脑梗死患者促生长激素释放肽水平的研究

杨 硕 李 琳 李进领 刘喜灿 卜淑芳 贾延劼

1)郑州大学附属郑州中心医院神经内科，河南 郑州 450006 2)郑州大学第一附属医院神经内科，河南 郑州 450052

脑血管疾病已跃升为国民死因的首位[1]。近年来，我国人群卒中事件发病率仍呈上升趋势，给社会、家庭和患者带来了沉重的负担和巨大的痛苦。促生长激素释放肽(Ghrelin)是1999年由KOJIMA等在大鼠胃组织中发现的一种多肽，是生长激素促分泌受体(GHSR)的具有生物活性的内源性配体[2-5]。研究表明，Ghrelin在能量代谢、血脂/血糖代谢和血压调节方面起重要作用，血清Ghrelin水平的降低与胰岛素抵抗、血压升高和2型糖尿病有关[6-7]。糖尿病、高血压、代谢综合征均为脑梗死的高危因素，因此本研究通过检测脑梗死患者血清中Ghrelin水平，探讨Ghrelin水平变化趋势与脑梗死及颈动脉内膜厚度的关系，为临床诊治提供新的思路[8-10]。

1 对象与方法

1．1对象选取2014-01—2016-04郑州大学附属郑州中心医院住院治疗的脑梗死患者122例，男68例，女54例，年龄45～81(63.07±9.8)岁。所有脑梗死组病例符合全国第4届脑血管病学术会议的诊断标准并经头颅CT和(或)MRI 证实。排除标准：(1)脑梗死合并蛛网膜下腔出血、静脉窦血栓形成、严重颅脑外伤；(2)合并感染、肿瘤、痴呆、多发性硬化、营养不良或严重心、肝、肾功能不全；(3)患有其他可能影响血清Ghrelin水平疾病的患者。对照组选择同期在我院健康体检者，纳入标准：(1)既往无脑血管病事件；(2)其年龄、性别构成与脑梗死组相匹配。对照组共纳入125例，男68例，女57例，年龄47～76(61.28±8.25)岁。2组年龄、性别比较差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经郑州大学附属郑州中心医院伦理委员会批准，所有研究对象均签署书面知情同意书。

1．2方法2组检查前1 d清淡饮食，晚餐后禁食 8～10 h，检查日清晨抽肘静脉血，不抗凝，采血前避免剧烈活动及应激，血标本于37.0 ℃恒温箱静置30 min，3 000 r/min离心5 min后分离血清，存于-70 ℃冰箱中待测。一次性测定血清Ghrelin含量，采用酶联免疫法测定，试剂盒由上海西唐生物科技有限公司提供，操作严格按试剂盒说明书进行。

1．3颈动脉内-中膜厚度(carotid intima-media thickness，CIMT)的测量采用GE VOLUSON E8超声诊断仪，探头频率10 MHz，专人负责监测。受试者取仰卧位，双肩垫枕，头颈部尽量仰伸，头转向对侧。根据横断面和纵轴扫描情况，取颈总动脉起始处至分叉处范围内膜中层最厚处进行测量，CIMT定义为扫描图像中两条分别代表颈动脉腔内膜表面和富含胶原的外膜上层之回声线前缘之间的距离。连续测量3个心动周期取其平均值作颈动脉CIMT值。判断标准：CIMT<0.90 mm为正常；0.90 mm≤CIMT≤1.20 mm为内膜增厚；CIMT>1.20 mm，局部隆起增厚，向管腔突起，但未造成管腔狭窄为内膜斑块形成。

2 结果

2．1 Ghrelin水平比较脑梗死组血清Ghrelin水平(432.4±161.1)ng/mL，明显低于对照组的(813.6±403.4)ng/mL，差异有统计学意义(t=3.67，P<0.01)。

2．2脑梗死患者Ghrelin水平与CIMT值的关系脑梗死组中血清Ghrelin水平与CIMT值呈正相关(r=0.526，P<0.01)，血清Ghrelin水平越高，CIMT数值越大。见表1。

表1 2组血清Ghrelin水平、CIMT比较±s)

注：与对照组比较，*P<0.01

3 讨论

脑卒中已经成为我国居民死亡原因的首位，发病以老年人多见，给家庭和社会带来沉重负担，故探讨脑梗死的病因显得尤为重要[11-12]。本研究通过检测脑梗死患者血清中Ghrelin水平，探讨Ghrelin水平变化趋势与脑梗死及颈动脉内膜厚度的关系，为临床诊治提供新的思路[13-14]。

