针刺对高尿酸血症大鼠模型血尿酸等的影响

刘冰云，王心怡，王健彤，王 珊，刘旭峰，陈虹屹，睢明河

（北京中医药大学针灸推拿学院，北京 100029）

高尿酸血症是一种嘌呤与尿酸代谢异常的疾病，随着病情加重可发展为痛风，因此控制尿酸的升高可有效降低痛风的发病率。

在查阅的25篇关于针灸治疗痛风的文献中，仅有2篇是针对痛风高尿酸血症的治疗，其余均为治疗痛风性关节炎，其治疗主要起到降低炎症指标以及缓解局部关节症状的作用，而非从致病原因上进行干预，治标而非治本。本实验基于中医和西医对痛风发病原因的认识，所涉及的脏腑病理，拟通过针刺相关脏腑的俞、募、原穴，来调节脏腑功能，从而达到干预痛风高尿酸血症形成的目的。观察不同穴组对痛风高尿酸血症的干预作用。

1 实验材料及方法

1.1 实验材料 选用健康6周清洁级Wistar大鼠50只，雄性，体质量（200±20）g。由北京市海淀区兴隆实验动物养殖厂提供。合格号：SCXK-（军）2007-004。饲养于北京中医药大学针灸推拿学院针灸机理实验室。

1.2 主要试剂及仪器 造模剂：盐酸乙胺丁醇片（沈阳红旗制药有限公司，规格0.25 g×100片，批号H21022349）；腺嘌呤（美国Sigma-aldrich公司，每瓶25 g，批号BCBK3010V）；试剂：尿酸试剂盒、黄嘌呤氧化酶试剂盒、碱性磷酸酶试剂盒（南京建成生物工程研究所）。毫针：直径0.30 mm，长25 mm（苏州华佗医疗器械用品有限公司）；直径0.30 mm，长40 mm（北京汉医医疗器械中心）。低温离心机（5810 R，德国Eppendorf 公司）；超低温冰箱（MDF-U50V，日本三洋公司）；电子天平（ER-182A，日本）；P1000微量可调移液器（100～1 000 μL，芬兰DRGON）。

1.3 分组与造模 分组：采用完全随机设计法，利用随机数字表将Wistar大鼠分为5组：空白组、模型组、俞穴组、原穴组、募穴组，每组10只。除空白组外，另4组制作痛风高尿酸血症大鼠模型。造模：据熊湘明等[1]文献记载，自实验第1天起，模型组、俞穴组、原穴组、募穴组给予造模剂腺嘌呤100 mg/（kg·d）和乙胺丁醇250 mg/（kg·d）的比例，用蒸馏水将两者混合后，进行灌胃，连续给予21 d，21 d后改为隔日1次，直至第90 d实验结束，使大鼠始终保持持续性高尿酸血症。取材后，与空白组比较，模型组SUA、BUN指标含量呈显著升高（P＜0.05），即提示造模成功。

1.4 取穴 按照余曙光著《实验针灸学》[2]所附的常用实验动物针灸穴位取穴，分别为肝俞穴、脾俞穴、肾俞穴、天枢穴、关元穴、太溪穴、太冲穴、太白穴的大鼠对应点，均为双侧取穴。

1.5 各组处置方法 空白对照组：正常同步喂养，不进行任何处理；只做对照。模型组：仅造模，不进行任何针刺干预处理，与各针刺干预组同步捆绑固定，每次15 min；俞穴组：造模同模型组，隔日针刺肝俞、脾俞、肾俞；原穴组：造模同模型组，隔日针刺太冲、太白、太溪；募穴组：造模同模型组，隔日针刺天枢、关元。操作：俞穴组、原穴组、募穴组在造模的同时进行针刺干预，将毫针刺入穴区3～5 mm，每穴作均匀的捻转行针手法10 s，每次留针15 min，隔日1次，每10次为1疗程，每疗程结束后休息10 d，共90 d，3个疗程。实验结束后取材。

1.6 检测指标 SUA、BUN、ALT、AST。检测方法：于实验第90天治疗结束后禁食，次日将大鼠腹腔注射20%的乌拉坦（1 g/kg）进行麻醉，腹主动脉取血4～5 mL，注入含有惰性分离胶、促凝剂的促凝管中，轻轻摇晃以确保血液和促凝剂充分接触，不要用力过猛，以免出现溶血现象，血样在室温下自然凝血1 h，用离心机以4 000 r/min的数值分离血清，使用Sysmex XS 800 i型全自动生化分析仪检测各项指标。检测时间：各组均在实验结束后第一天，即第91天统一取材。

