行检测，检测结果见表10。

表10　注射用牡荆素样品中铅、镉、砷、汞、铜测定结果

3　结论与讨论

随着中药注射剂临床用药的广泛使用，其安全性受到高度关注[5-6]，铅、镉、砷、汞、铜为代表的重金属是中药注射剂中最为重要的外源性污染物之一，其毒性主要表现为慢性中毒[7]。所以对牡荆素注射剂中重金属进行限量检查具有十分重要的意义。从上述样品分析结果看，注射用牡荆素中5种有害重金属元素的含量均较低，符合2015版《中国药典》四部相应重金属元素限量的规定。

有关于重金属检测技术方面，齐景凯等采用微波消解，电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)测定蒙药中汞、铅、镉、砷、锡和铬6种重金属元素的含量[8]；李乐乐利用微波消解和ICP-MS技术对土壤样品和节节草植株种重金属元素Cr、Cu、Zn含量进行测定[9]。

本研究探索了电感耦合等离子体质谱法同时测定注射用牡荆素样品中铅、镉、砷、汞、铜的含量，该方法灵敏度高，检测限低，结果准确，可用于注射用牡荆素中重金属及有害元素的质量控制。