Ghrelin是一种新近发现的促生长激素释放肽，研究发现，Ghrelin及其受体在全身多个组织器官中广泛存在，能促进 GH 释放和诱导正能量平衡，生长素及其受体GHS-R密度在动脉粥样硬化病变中明显上调[15-17]。近年来研究发现，Ghrelin通过抑制凋亡发挥对多种细胞的保护作用，如胰岛B细胞、心肌细胞和内皮细胞[18-19]。有研究表明，高心血管疾病风险的病理状态下，如单纯性肥胖、胰岛素抵抗、高血压病和2型糖尿病，其血浆Ghrelin水平是降低的[20-21]。内皮细胞受损是动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)和心血管并发症发生的关键事件[22-24]。细胞凋亡的增加与内皮受损及心血管疾病相关。Ghrelin可显著抑制尼古丁对血管内皮细胞黏附分子-1的诱导作用及尼古丁诱导的NF-kB活化，进而抑制尼古丁引起的内皮功能紊乱，抑制高糖诱导的血管内皮细胞凋亡及凋亡蛋白caspase-3的表达。还可以在同型半胱氨酸诱导的猪冠状动脉内皮细胞功能障碍中，通过改善eNOS的表达和降低氧化应激发挥保护作用[25-26]。

目前，关于脑梗死病因的研究中，脑血栓形成为最主要因素[27-29]。血栓形成过程中，内皮细胞受损是核心因素，既往研究显示，血清HCY水平升高、血管内皮细胞NO分泌减少可导致血管内皮细胞功能受损及继发的动脉粥样硬化[30-32]，加剧动脉粥样硬化的病变进程，增加急性脑梗死的发生几率[33-34]；本研究发现，脑梗死患者Ghrelin水平明显低于正常对照组，结合关于促生长激素释放肽在体内作用机制，推测低水平的Ghrelin通过可能导致高血压、代谢综合征及直接的血管内皮细胞破坏从而影响脑梗死的发生及发展进程。

本研究中脑梗死患者颈动脉内膜厚度与血浆Ghrelin水平呈负相关，即血浆Ghrelin水平越低，颈动脉内膜厚度越厚，越可能形成颈动脉斑块[35-36]，极大增加了脑梗死的发生几率[37-38]。流行病学研究发现，血浆低Ghrelin水平与代谢综合征的老年患者颈动脉粥样硬化有相关性[39]，且Ghrelin能改善代谢综合征患者的内皮功能，提示Ghrelin在预防动脉粥样硬化的发展中扮演着有益的角色[40-44]。Ghrelin是近年来发现的生长激素促分泌物质受体的内源性配体，可通过降低基础状态下及肿瘤坏死因子α诱导的炎症因子的表达[45-46]，改善内皮功能，其在心血管系统中的保护作用已成为人们关注的焦点之一[47-48]。Ghrelin亦被证实可通过降低基础状态下及肿瘤坏死因子α诱导的趋化因子的表达[49]，增强一氧化氮的活性[50]，改善内皮功能。内皮损伤导致内皮功能障碍在动脉粥样硬化的形成过程中起重要作用[37]。Ghrelin能通过下调泡沫细胞中ACAT-1的表达抑制泡沫细胞的形成[51-53]，而这种负性调控作用是通过GHS-R发挥作用[54]。这种有益的效应可能为临床预防和治疗早期动脉粥样硬化提供基础实验依据，为干预动脉粥样硬化的形成提供新治疗靶点[55-58]。

综上，Ghrelin通过影响机体代谢功能及对血管内皮功能的直接作用在脑梗死的发生、发展中产生重要影响，与患者病情及预后密切相关，可为脑梗死的早期干预和预后的评估提供参考依据。

[1] ZHANG W，SONG Y，XU J．Effectiveness and safety of valsartan/amlodipine in hypertensive patients with stroke：China Status Ⅱ subanalysis[J]．Medicine (Baltimore)，2017，96(26)：e7 172．

[2] KOJIMA M，HOSODA H，DATE Y，et al．Ghrelin is a growth-hormone-releasing acylated peptide from stomach[J]．Nature，1999，402(6 762)：656-660．