1.7 数据处理方法 应用SAS 9.4统计软件对所得数据进行统计学处理，以均数±标准差（x± s ）表示，多组间比较采用方差分析，组间两两比较采用SNK检验。

2 实验结果

2.1 各针刺干预组对SUA的影响 1）与空白组比较，模型组SUA明显升高，具有统计学差异性（P＜0.05）。2）与模型组比较，各针刺干预组SUA含量明显下降（P＜0.05）。3）与俞穴组比较，原穴组、募穴组SUA含量明显降低（P＜0.05）。4）与原穴组比较，募穴组SUA含量明显偏低（P＜0.05）。见表1。

2.2 各针刺干预组对BUN的影响 1）与空白组比较，模型组BUN明显升高，具有统计学差异性（P＜0.05）。2）与模型组比较，各针刺干预组BUN含量均下降，具有统计学差异性（P＜0.05）。3）与俞穴组比较，原穴组的BUN含量较高（P＜0.05）。与原穴组比较，募穴组的BUN含量较低（P＜0.05）。

表1 针刺俞、原、募穴对大鼠SUA、BUN的影响（x± s ）

2.3 各针刺治疗组对AST、ALT的影响 俞穴组、原穴组、募穴组AST活性较模型组均偏高，ALT活性较模型组均偏低，但差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 针刺俞、原、募穴对大鼠AST、ALT的影响（x± s ）

3 讨论

痛风高尿酸血症在传统医学中属“痹证”“历节”等范畴，有内外因素之分，二者相互影响。外因主要责之于风、寒、湿、热、浊瘀之邪，积聚日久，使气血运行迟涩，脉络闭阻，脏腑功能失调而迁延不愈。内因则与肝、脾、肾三脏关系最为密切，同时小肠主受盛与化物，泌别清浊，大肠主津液，传导糟粕，二者同主饮食的消化吸收及排泄，若肝失疏泄、脾失健运、肾失开阖，则津液代谢失常，浊毒沉积于脏腑经络，可引发痛风高尿酸血症[3-6]。现代医学认为，嘌呤与尿酸的代谢异常是痛风高尿酸血症最重要的生物化学基础[7-11]，是导致该病的基本原因。嘌呤核苷酸主要在肝、小肠黏膜和胸腺中合成，在肝、小肠、肾中分解代谢；尿酸是在酶催化嘌呤作用下产生的，通过肾脏以及肠道排泄[12]。由此可见，高尿酸血症均与肝、肾、小肠、大肠有关[13]。

《灵枢·九针十二原》曰：“五脏有疾，当取十二原。”《类经图翼》说：“五脏居于腹中，其气脉俱出于背之足太阳经，是为五脏之俞”。募穴为脏腑之气所结聚于胸腹部的腧穴，其分布与所属脏腑位置相近，并与背俞穴相对应，主要治疗相关的脏腑疾病，尤以治疗六腑病症为佳。《十四经发挥》又说：“阴阳经络，气相交贯，脏腑腹背，气相通应”。可见，俞穴、原穴、募穴在古代文献记载中均是治疗相关脏腑疾病的重要穴位。同时，现代研究表明，三组腧穴除了在古文中论述的作用外，还与脏腑之间存在着某种特殊或者特定的联系途径[14-16]。

本实验研究发现，针刺俞穴组、募穴组、原穴组对降低SUA、BUN均有影响，募穴组效果最好，降低SUA原穴组好于俞穴组，降低BUN俞穴组好于原穴组。可能是因为当针刺相应腧穴时，可以调节相关脏腑对SUA、BUN的合成、代谢以及排泄等功能，从而达到降低SUA和BUN的作用。AST、ALT的活性程度虽有小幅度波动却仍在正常值内，各组间均无统计学意义，可能是造模剂未对肝脏造成影响[17]，其原因还需进一步研究。其中募穴组干预效果最为显著，可能是因为小肠是分解代谢嘌呤核苷酸最旺盛的器官[18]，形成的尿酸均经肠道和肾脏排泄。而消化道中产生的氨、嘌呤代谢过程中产生的氨，都是尿素生成的基础物质，最终尿素通过肾脏排出体外。因此，SUA和BUN的来源与形成都与肠道有直接关系，是生产、代谢其物质的重要场所。从中医的角度来分析，痛风高尿酸血症是浊瘀之毒沉积在脏腑经络等部位，从而使脏腑功能失调，进一步加重影响各脏腑的气化功能，以及经络运行气血，滋养四肢百骸的功能，使该病缠绵不愈。本实验中所选用的大、小肠的募穴与另外2组不同，能更直接与其脏腑的解剖位置相对应，大肠募穴“天枢”具有疏通肠腑、理气通便、消食导滞、活血化瘀之功；小肠募穴“关元”具有导赤通淋、导气利水的作用。此外，“关元”穴是足三阴和任脉的交会穴，内应胞宫精室，为元阴元阳之气闭藏之处，具有培元固本之功效，使肾气充足，不受外邪侵犯。有研究证明[19]，关元穴确实具有养生保健，增强人体免疫力的作用。

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