[3] 龙飞，赵晓春，梁庆模．1-甲基乙内酰脲抑制家兔生长激素的分泌[J]．中国药理学通报，2017，33(3)：401-406．

[4] 肖小芹，舒圆月，邓桂明，等．乌药水提液对腹泻型肠易激综合征模型大鼠Ghrelin、MTL、SP、Sec水平的影响[J]．湖南中医药大学学报，2017，37(5)：477-480．

[5] 曲文志，李子豪，张云微，等．ghrelin调控ERK信号通路对乳腺癌细胞多药耐药的影响及机制[J]．现代肿瘤医学，2017，25(5)：687-690．

[6] GIBAS-DORNA M，NOWAK D，PIATEK J，et al．Plasma ghrelin and interleukin-6 levels correlate with body mass index and arterial blood pressure in males with essential hypertension[J]．J Physiol Pharmacol，2015，66(3)：367-372．

[7] CHOI K M，LEE J，LEE K W，et al．The associations between plasma adiponectin，ghrelin levels and cardiovascular risk factors[J]．Eur J Endocrinol，2004，150(5)：715-718．

[8] 颅咽管瘤治疗专家共识编写委员会，中华医学会神经外科学分会小儿神经外科学组．颅咽管瘤患者长期内分泌治疗专家共识(2017)[J]．中华医学杂志，2018，98(1)：11-18．

[9] 周春艳，尹相风，孙吉，等．慢性阻塞性肺疾病与代谢综合征及颈动脉内膜厚度的相关性研究[J]．现代生物医学进展，2016，16(10)：1 825-1 828．

[10] 李妙，张平洋，马小五，等．血管内膜中膜自动跟踪技术评价颈动脉孤立性斑块生物力学特性[J]．中国动脉硬化杂志，2018，26(2)：171-175．

[11] 刘国敏，张学艳，杨颖．血尿酸、血清胆红素与颈动脉粥样硬化的相关性研究[J]．现代中西医结合杂志，2017，26(16)：1782-1784．

[12] 张艳秋，周广红．糖尿病肾病患者血管性血友病因子与颈动脉病变相关性分析[J]．医学临床研究，2017，34(1)：111-112．

[13] 黄辉，朱正球，栾云，等．超极速超声成像脉搏波技术在早期颈动脉粥样硬化风险动态评估中的应用价值[J]．东南大学学报(医学版)，2017，36(1)：9-13．

[14] 刘林林，王海霞，冯晨芳，等．缺血预适应训练联合降脂治疗对颈动脉粥样硬化斑块影响[J]．临床军医杂志，2018，46(2)：208-210．

[15] HU C Z，CAO Y L，HUO H Y，et al．Inhibitory effect of ghrelin on nicotine-induced VCAM-1 expression in human umbilical vein endothelial cells[J]．J Cardiovasc Pharmacol，2009，53(3)：241-245．

[16] 王维维，英俊岐，赵黎．阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征对高龄老年高血压患者左心功能和颈动脉内膜中层厚度的影响[J]．中国心血管病研究，2017，15(4)：324-328．

[17] 郜静，赵鹏，刘敏肖．阿托伐他汀钙对TIA患者颈动脉粥样硬化斑块及脑血流指标的影响[J]．海南医学院学报，2017，23(1)：56-58．

[18] UENO M，CARVALHEIRA J，OLIVEIRA R，et al．Expression of Concern：Circulating ghrelin concentr-ations are lowered by intracerebroventricular insulin[J]．Diabetologia，2017．

[19] YUAN M J，WANG T，KONG B，et al．GHSR-1a is a novel pro-angiogenic and anti-remodeling target in rats after myocardial infarction[J]．Eur J Pharmacol，2016，788：218-225．

[20] HARISSEH R，PILLOT B，GHARIB A，et al．Unacylated ghrelin analog prevents myocardial reperfusion injury independently of permeability transition pore[J]．Basic Res Cardiol，2017，112(1)：4．

[21] NELSON A D，CAMILLERI M，ACOSTA A，et al．Effects of ghrelin receptor agonist，relamorelin，on gastric motor functions and satiation in healthy volun-teers[J]．Neurogastroenterol Motil，2016，28(11)：1 705-1 713．

[22] GAO T，WU L，CHANG F，et al．Low circulating ghrelin levels in women with polycystic ovary syndrome：a systematic review and meta-analysis[J]．Endocr J，2016，63(1)：93-100．

[23] KILIC N，DAGLI N，AYDIN S，et al．Saliva/serum ghrelin，obestatin and homocysteine levels in patients with ischaemic heart disease[J]．Cardiovasc J Afr，2017，28(3)：159-164．

[24] ZHANG W Y，FRANCO D A，SCHWARTZ E，et al．HDL inhibits saturated fatty acid mediated aug-mentation of innate immune responses in endothelial cells by a novel pathway[J]．Atherosclerosis，2017，259：83-96．

[25] HEDAYATI N，ANNAMBHOTLA S，JIANG J，et al．Growth hormone-releasing peptide ghrelin inhibits homocysteine-induced endothelial dysfunction in porcine coronary arteries and human endothelial cells[J]．J Vasc Surg，2009，49(1)：199-207．

[26] GAIROLLA J，KLER R，MODI M，et al．Leptin and adiponectin：pathophysiological role and possible therapeutic target of inflammation in ischemic stroke[J]．Rev Neurosci，2017，28(3)：295-306．

[27] 张玉蛟，刘新胜，白冰，等．进展性脑梗死预测因素与预后分析[J]．中国实用神经疾病杂志，2018，21(5)：535-538．

[28] 贺文娟，杨海英，李瑛琦．超声评估联合血清脂联素检测在亚临床动脉粥样硬化早期诊断及预测中的意义[J]．中西医结合心脑血管病杂志，2017，15(21)：2 753-2 755．

[29] 黄超，曹亚英，田耀华，等．不同代谢肥胖表型与颈动脉内膜中层厚度的相关性研究[J]．中华疾病控制杂志，2018，22(1)：4-8，13．

[30] SONG D，FANG G，MAO S Z，et al．Selective inhibi-tion of endothelial NF-kappaB signaling attenuates chronic intermittent hypoxia-induced atherosclerosis in mice[J]．Atherosclerosis，2018，270：68-75．

[31] 杨静，陈新燕，吴永娟．超声评价放疗对颈动脉溃疡斑块形成的影响[J]．中国医学影像技术，2017，33(3)：381-385．

[32] 王文荣，熊开宇，何辉，等．血压对非动脉粥样硬化中年人颈动脉形态、血流动力学的影响[J]．中国动脉硬化杂志，2018，26(1)：60-64．

[33] 王倩，张亮．颈动脉粥样硬化斑块与脑梗死关系的高分辨磁共振研究[J]．中国实用神经疾病杂志，2017，20(17)：85-88．

[34] MAO Y Z，JIANG L．Effects of Notch signalling pathway on the relationship between vascular endothelial dysfunction and endothelial stromal transformation in atherosclerosis[J]．Artif Cells Nanomed Biotechnol，2018，46(4)：764-772．

[35] ZHUANG-ZHUANG W，YA-LAN F，XIAO-WEI W，et al．Carotid intima-media thickness in plaque-free area，carotid plaque and risk of ischemic stroke in high-risk population of North China[J]．Neuro Endocrinol Lett，2017，38(3)：208-214．

[36] 何薇，李霞，袁巍，等．超声诊断颈动脉粥样斑块与脑梗死的临床应用价值[J]．中国数字医学，2017，12(8)：68-71．

[37] 郭蕾．超声检测在急性脑血管病中的作用[J]．中国实用神经疾病杂志，2017，20(10)：99-101．

[38] UKKOLA O，POYKKO S M，ANTERO K Y．Low plasma ghrelin concentration is an indicator of the metabolic syndrome[J]．Ann Med，2006，38(4)：274-279．

[39] MOCCETTI F，WEINKAUF C C，DAVIDSON B P，et al．Ultrasound Molecular Imaging of Atherosclerosis Using Small-Peptide Targeting Ligands Against Endothelial Markers of Inflammation and Oxidative Stress[J]．Ultrasound Med Biol，2018，44(6)：1 155-1 163．

[40] 陈宁，杨明，黄锦平．非酒精性脂肪性肝病患者的血浆Ghrelin水平与颈动脉粥样硬化的相关性[J]．世界华人消化杂志，2008(34)：3 890-3 893．

[41] TESAURO M，SCHINZARI F，IANTORNO M，et al．Ghrelin improves endothelial function in patients with metabolic syndrome[J]．Circulation，2005，112(19)：2 986-2 992．

[42] WU G J，CAI X D，XING J，et al．Circulating motilin，ghrelin，and GLP-1 and their correlations with gastric slow waves in patients with chronic kidney disease[J]．Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol，2017，313(2)：R149-R157．

[43] WANG L，CHEN Q，KE D，et al．Ghrelin inhibits atherosclerotic plaque angiogenesis and promotes plaque stability in a rabbit atherosclerotic model[J]．Peptides，2017，90：17-26．

[44] AI W，WU M，CHEN L，et al．Ghrelin ameliorates atherosclerosis by inhibiting endoplasmic reticulum stress[J]．Fundam Clin Pharmacol，2017，31(2)：147-154．

[45] WEI H，CAO X，ZENG Q，et al．Ghrelin inhibits proinflammatory responses and prevents cognitive impair-ment in septic rats[J]．Crit Care Med，2015，43(5)：e143-e150．

[46] GOOTY V D，SINAIKO A R，RYDER J R，et al．Association Between Carotid Intima Media Thickness，Age，and Cardiovascular Risk Factors in Children and Adolescents[J]．Metab Syndr Relat Disord，2018，16(3)：122-126．

[47] LIAO P，YANG D，LIU D，et al．GLP-1 and Ghrelin Attenuate High Glucose/High Lipid-Induced Apop-tosis and Senescence of Human Microvascular Endothelial Cells[J]．Cell Physiol Biochem，2017，44(5)：1 842-1 855．

[48] 高峰利，韩涛，张维，等．血压变异性与急性脑梗死合并H型高血压患者脑梗死严重程度及颈动脉内膜中膜厚度的关系研究[J]．实用心脑肺血管病杂志，2017，25(8)：45-48．

[49] ZHANG S，GUO G L，YANG L L，et al．Elevated serum levels of ghrelin and TNF-alpha in patients with cyanotic and acyanotic congenital heart disease[J]．World J Pediatr，2017，13(2)：122-128．

[50] IANTORNO M，CHEN H，KIM J A，et al．Ghrelin has novel vascular actions that mimic PI 3-kinase-dependent actions of insulin to stimulate production of NO from endothelial cells[J]．Am J Physiol Endocrinol Metab，2007，292(3)：E756-E764．

[51] KELLOKOSKI E，KUNNARI A，JOKELA M，et al．Ghrelin and obestatin modulate early atherogenic processes on cells：enhancement of monocyte adhesion and oxidized low-density lipoprotein binding[J]．Metabolism，2009，58(11)：1 572-1 580．

[52] WANG Y T，WANG Y H，MA Y T，et al．ACAT-1 gene polymorphism is associated with increased susceptibility to coronary artery disease in Chinese Han population：a case-control study[J]．Oncotarget，2017，8(51)：89 055-89 063．

[53] LIU Z，ZHU H，DAI X，et al．Macrophage Liver Kinase B1 Inhibits Foam Cell Formation and Atherosclerosis[J]．Circ Res，2017，121(9)：1047-1057．

[54] KALAFATELI A L，VALLOF D，JORNULF J W，et al．A cannabinoid receptor antagonist attenuates ghrelin-induced activation of the mesolimbic dopamine system in mice[J]．Physiol Behav，2018，184：211-219．

[55] 万晶晶，成蓓，王彦富，等．脑肠肽Ghrelin通过生长激素促分泌素受体下调人源单核细胞株THP-1源性泡沫细胞酰基辅酶A：胆固醇酰基转移酶1表达的实验研究[J]．中华心血管病杂志，2009，37(11)：1 030-1 034．

[56] CHENG B，WAN J，WANG Y，et al．Ghrelin inhibits foam cell formation via simultaneously down-regulating the expression of acyl-coenzyme A：cholesterol acyltransferase 1 and up-regulating adenosine triphosphate-binding cassette transporter A1[J]．Cardiovascular Pathology，2010，19(5)：e159-e166．

[57] SIRCHAK E S，PATSKUN S V．Interrelation between ghrelin and gastrin in patients with combination of chronic gastritis and type 2 diabetes mellitus[J]．Wiad Lek，2018，71(2 pt 1)：311-314．

[58] IBRAHIM A S，ELDEEB M M，SALAMA O A，et al．Possible association of ghrelin/obestatin balance with cardiometabolic risk in obese subjects with Helicoba-cter pylori[J]．Endocr Regul，2018，52(2)：101-109．